急性经口毒性实验ppt课件

.急性口服毒性试验(AcuteOralToxicityTest)，第一，实验目的：(a)通过这次实验，可以掌握口服给药胃技术，致死量的一半含义。(b)通过此次实验，学习致死量一半的计算和毒性决定。其次，测量方法：本实验用胃管营养法测量敌敌畏DDV(80g/100ml)的致死剂量(LD50)的一半。(a)实验动物和组：首选健康成人鼠标(18g25g)和老鼠(180g220g)。实验前动物必须在实验环境中适应3 5d时间，掌握正常活动及健康状态，淘汰不健康或体重不符合要求的动物。这次实验中，在对体重18-25g的老鼠进行实验时，根据体重和编号、随机分组原则，将实验动物分成5组，每组8只。(b)剂量选择：首先审查与测试化学物质结构及理化性质相似的化学物的LD50，作为测试化学物质的预期毒性中值，即中剂量组，然后上下推1-2剂量组进行预实验。根据LD50计算方法，每个剂量组的间距可以排列为等比系列或等差系列。本实验应以概率单位法计算LD50，并按等比系列排列，一般使用1: 0.8，例如，敌百虫的最大容量为125mg/kg，下一个剂量组为125mg/kg*0.8=100mg/kg，然后是剂量组，(c)测试化学物质的制造和稀释，1 .溶剂：水溶性测试化学物以蒸馏水为溶剂，用溶液制造。脂溶性试验化学物由吐温-80、二甲基亚砜、植物油等制成。(3)测试化学物质的制备和稀释，2 .试验物质稀释等容量稀释法，每一剂量组的动物给予相同单位重量体积的试验化学物，根据预先设计的剂量，用多种不同浓度的试验对象溶液分别稀释。例如，在这次实验中，5个剂量组：角剂量组动物接受相同单位体重量测试的人是10ml/kg。等容量稀释法，d:设计毒性容量，mg/kgV:动物剂量(相同单位重量)10ml/kgX:每个组需要制造的测试液浓度(mg/ml)示例：第一次曝光量d=51.2m，依次：5组需要准备的试验品浓度为1:51.2mg/10ml 2条：64mg/10ml 3条：80mg/10ml第4条：100mg/10ml第5条：125mg/10ml角(4)以上灌溉方法：鼠标伪装方法：左手大拇指和食指抓住鼠标头部的两只耳朵后，皮肤、无名指或小指紧紧抓住尾部，将鼠标腹部朝上，姿势端正，注意将动物的上消化道固定直。(。右手拿着连续注入胃导针的注射器，在动物的口腔侧放入管针，避免牙齿，沿着咽后壁慢慢推进食道。如果有抵抗力，可以轻轻上下滑动进行勘探，电阻消失后，深的人用胃，通常注射深度鼠标2.5 4厘米，接着注入试验用溶液。动物挣扎的时候，要停止注射针头或拔出唾液，不要强行插入，以免刺穿食道，甚至进入器官，导致动物立即死亡。小鼠第一次胃容量为10-20ml/kg，(5)观察中毒征象和死亡情况，观察感染后体征和发生，观察并记录死亡计数和时间，以及死亡前特征。高良潮动物的死亡往往发生得很快，暴露在毒液中后，应立即仔细观察。根据观察分析中毒特点和毒性靶器官。，观察项目包括：(1)中枢神经系统和神经根系统：异常位置、异常声音、焦虑、迟钝、痉挛、痉挛麻痹、运动障碍、外部反应过敏或迟钝；(2)植物神经系统：瞳孔扩大或缩小，唾液或眼泪；(3)呼吸器官：鼻孔液体，鼻翼煽动，血液分泌物，呼吸很慢，呼吸太快，抬起头呼吸；(4)泌尿生殖系统：会阴污染，分泌物，阴道或乳房膨胀；(5)皮肤和毛发：皮肤充血、发蓝、毛发浓密且不洁；(6)眼睛：眼球突出，结膜充血，角膜混浊，血液分泌物；(7)灭火器：腹泻，食欲不振。3，LD50计算：可以通过多种方法测量LD50。概率单位法、喇叭法、寇法等，概率单位法可以计算反应速度水平的所有容量，实验2-5组都可以。遵守概率单位法的要求：1 .剂量按相同的比例顺序排列，两个相邻剂量组之间的比例一般为1: 0.82。每个实验组的动物数量都相同。概率单位法计算LD50公式(用作5个剂量组时)x3。-第三组的剂量对数(X3=log80，80mg/kg) I -相当于两个相邻剂量率(大容量组中的分子)的对数(I=log (125/100)的死亡率概率单位(计划确认).低容量组到高容量组的顺序。5.0 -死亡率为50%时相应反应率的概率单位，LD50的95%信任限制=log-1(X 1.96SX)，4，结果评价：根据实验动物中毒征象、死亡时间、结果LD50及测试对象种类，根据相应国家标准或技术规格的急性口服毒性等级标准(教科书第215页-杀虫剂的急性毒性等级)，确定测试对象的毒性等级，判断测试对象的毒性大小。5，注意事项：1。胃管营养时要防止食道损伤或错位2。正确捕捉动物，防止咬，防止动物损伤3。注入量计算和操作必须准确，否则结果4。防止工人中毒。注意通风，不要把药品洒在手上、脸部皮肤、身体其他部位，在运行过程中要小心。VI，实验报告应包括：1.实验动物