课题2　月季的花药培养 (13).ppt

课题2:月季的花药培养,花药,花丝,雄蕊,柱头,花柱,子房,萼片,胚珠,花瓣,花托,雌蕊,图1花的基本结构,（一）被子植物的花粉发育,1.雄蕊,一、基础知识,由花粉母细胞经过减数分裂形成的单倍体的生殖细胞.,2.花粉:,3.花粉发育阶段：,小孢子四分体时期；单核期；双核期,4.花粉的发育过程,思考：1.被子植物花粉发育过程中的四分体时期与减数分裂的四分体时期是同一阶段吗？,小孢子四分体时期,小孢子母细胞(2n),()时期(n),单核()期(n),双核期(n),()细胞核(n),()细胞核(n),()细胞(n),()细胞(n),（)个精子(n),()分裂,()分裂,单核()期(n),()分裂,减数,小孢子四分体,居中,靠边,有丝,生殖,生殖,花粉管,营养,有丝,2,4.花粉的发育过程,（二）产生花粉植株的两种途径,移栽,体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，胚芽，胚轴，胚根等结构完整，就像一颗种子,原因：培养基中的激素种类及浓度配比,（三）影响花药培养的因素,阅读P38-39思考：,诱导花粉植株能否成功及诱导成功的高低，主要影响因素是_和_-,材料的选择,培养基的组成,a.材料选择什么时期最好，为什么？,b.如何选择单核期细胞？,花期为初花期，花粉发育在单核靠边期，成功率最高。,选择完全未开放的花蕾,d.还有哪些影响花药培养的因素？,亲本植株的生长条件，材料的预处理及接种密度等,c.为什么花瓣松动会给消毒带来困难？,微生物可能侵入花药，给材料消毒带来困难,实验操作,一、材料的选取二、材料的消毒三、接种和培养,（一）材料选取,2、通过来_确定是否处于适宜的发育期。方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。,1、从花期看：从花粉看：从花蕾看：,月季的初花期,单核靠边期,完全未开放的,镜检,花蕾,0.1%的氯化汞溶液24min,70%的酒精(大约30s),无菌水(清洗),无菌水冲洗35次,（二）材料的消毒,无菌吸水纸吸干,（三）接种和培养,损伤花药，容易从受伤部位产生愈伤组织，即得不到单倍体,思考：1、为何不能损伤花药且要彻底去除花丝？,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。,2、培养时需要注意哪些事项？,花药开裂长出愈伤组织或释放胚状体。长出愈伤组织要及时转移到分化培养基上，释放的胚状体，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，否则这些植株将很难分开,在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，染色体组的数目常常会发生变化.（主要原因是营养核和生殖核融合造成的）所以还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。,每瓶接种花药710个，温度控制在250C左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。,课题成果评价,选材是否恰当选材是否成功是花药培养成功的关键。应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。,无菌技术是否过关如果出现了污染现象，说明某些操作步骤，如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。,接种是否成功如果接种的花药长