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文档简介
,乙型肝炎血清标志物检测及重要性,山西医科大学第二医院检查科郭善峰。重点,介绍抗原组成感染源病原学诊断血清模型及临床意义,End。前言,中国各种传染病中病毒性肝炎发病率最高的乙型肝炎在我国已有近3000万病毒肝炎的危险,一般指由嗜肝病毒感染引起的肝炎。HBV-肝DNA病毒,a、病毒性肝炎HepatitisVirus、肠道传播、肠道外传播、F、TTV?其他,e,nanb,b,d,c,病毒性肝炎-背景,、感染源、粪便、血液/、血液性物质/、体液、血液/、血液性物质/、体液、粪便、传染途径、粪便-口、皮肤通过,乙型肝炎病毒、乙型肝炎的病原体乙型肝炎1,是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的,以肝脏炎性疾病为主,可以引起多种器官损害的传染病。这种疾病在世界各国广泛流行,主要侵犯儿童和青年期,少数患者可以转换为肝硬化或肝癌。由此成为严重威胁人类健康的全球性疾病,是目前我国最广泛流行的最有害、最严重的传染病。乙型肝炎不知不觉间就不流行了,一年到头都可能发病,但是多种酸。近年来,乙型肝炎发病率大幅增加,据估计全世界一半以上的人口感染了HBV,5%的人口是HBV慢性感染。中国:乙型肝炎高发地区HBsAg检出率达9.8%,电子显微镜下HepatitisBVirus,乙型肝炎病毒HBV、乙型肝炎病毒(HBV),最近核酸分子杂交技术的发展,可以在肝外器官细胞中检测出HBV-DNA。通过北京乙型肝炎病毒实验研究,提出了在肝外细胞中复制的证据。人类HBV可能在需要进一步研究的肝外细胞内复制。HBV感染者血清在电子显微镜下有3种病毒颗粒。1 .大邱粒子,完整的HBV粒子直径为42nm,又称Dane粒子,分为包膜和细胞核两部分。外套皮和包膜包含表面抗原,衣壳有结构体,核心抗原,核心抗原下隐藏着e抗原。乙型肝炎病毒HBV,2 .小球状粒子,阳性血清中最多的粒子,主要没有表面抗原、核酸和DNA成分,不完全的hbv.3 .管粒子实际上是表面抗原,1 .HBV形状结构、大球体粒子(Dane粒子)、小球体粒子、管状粒子、HBVvirion、Theinfectousvironischedanepaleticle。Dane粒子(完全病毒)形式,HBsAg,hbcag,hbhbv DNA,dnap,(外膜蛋白),both comprisedofhbsag、HBV nomenclature,HBV : heipatitisbvirus HBsAg : heightaceantihbsab : heightsbvirussurfaceantoindhbcag : heipatities,抗原组成(a)-HBsAg位于病毒表面,是一种糖蛋白(本题名:澳大利亚抗)出现的时间:HBV感染后2-6个月(潜伏期)HBsAg有10个亚型,每个亚型之间有不完全的交叉免疫。亚型单克隆抗体研究表明,d和y,w,r晶体簇可以同时存在于同一病毒抗原粒子上,形成adwr,aywr,adyw,adyr复合亚型。其机制是病毒不同亚型的双重感染。单亚型病毒感染后,部分HBV-DNA发生点突变。状态反复,肝脏损伤严重,HBV感染者血清中HBsAg阳性,-HBs阳性。四种亚型(adr、adw、ayr、ayw)。刺激身体-HBs。HBsAg血清中HBsAg阳性是HBV感染的标志。它本身具有抗原性,没有传染性。但是HBsAg经常与HBV一起存在,因此被认为是传染性的标志之一。但是HBV-DNA从x-基因区的末端开始可以与肝细胞反向整合,集成s-基因表达强,持续生成HBsAg,抑制集成HBcAg基因组,不表达HBeAg,HBcAg,在这种情况下,HBsAg从体内取出后可能继续呈阳性,理论上,HBsAg阳性血没有传染性,急性HBV感染后,血清中首先出现HBsAg,在整个急性期都可以阳性,到恢复期为止,效价可能下降或音译。如果HBsAg为6个月以上阳性,则称为慢性HBsAg载体(无症状HBsAg载体),可以多年培养。HBsAg效价一般被认为与病变程度不成比例。肝功能正常,HBsAg的高液滴,肝脏可能是重要的病变。如果HBsAg是阴性,DNAp是阴性,就表示没有重要的传染性。相反,可能有肝功能异常、HBsAg的低逆转、肝脏部分肝硬化、肝癌患者的HBsAg阴性或低逆转等明显病变。无症状HBsAg载体或慢性活性乙型肝炎HBsAg水滴变化不能表示病情轻重,因此分解不能将HBsAg效价的变化作为判断病情轻重和药物治疗效果的指标。免疫电镜和免疫荧光法鉴定肝细胞浆中的HBsAg,血清HBsAg阴性对其机制没有确切的解释。已知原因之一是测试灵敏度为10-5,无法测量最小感染量(10-7),10%为假阴性,因此对HBsAg的判断为阳性,阴性不能排除HBV感染。HBV-DNA表示,近几年在白细胞或肝细胞中检测出,HBV感染是否仅在HBsAg中呈阳性,或者除此之外,应与其他标记一起判断。HbsAg,持续时间急性自我限制肝炎:血液中的HBsAg大部分可以在1-6周、最多6个月内消失慢性肝炎或慢性HBsAg携带者:持续阳性。抗原组成(b) - HBcAg,HBcAg是HBC复制指标。Dane颗粒的核心部分和肝细胞核内血清中不容易检测到的HBcAg的主要成分是蛋白质存在于刺激身体产生抗凝剂的抗细胞核中,在乙型肝炎的急性期、恢复期、HBsAg携带者中检测出抗体性-HBc。除非HBVC基因序列有极小的变异或感染者有免疫缺陷。-HBcIgM阳性提示出现在急性或慢性感染急性发作、HBcIgG出现晚,但可以维持数年或一辈子。(抗hbs,出现时间:急性感染后期或HBsAg转换后(过了几个月才发现)。6-12月内逐渐上升到最高值,可能持续数年,但点价逐渐下降。抗hbs是一种保护抗体(中和抗体),显示恢复期有HBV感染。 -HBs对同一HBsAg亚型的HBV再感染有免疫力,但其他亚型的HBV防护能力不完整。抗原组成(iii) - HBeAg与HBV核心的可溶性蛋白抗原HBeAg和Dane粒子的发生平行,根据血液中DNA聚合酶的生长和减少,血液中HBeAg的出现可以用作HBV克隆和血清感染指标。在急性HBV感染时,HbeAg的发生时间比HBsAg稍晚,如果HBeAg在分期后继续存在,则在预测慢性趋势的情况下消失。大部分情况持续意味着患者处于高感染和低反应期。刺激身体生成抗HBe。转化过程从免疫耐受转化为免疫激活,此时病变活动激化。抗hbe与受感染肝细胞表面的e抗原结合,可以破坏受感染肝细胞的补体介导,抗hbe的出现是预后良好的标志。抗HBe两次后病毒复制停止,传染性降低。部分患者还在进行被称为HBeAg阴性慢性肝炎的病毒复制、肝炎活动。HBVDNA是病毒复制和传染性的最直接证据。检测方法:dot hybridization,PCR方法用多聚合酶链反应(PCR)的体外DNA扩增(10 fgpfg/ml)测定极微量病毒,近年来灵敏度提高了100倍以上。HBV-DNA-p是HBV核心的DNA-p,在病毒复制过程中充当反向酶。DNA-p活性是HBV复合缺陷活性的重要指标。HBV-DNA和DNA-p检测有助于判断HBV感染者病毒的复制程度和传染性,更敏感地评价抗病毒药的疗效。乙型肝炎,抗原组成(4)-HBV的外壳上有两种刺激剂:前S1和前S2,阻断HBV和肝细胞受体的结合,显示病毒抵抗引起的抗前S1和抗前S2的出现,状态好转和痊愈的趋势,感染源,感染源、高、中、低/无法检测、血液、精液、尿液、血清、阴道分泌物、粪便、伤口渗出液、唾液、汗水、眼泪、牛奶、各种体液中的HBV、血液介导的输血、注射、手术和牙科手术、唾液等剃须刀、牙刷、蚊子咬的等母婴垂直传播,会在分娩过程中的小病变中传播产妇和婴儿的紧密接触性传播,HBV传播途径。病因诊断(a)-抗原抗体检测,主题:HBsAg、anti -HBs、HBeAg、anti -HBe、anti -HBc和anti -HBcIgM方法ELISA(,ELISA主要方法,间接方法:确定抗HBs夹层法:HBsAg和HBeAg竞争法:确定抗HBc中和法:确定抗HBe捕获方法:抗HBcIgM测定,病因诊断(2)临床主要用于监测治疗反应。乙型肝炎为什么要定量检查为“半”,乙型肝炎作为全球性的传染病严重威胁着人类的健康。我国是乙型肝炎高发国家。据统计,全球无症状携带者(HBsAg携带者)为2.8亿人,我国超过1亿人,大部分处于无症状状态。因此,乙型肝炎的早期诊断对控制感染源和减少发病率和疾病非常重要。酶标记(ELISA)检查自20世纪80年代中期开始,对乙型肝炎的“2半”定性测量在疾病的诊断、状态监测、疗效观察中发挥了一定的作用,但是HbsAg的酶检查灵敏度低,实际上没有定量测定血清中HbsAg的含量。随着临床医学的发展,定性检查已经远远不能满足临床和患者的要求。乙型肝炎的化学发光免疫测定法“2半”的定量分析,大大弥补了酶矫正性测定及低敏感度的不足。,血清检查的临床意义,HBsAg抗HBsHBeAg抗HBc临床意义,急性或慢性感染(大山羊),-,乙型肝炎后期或慢性感染(小山羊),血清检查的临床意义,HBsAg抗HBsHBeAg抗HBc临床意义,血清检查的临床意义,血清检查的临床意义,急性或慢性感染(传染性弱点),-,-,-,-,慢性带菌者,HBV感染恢复,免疫力,igmananti-HBc,乙型肝炎5项检查的影响因素,1 .样品收集和处理的效果1.1标本重度溶血和红细胞混合的血清不容易沉淀或附着在聚乙烯孔,孔中残留的血红蛋白与过氧化物酶一样活性,催化基质产生颜色假阳性,严重溶血标本停用。1.2塑料试管可以吸附抗原物质,如果将样品放在塑料管里很久,样品的抗原含量就会减少,从而产生假阴性。最好使用一次性玻璃管或真空管采集血管。使用抗凝剂标本,肝素抗凝剂血浆会增加od值,高浓度肝素具有强负电荷吸附酶标记,可能不易溶解。EDTA、酶抑制剂(如NaN3)抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。1.3标本不完全凝固,正常采血后1/2 2小时开始凝固,18 24小时血液块
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