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文档简介

1、1 2 数字数字 PCR(digital PCR,dPCR) PCR(digital PCR,dPCR) 技术是近年技术是近年 来迅速发展起来的一种定量分析技术。与传统来迅速发展起来的一种定量分析技术。与传统 定量定量 PCR PCR 技术不同的是数字技术不同的是数字 PCR PCR 不依赖于扩不依赖于扩 增曲线的循环阈值增曲线的循环阈值(CT(CT值值) )进行定量，不受扩增进行定量，不受扩增 效率的影响，也不必采用看家基因和标准曲线，效率的影响，也不必采用看家基因和标准曲线， 是对起始样的绝对定量。是对起始样的绝对定量。 3 主 要 内 容 数字数字 PCR 的发展与原理的发展与原理 数字

2、数字 PCR 的应用的应用 3 1 2 数字数字 PCR 的前景展望的前景展望 4 5 6 传统 PCR 或定量 PCR 反应都是在 96 /384 孔 板中进行的，因此早期的 数字 PCR 技术也采用 96 /384孔板作为反应单元。 这远远不能满足数字 PCR 对反应单元数的需求，于 是开始制造微升和纳升级 别的反应室，在提高灵敏 度的同时减少了反应体系 的总体积。 1.微反应室/孔板数字 PCR 7 2.微流控数字 PCR 随着微流芯片技术的发展，数字 PCR 借助微流芯片， 可以把样本准确并且快速的分成若干个独立的反应单元， 各个单元之间互不影响，可以多步反应同时进行。提高反 应通量的同时也降低了反应消耗成本。 8 3.微滴数字 PCR 微滴数字 PCR 借鉴了乳液 PCR，即将 DNA 模板与连接 引物的磁性微球以极低的浓度(比如单拷贝) 包裹于油水两 相形成的纳升至皮升级液滴中进行 PCR 扩增，扩增后的产 物富集在磁性微球上，收集破乳后进行测序。通过油水两 相间隔得到的以液滴为单位的 PCR 反应体系，比微孔板和 IFC 系统更容易实现小体积和高通量，而且系统简单，成 本低，因此成为理想的数字 PCR 技术平台。【2

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