gg动物细胞培养和核移植技术

1、gg动物细胞培养和核移植技术 动物细胞工程动物细胞工程 gg动物细胞培养和核移植技术 动物细胞培养动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞融合 单克隆抗体技术单克隆抗体技术 动物细胞核移植动物细胞核移植 动物动物 细胞细胞 工程工程 常用常用 技术技术 复习：植物细胞工程中常用的技术？复习：植物细胞工程中常用的技术？ 植物组织培养和植物体细胞杂交植物组织培养和植物体细胞杂交 其他动物细其他动物细 胞工程技术胞工程技术 的基础的基础 gg动物细胞培养和核移植技术 如果一个大 面积烧伤的病人， 自体皮肤有限， 其他渠道的皮肤 来源不足。如何 才能获得大量的 自体健康皮肤？ gg动物细胞培养和核移植技术

2、人耳鼠“人耳鼠”再出风头 2001年，一只特别的活老鼠在 北京引起轰动这是有着一对红 眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的 小白鼠。值得一提的是，这只小白 鼠的背上，竟长着一只几乎与身子 一般大小的“人耳”。这只老鼠背 上的“人耳”是由上海市第九人民 医院副院长、整复外科主任曹谊林 教授利用组织工程技术复制出来的。 在京展出的数天，尽管门票高达 20元，但还是有将近20万人，心甘 情愿地掏钱一睹“人耳鼠”的风采。 人耳鼠的出现，透露了怎样的信息？ gg动物细胞培养和核移植技术 gg动物细胞培养和核移植技术 一、动物细胞培养一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的动物细胞培养就是从动物

3、机体中取出相关的 组织组织,将它分散成单个细胞将它分散成单个细胞,然后然后,放在适宜的培养放在适宜的培养 基中基中,让这些细胞生长和增殖让这些细胞生长和增殖. 细胞增殖细胞增殖 2、原理、原理 1、概念、概念 3、过程：、过程： 复习：植物组织培养复习：植物组织培养 在无菌和人工控制的条件下在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、将离体的植物器官、 组织、细胞，培养在人工控制的培养基上，给予适组织、细胞，培养在人工控制的培养基上，给予适 宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终 形成完整的植株。形成完整的植株。 gg动物细胞培养和核移植技术

4、过程过程 幼龄动物幼龄动物 取动物器官取动物器官 和组织和组织 剪碎组织剪碎组织 胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理 细胞培细胞培养养 单个细胞单个细胞 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 gg动物细胞培养和核移植技术 3、过程：、过程： 剪碎的动物组织块剪碎的动物组织块 细胞悬浮液细胞悬浮液 胰蛋白酶胰蛋白酶 10代细胞代细胞 原代培养原代培养 50代细胞代细胞传代培养传代培养 无限传代无限传代 单个细胞单个细胞 加培养液加培养液 动物组织细胞间隙中动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞维等蛋白质，将细胞 网络

5、起来形成具有一网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织定弹性和韧性的组织 和器官。和器官。传代培养：将原代细传代培养：将原代细 胞从培养瓶中取出，胞从培养瓶中取出， 配制成细胞悬浮液，配制成细胞悬浮液， 分装到两个或两个以分装到两个或两个以 上的培养瓶中继续培上的培养瓶中继续培 养，称为传代培养。养，称为传代培养。 原代培养：从机体取原代培养：从机体取 出后立即培养的细胞出后立即培养的细胞 为原代细胞。（分装为原代细胞。（分装 前的细胞培养）前的细胞培养） （水解弹性纤维）（水解弹性纤维） gg动物细胞培养和核移植技术 4、动物细胞生长特性、动物细胞生长特性 v悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上

6、，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。称为细胞贴壁。 细胞贴壁：细胞贴壁： v培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易 于贴附。于贴附。 要求：要求： gg动物细胞培养和核移植技术 接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 增加。增加。 50代以后代以后 失去接触失去接触 抑制抑制 接触抑制接触抑制 gg动物细胞培养和核移植技术 细胞

7、悬浮液细胞悬浮液 胰蛋白酶胰蛋白酶 10代细胞代细胞 原代培养原代培养 50代细胞代细胞 传代传代 培养培养 细胞株细胞株 无限传代无限传代 细胞系细胞系 单个细胞单个细胞 加培养液加培养液 遗传物质遗传物质 未改变未改变 遗传物质遗传物质 已改变已改变 剪碎的动物组织块剪碎的动物组织块 传代培养的细胞一般传代培养的细胞一般 传至传至10代左右细胞生长停滞，大代左右细胞生长停滞，大 部分细胞衰老死亡，少数细胞存部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到活到4050代，这种传代细胞为代，这种传代细胞为 细胞株。细胞株。 细胞株：细胞株： 细胞系：细胞系：细胞株传代至细胞株传代至50代代 后又出现细胞生长

8、停滞状态，后又出现细胞生长停滞状态， 只有部分细胞由于遗传物质的只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在改变，使其在 培养条件下可培养条件下可 以无限制传代，以无限制传代， 这种传代细胞这种传代细胞 为细胞系。为细胞系。 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点， 失去接触抑制，容易传代培养。失去接触抑制，容易传代培养。 gg动物细胞培养和核移植技术 动物胚胎或幼龄动物的组织或器官动物胚胎或幼龄动物的组织或器官 分裂旺盛，分化程度低，易培养分裂旺盛，分化程度低，易培养 gg动物细胞培养和核移植技术 P44思考思考 1、用胰蛋白酶分散细胞，由此可说明细胞间的

9、物质、用胰蛋白酶分散细胞，由此可说明细胞间的物质 主要是什么成分？主要是什么成分？ 2、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？那将动物组织分散、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？那将动物组织分散 成单个细胞时要注意什么问题呢？成单个细胞时要注意什么问题呢？ 3、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 主要是蛋白质主要是蛋白质(胶原蛋白等胶原蛋白等)。 能，应注意时间的控制能，应注意时间的控制 不能，因为动物细胞培养适宜的不能，因为动物细胞培养适宜的PH为为7.27.4，此，此 环境下胃蛋白酶（环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶）没有活性，而胰蛋白酶(7.2- 8.

10、4)的活性较高。的活性较高。 gg动物细胞培养和核移植技术 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中， 根据你所学的内环境的知识，讨论以下问根据你所学的内环境的知识，讨论以下问 题：题： 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 5、动物细胞培养的条件、动物细胞培养的条件 P46【讨论】【讨论】 充足的营养供给、适宜的温度、适宜的充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。和气体环境。 无菌、无毒的环境。无菌、无毒的环境。 gg动物细胞培养和核移

11、植技术 1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境 2、营养（与体内基本相同）、营养（与体内基本相同） 3、温度和、温度和PH 4、气体环境：、气体环境： 保证细胞顺利的保证细胞顺利的 生长增殖生长增殖 无菌处理、添加一定量的抗生素，定期更换培养液无菌处理、添加一定量的抗生素，定期更换培养液 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元 素、维生素、动物血清、血浆等。素、维生素、动物血清、血浆等。 O2:细胞代谢所必须细胞代谢所必须 CO2：主要维持培养液的：主要维持培养液的PH （95%空气和空气和5% CO2 ） 5、动物细胞培养的条件、动物细胞培养的条

12、件 gg动物细胞培养和核移植技术 合成合成培养基培养基 合成培养基成分已知，便于对实验条件合成培养基成分已知，便于对实验条件 的控制。但与天然培养基相比，有些的控制。但与天然培养基相比，有些 天然的未知成分尚无法用已知的化学天然的未知成分尚无法用已知的化学 成分所替代，因此，细胞培养中使用成分所替代，因此，细胞培养中使用 的基础合成培养基还必须加入一定量的基础合成培养基还必须加入一定量 的天然培养基成分，以克服合成培养的天然培养基成分，以克服合成培养 基的不足。最普遍的作法是加入小牛基的不足。最普遍的作法是加入小牛 血清。血清。 gg动物细胞培养和核移植技术 天然天然培养基培养基 直接采用取自

13、动物体液或从组织中提取的直接采用取自动物体液或从组织中提取的 成分作培养液，主要有血清、组织提取成分作培养液，主要有血清、组织提取 液、鸡胚汁等。液、鸡胚汁等。 使用最普遍的天然培养基是血清，基本以使用最普遍的天然培养基是血清，基本以 小牛血清最普遍。血清由于含有多种细小牛血清最普遍。血清由于含有多种细 胞生长因子、促贴附因子及其多活性物胞生长因子、促贴附因子及其多活性物 质。与合成培养基合用，能使细胞顺利质。与合成培养基合用，能使细胞顺利 增殖生长。增殖生长。 gg动物细胞培养和核移植技术 无血清培养基无血清培养基 v动物血清成分复杂，各种生物大小分子混合动物血清成分复杂，各种生物大小分子混

14、合 在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清对在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清对 细胞生长很有效，但后期对培养产物的分离、细胞生长很有效，但后期对培养产物的分离、 提纯以及检测造会成一定困难。另外高质量提纯以及检测造会成一定困难。另外高质量 的动物血清来源有限，成本高，限制了它的的动物血清来源有限，成本高，限制了它的 大量使用。大量使用。 无血清培养基不加动物血清，在基础培无血清培养基不加动物血清，在基础培 养基中加入细胞生长有效因子，激素等。养基中加入细胞生长有效因子，激素等。 gg动物细胞培养和核移植技术 P46 为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血

15、 清？清？ v血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其 中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。 v氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其 中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨 基酸），必须由培养液提供。基酸），必须由培养液提供。 v血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子；血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子； 血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因 子及其他活性物质

16、，能促进细胞的生长、增殖和贴子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴 附。附。 v因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增 殖，一般需添加殖，一般需添加10%20%的血清。的血清。 gg动物细胞培养和核移植技术 超净工作台超净工作台 CO2培养箱培养箱 冰箱冰箱 gg动物细胞培养和核移植技术 gg动物细胞培养和核移植技术 6、动物细胞培养技术的应用、动物细胞培养技术的应用 v生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单 克隆抗体等克隆抗体等 v健康细胞培养：如获得大量自身的皮肤细胞，健康细胞培养：如获得大量自身

17、的皮肤细胞， 用于植皮。用于植皮。 v用于检测有毒物质用于检测有毒物质 v用于生理、病理、药理等方面的研究，为治用于生理、病理、药理等方面的研究，为治 疗和预防疾病提供理论依据疗和预防疾病提供理论依据 gg动物细胞培养和核移植技术 植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养 原理原理 培养基性质培养基性质 培养基特有成分培养基特有成分 培养结果培养结果 培养目的培养目的 细胞的全能性细胞的全能性 细胞增殖细胞增殖 固体培养基固体培养基 液体培养基液体培养基 蔗糖蔗糖 植物激素植物激素 葡萄糖葡萄糖 动物血清

18、动物血清 植物体植物体 细胞株、细胞系细胞株、细胞系 快速繁殖、培育无快速繁殖、培育无 病毒植株病毒植株 获得细胞或细胞分获得细胞或细胞分 泌蛋白泌蛋白 gg动物细胞培养和核移植技术 1、动物细胞全能性的表现程度不同、动物细胞全能性的表现程度不同 受精卵受精卵 胚胎干细胞胚胎干细胞 多能干细胞多能干细胞 单能干细胞单能干细胞 体细胞体细胞 是将动物的一个细胞的细胞核是将动物的一个细胞的细胞核,移入移入 一个已经去掉细胞核的卵母细胞中一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成使其重组并发育成 一个新的胚胎一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。这个新的胚胎最终发育为动物个体。 用核移

19、植的方法得到的动物称为克隆动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 3、分类：、分类： 胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植： 体细胞核移植体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性困难细胞分化程度高，恢复全能性困难 2、动物核移植、动物核移植 4、过程：、过程： gg动物细胞培养和核移植技术 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已 经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一 个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个

20、体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 核移植核移植 （难度高）（难度高） 受体细胞：受体细胞：M期的卵期的卵 母细胞母细胞 胚胎细胞核移植：胚胎细胞核移植： 体细胞核移植：体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复细胞分化程度低，恢复 全能性容易全能性容易 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1、概念：、概念： 2、分类：、分类： gg动物细胞培养和核移植技术 动物细胞的全能性特点动物细胞的全能性特点 v动物细胞特点：动物细胞特点： v分化潜能变窄：随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄， 这是指整体细胞而言。

21、 v细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性 复习复习 gg动物细胞培养和核移植技术 v1、我们能否用植物组织培养的方法使、我们能否用植物组织培养的方法使 动物细发育成动物个体？动物细发育成动物个体？ v2、根据动物细胞核仍具有全能性的特、根据动物细胞核仍具有全能性的特 点点,怎样将动物细胞的全能表达怎样将动物细胞的全能表达? 把两种把两种 动物的优良性状集合在一块儿动物的优良性状集合在一块儿? 思考思考 不能不能 利用利用:动物体细胞核移植技术动物体细胞核移植技术 动物细胞融合动物细胞融合 g

22、g动物细胞培养和核移植技术 3、过程、过程 供体细胞供体细胞 （供核）（供核） 细胞培养细胞培养 体细胞体细胞 卵母细胞卵母细胞 （ M中期：供质）中期：供质） 去核去核 无核卵无核卵 母细胞母细胞 注注 入入 细胞细胞 融合融合 杂杂 种种 细细 胞胞 构建重组构建重组 胚胎胚胎 胚胎胚胎 移植移植 代孕代孕 母体母体 新个体新个体(与母与母 体基本相同体基本相同 的个体的个体) 杂杂 种种 细细 胞胞 核移植核移植 胚胎移植胚胎移植 gg动物细胞培养和核移植技术 动物体细胞核移植过程：动物体细胞核移植过程： gg动物细胞培养和核移植技术 P49【讨论2】 1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母

23、细胞在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞 之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞 的核？的核？ 为使核移植动物的主要遗传物质全部为使核移植动物的主要遗传物质全部 来自有利用价值的动物提供的细胞。来自有利用价值的动物提供的细胞。 gg动物细胞培养和核移植技术 2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代用于核移植的供体细胞一般都选用传代 10代以内的细胞，想一想，这是为什么？代以内的细胞，想一想，这是为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体代以内的细胞一般保持正常二倍体 的核型，未发生突变的核型，未发生突变 gg动物细胞培养和核移植技术 3.你认为用上述体细胞核移植方法

24、生产的你认为用上述体细胞核移植方法生产的 克隆动物，是对体细胞供体动物进行了克隆动物，是对体细胞供体动物进行了 100%的复制吗？为什么？的复制吗？为什么？ 克隆动物绝大部分克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，来自于供体细胞核， 但其核外还有少量的但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的，即线粒体中的 DNA是来自于受体卵母细胞。是来自于受体卵母细胞。 此外，即便动物的遗传基础完全相同，还与此外，即便动物的遗传基础完全相同，还与 所处环境有很大关系所处环境有很大关系. gg动物细胞培养和核移植技术 卵细胞卵细胞 母绵羊母绵羊 母绵羊母绵羊 乳腺细胞乳腺细胞 细胞质细胞质 细胞核细胞核 细胞核

25、移植细胞核移植 早期胚胎早期胚胎 卵裂卵裂 C母绵羊子宫母绵羊子宫 胚胎移植胚胎移植 多莉羊多莉羊 分娩分娩妊娠妊娠 4、多莉羊的培育过程 、多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞融合后的卵细胞 gg动物细胞培养和核移植技术 克隆羊的成功证明了什么？克隆羊的成功证明了什么？ 1、动物体细胞核具有全能性；、动物体细胞核具有全能性； 2、细胞质具有调控细胞核发育的作用。、细胞质具有调控细胞核发育的作用。 gg动物细胞培养和核移植技术 （1）对比多莉羊和高产奶牛的克隆过程，）对比多莉羊和高产奶牛的克隆过程， 找出操作过程的不同点？找出操作过程的不同点？ 多莉克隆过程的受体细胞是去核多莉克隆过程的受体细胞是

26、去核卵卵细胞，细胞， 而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核 卵母卵母细胞；多莉克隆过程是将供体细胞；多莉克隆过程是将供体细胞核细胞核 注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是 将供体将供体细胞细胞注入受体细胞。注入受体细胞。 思考题思考题 gg动物细胞培养和核移植技术 （2）讨论分析上述哪一种措施更科学？）讨论分析上述哪一种措施更科学？ 并说明理由？并说明理由？ 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性 比卵细胞高，用它作受体更容易成功比卵细胞高，用它作受体更容易成功 将供体细胞注入受体细胞，使

27、克隆动物更将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更 像供体动物，操作也方便像供体动物，操作也方便 高产奶牛的克隆过程更科学高产奶牛的克隆过程更科学 gg动物细胞培养和核移植技术 5、体细胞核移植技术的应用前景、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2、保护濒危物种、保护濒危物种 3、利用转基因克隆动物生产医用蛋白质、利用转基因克隆动物生产医用蛋白质 4、用于器官移植的的供体。、用于器官移植的的供体。 5、使人类深入了解胚胎发育及衰老过程、使人类深入了解胚胎发育及衰老过程 6、追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病、追踪研究疾病的发展过

28、程和治疗疾病 gg动物细胞培养和核移植技术 gg动物细胞培养和核移植技术 6 6、体细胞核移植技术存在的问题、体细胞核移植技术存在的问题 1、成功率低、成功率低 2、存在健康问题、存在健康问题 （如异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等）（如异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等） 3、克隆动物食品的安全性也存在争议、克隆动物食品的安全性也存在争议 4、克隆动物的各个环节也有待改进、克隆动物的各个环节也有待改进 gg动物细胞培养和核移植技术 v 据统计据统计, 按照出生健康后代和总操作卵之间按照出生健康后代和总操作卵之间 的比值计算的比值计算, 各种动物的克隆总效率分别为牛各种动物的克隆总

29、效率分别为牛 05, 绵羊绵羊0.44.3, 山羊山羊0.77.2, 小鼠小鼠0.25.8, 猫猫0.3, 兔兔0.3, 大鼠大鼠0.2 ,猪猪0.10.9, 骡子骡子0.9, 马马0.2。经过。经过 10 年的发展年的发展, 体细胞核移植效率有所提高体细胞核移植效率有所提高, 尤尤 其是牛其是牛, 但其最高效率也仅为但其最高效率也仅为10。 资料一资料一 gg动物细胞培养和核移植技术 日本东京国立传染病日本东京国立传染病 研究所实验动物开发室小研究所实验动物开发室小 仓淳室长在著名生物科学杂志仓淳室长在著名生物科学杂志Nature Genetics 上发表了对克隆动物的研究结果：克隆小鼠的寿

30、命上发表了对克隆动物的研究结果：克隆小鼠的寿命 要比自然交配出生的小鼠寿命明显缩短。小仓室长要比自然交配出生的小鼠寿命明显缩短。小仓室长 对死亡的克隆小鼠进行病理检查发现：死亡小鼠均对死亡的克隆小鼠进行病理检查发现：死亡小鼠均 患有肺炎，一部分小鼠合并有肝脏异常病状。小仓患有肺炎，一部分小鼠合并有肝脏异常病状。小仓 室长以同种方法另外制作了室长以同种方法另外制作了20只克隆小鼠。并委托只克隆小鼠。并委托 日本东北大学农学部的西田朗教授对其进行免疫系日本东北大学农学部的西田朗教授对其进行免疫系 统机能的检查。结果发现：这些克隆小鼠的抗统机能的检查。结果发现：这些克隆小鼠的抗 体生体生 成能力比自

31、然交配出生的小鼠明显降低。成能力比自然交配出生的小鼠明显降低。 资料二资料二 gg动物细胞培养和核移植技术 可以可以 利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗 传物质基本上全部来自该奶牛。传物质基本上全部来自该奶牛。 3、（、（1）能利用体细胞核移植技术克）能利用体细胞核移植技术克 隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由。隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由。 思考题思考题 gg动物细胞培养和核移植技术 首先从卢辛达耳朵上剪取一小块组织，在体外首先从卢辛达耳朵上剪取一小块组织，在体外 培养获得该组织的细胞。从屠宰场取废弃的培养获得该组织的细胞。从屠宰场取废弃的 牛卵巢，抽取卵母细胞体

32、外培养成熟。用显牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养成熟。用显 微针去除卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵微针去除卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵 母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与体细胞母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与体细胞 融合，这时供体核就进入了受体卵母细胞，融合，这时供体核就进入了受体卵母细胞， 再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核 的卵母细胞，使其完成细胞分裂和发育过程。的卵母细胞，使其完成细胞分裂和发育过程。 核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常 卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体

33、母牛 体内。体内。 2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任 务交给你，你将如何对它进行克隆？务交给你，你将如何对它进行克隆？ gg动物细胞培养和核移植技术 在研究方面，克隆动物基因组重新编程的机制在研究方面，克隆动物基因组重新编程的机制 尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形 率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这些率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这些 问题尚在研究中。问题尚在研究中。 在应用上，生产克隆动物费用昂贵，距大规模在应用上，生产克隆动物费用昂贵，距大规模 应用还有一定距离。应用还有一定距离。 4.体细胞核移植技术在研究和

34、应用上体细胞核移植技术在研究和应用上 还存在什么问题？请你查阅资料，了还存在什么问题？请你查阅资料，了 解这方面的前沿动态。解这方面的前沿动态。 gg动物细胞培养和核移植技术 D 例题解析 1、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是 （ ） A.动物细胞融合动物细胞融合 B.单克隆抗体单克隆抗体 解析：动物细胞工程中技术包括动物细胞培养、解析：动物细胞工程中技术包括动物细胞培养、 动物细胞融合、胚胎移植和单克隆抗体，其中动物细胞融合、胚胎移植和单克隆抗体，其中 动物细胞培养是其他技术的基础动物细胞培养是其他技术的基础 gg动物细胞培养和核移植技术 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发

35、生、在动物细胞培养过程中遗传物质发生 改变的细胞是改变的细胞是 A细胞系细胞系 B细胞株细胞株 C原代细胞原代细胞 D传代细胞传代细胞 A 解析：细胞株传代至解析：细胞株传代至50代后出现细胞生长停滞代后出现细胞生长停滞 状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使 其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细 胞为细胞系胞为细胞系 gg动物细胞培养和核移植技术 3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自 胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其

36、主要原因是这样的组织细胞主要原因是这样的组织细胞 （ ） A.容易产生各种变异容易产生各种变异 C.取材十分方便取材十分方便 D gg动物细胞培养和核移植技术 4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 A. 培养基不同；培养基不同； B. 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C. 动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D. 动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。养成植株。 A gg动物细胞培养和核移植技术 5.在动物细胞培养

37、的有关叙述中正确的是在动物细胞培养的有关叙述中正确的是 A. 细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的 过渡过程中过渡过程中 B. 动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基 酸、无机盐、生长素和动物血清等酸、无机盐、生长素和动物血清等 C. 动物细胞培养的目的是获得大量的细胞动物细胞培养的目的是获得大量的细胞 D. 动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋 白酶处理白酶处理 D gg动物细胞培养和核移植技术 6.利用下列细胞工程技术培育出的新个利用下列细胞工程技术培育出的新个 体中，只具有一个亲本遗

38、传性状的是体中，只具有一个亲本遗传性状的是 （ ） 细胞和组织培养细胞和组织培养 细胞融合细胞融合 动物动物 胚胎移植胚胎移植 克隆技术克隆技术 A. B. C. D. C gg动物细胞培养和核移植技术 1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，用动、植物成体的体细胞进行离体培养， 下列叙述正确的是下列叙述正确的是 A.都需用培养箱都需用培养箱 C.都要在无菌条件下进行都要在无菌条件下进行 链接高考 C 解析：动、植物成体的体细胞进行离体培养都要在无解析：动、植物成体的体细胞进行离体培养都要在无 菌条件下进行，动物成体的体细胞离体培养用液体培菌条件下进行，动物成体的体细胞离体培养用液体培 养基，

39、不能体现细胞的全能性，植物成体的体细胞离养基，不能体现细胞的全能性，植物成体的体细胞离 体培养不一定用液体培养基，能体现细胞的全能性。体培养不一定用液体培养基，能体现细胞的全能性。 故故C正确。正确。 gg动物细胞培养和核移植技术 A. 大规模生产干扰素用于抵抗病毒引起的大规模生产干扰素用于抵抗病毒引起的 感染感染 B. 为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞 C. 大规模生产食品添加剂、香料等大规模生产食品添加剂、香料等 D. 利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖 C 解析：大规模生产食品添加剂、香料等是植物解析：大规模生产食品添加剂、香料等是植物 细胞工程的应用，动物细胞工程无此应用细胞工程的应用，动物细胞工程无此应用 gg动物细胞培养和核移植技术 3“试管婴儿试管婴儿”技术属于技术属于 A胚胎移植胚胎移植 B组织培养组织培养 C克隆技术克隆技术 D基因工程基因工程 A 解析：试管婴儿是获得精子和卵细胞后，在解析：试管婴儿是获得精子和卵细胞后，在 体外受精，之后把早期的胚胎移植到体内，体外受精，之后把早期的胚胎移植到体内， 属于胚胎移植技术，繁殖方式为有性生殖。属于胚胎移植技术，繁殖方式为有性生殖。