阿维菌素在土壤中的残留研究讲解

1、 第 17 页5%阿维菌素微乳剂在土壤中的残留研究摘要在农业生产过程中，化学农药的应用对提高农作物产量和促进生产力的发展起到了积极作用，但与此同时带来的是环境的污染。安全、低毒、高效、无残留、无污染的生物农药受到人们的青睐，阿维菌素作为一种新型生物型农药，它具有高效、广谱、持效期长、易降解等优点，对其在土壤中的残留分析研究对农业的发展有着重要的意义。本课题建立了高效液相色谱法测定土壤中阿维菌素的残留量的分析方法。以乙酸乙酯为提取剂，经衍生化后，高效液相色谱(FLD检测器)测定。阿维菌素在三种不同添加浓度下的平均回收率分别为95.27%、95.47%、96.34 %，相对标准偏差分别为3.47%

2、、2.29%、3.38%。由阿维菌素在土壤中的消解动态和最终残留结果表明，阿维菌素的半衰期为5.2天，阿维菌素最终残留量均小于最大残留限量0.02 mg/kg。关键词：阿维菌素；土壤；残留分析；液相色谱Residues of 5% Avermectin micro-emulsion in the soilAbstract In the process of agricultural production, the application of chemical pesticides to improve crop yields and promote the development of pr

3、oductivity has played a positive role, but at the same time brings environmental pollution. Safety, low toxicity, high efficiency, no residue, no pollution of biological pesticide, get the favour of people, as a kind of new type biological pesticide abamectin, it has high efficiency, broad spectrum,

4、 long hold effect, easy degradation, the residues in the soil of analysis and study is of great significance to the development of agriculture. This subject set up a high performance liquid chromatography (HPLC) method was developed for the determination of abamectin in soil residue analysis method.

5、 With ethyl acetate as the extraction agent, after derivatization high performance liquid chromatography (HPLC) determination (FLD) detector. Abamectin in three different dosager,the average recovery are 95.27%, 95.47% and 96.34% , the relative standard deviation are 3.47%, 2.29% and 3.38% . Abamect

6、in by digestion dynamics and final residues in the soil of results show that the half-life of abamectin was 5.2 days, abamectin final residues are smaller than the maximum residue limits of 0.02 mg/kg.Keywords: avermectin; soil; residue analysis; liquid chromatography17 第一章 文献综述 化学农药残留引起的环境污染、人畜中毒问题

7、已日益受到世人的普遍关注。随着人们健康意识的增强和环保意识的增强,安全、低毒、高效、无残留、无污染的生物农药,近年来正在蓬勃兴起。生物农药是用生物活体(菌丝体、伴孢晶体、昆虫病毒等)对特定的害虫具有控制特效而对公众具有安全性的天然农药。生物农药与化学农药相比,生物农药具有以下优点:无残留、无公害、不污染环境、特性强(即专一性作用于标靶有害生物)等。1 5%阿维菌素微乳剂是一种水性化生物农药，具有高效、广谱、持效期长、易降解等优点，通过对其在环境介质中的农药残留的分析检测，对环境保护、人类健康和农业的发展都有着重要的意义。 1.1阿维菌素的结构和性质1.1.1化学结构 1979年，美国、日本科学

8、家在土壤中分离得到一株放线菌（streptomyces awermyctins）,经发酵培养后得由8个组分组成的混合物阿维菌素（Avermyctins），又名（abamectin）和(abamectine), 简写（AVM）是一组具有强大杀螨、杀虫的十六元大环内酯类化合物2-4，化学结构5: 1.1.2理化性质 原药为淡黄色至白色结晶无味粉末(含量90%)，蒸汽压1.510-9 Pa,熔点150-155 , 比重：1.160.05（21）。溶解度6见表1.1。 溶剂 水 丙酮 正丁醇 氯仿 环己烷 溶解度（g/L，21 ） 10 100 10 25 6 溶剂 乙醇 异丙醇 煤油 甲醇 甲苯溶解

9、度（g/L，21 ）20 70 0.5 19.5 350表1.1 阿维菌素在各种溶剂中的溶解度1.1.3毒性据中国农药毒性分级标准，阿维菌素属高毒杀虫剂。原药大鼠急性经口LD50为l0毫克/千克，小鼠急性经口LD50为13毫克/千克，兔急性经皮LD50大于2000毫克/千克，大鼠急性经皮LD50大于380毫克/千克，大鼠急性吸入LC50大于5.7毫克/ 升。对皮肤无刺激作用，对眼晴有轻微刺激作用。在试验剂量内对动物无致畸、致癌、致突变作用。大鼠三代繁殖试验，无作用剂量为0.12毫克/千克/天。大鼠两年无作用剂量为2毫克/ 千克/天。对水生生物高毒，鳟鱼96小时LC50为3.6微克/升，蓝鳃翻车

10、鱼96小时LC50 9.6微克/升。对蜜蜂高毒，经口LD50为0.009微克/头，接触LD50为0.002微克/头，但残留在叶面的LT50为4小时，4小时以后残留在叶面的药剂对蜜蜂低毒。对鸟类低毒，鹌鹑急性经口LD50大于2000毫克/千克，野鸭急性经口LD50为86.4毫克/千克。1.2作用机理和作用方式1.2.1作用机理 与其他杀虫剂不同, 阿维菌素类药物既不抑制胆碱酯酶, 也不抑制虫体内蛋白质、核酸等有机物的合成。其作用机制最初的解释为: -氨基丁酸( GABA)作为调节运动神经系统活性的一种神经递质, 当神经冲动到达神经末梢时, 神经末梢的细胞膜释放出GABA, 作用于次级神经元细胞膜

11、或效应器细胞膜, 产生抑制效应, 完成神经冲动的传递过程。AVM及其类似物进入靶标生物体后, 表现为对GABA 的激动作用, 使神经末梢大量释放GABA, 并能促进GABA 与次级神经元细胞膜或效应器细胞膜的结合, 产生长时间、高强度的抑制效应, 使寄生虫麻痹死亡, 达到杀虫效果7 .后来研究发现，在较低浓度时（约210-12moL），阿维菌素可以引起与GABA系统无关的Cl-通道的开放。越来越多的研究表明，阿维菌素的驱虫活性主要是由于药物引起由谷氨酸控制的Cl-通道的开放，从而导致膜对Cl-通道性增加，Cl-又可神经元休止电位的超极化，使正常的电动电位不能释放，神经传导受阻最终引起虫体麻痹死

12、亡。81.2.2作用方式阿维菌素有触杀活性，但胃毒活性更佳，施药后23d杀虫效果达到最高峰，残效期715d，并有微弱的熏蒸作用。阿维菌素无杀卵作用，但能渗入叶内，杀死藏在叶内的潜叶幼虫，且抑制新生的幼虫潜入叶内。它能使接触叶片上药液的雌性成虫的取食量和产卵量下降。阿维菌素和大多数杀虫剂一样，对小菜蛾的毒力呈正温度关系，即温度越高毒力越强。1.3 阿维菌素的应用和发展1.3.1 应用前景 生物农药是21世纪及未来农药发展的必然趋势,是农业持续发展的一项基本保证。我国化学农药的生产和应用占世界第二位,我国生物农药的研制、生产和应用的落后局面亟待改变。随着人们环保意识的增强一批高毒、高残留的农药逐渐

13、被淘汰，高效、低毒、低残留的农药受到人们的青睐；随着我国对生态环境的日益重视，完全可以相信，生物农药的迅速发展和广泛应用一定会很快到来。 由于阿维菌素是微生物的代谢产物,属于生物农药,在自然条件下容易降解,对人畜安全, 对天敌影响小,而且防治效果优异,所以具有广阔的发展前途。 1.3.2 发展趋势 (1) 应用阿维菌素的衍生物。如美国Merck公司通过化学方法对其结构进行改造得到了伊维菌素，英文名称ivermectin和埃玛菌系，伊维菌素明显改善了对人畜的急性口服毒性，埃玛菌素则扩大了杀虫谱和提高了杀虫活性，防效提高了1-2个数量级。 (2) 阿维菌素的复配。与其他药剂混配，从而降低生产成本并

14、扩大杀虫谱。 (3) 通过改变Avermectins制剂的剂型以降低其成本、减少有机溶剂的污染，增强贮运安全性。 (4) 合成方法的改进。现在阿维菌素的生产来源是生物发酵，能够以一种化学合成的方法代替生物生产，将可以大大降低生产成本。1.4 阿维菌素分析研究状况1.4.1国内研究状况目前我国在农产品上关于阿维菌素的最大残留限量标准已经制定。国内有关阿维菌素分析方法的研究还很少，研究的方向主要集中在乳油剂型的检测方法上。 对阿维菌素的测定多采用高效液相色谱或高效液相色谱与其他检测仪联用。何娟等9以V(甲醇) :V(水):V(三乙胺) = 87:13:0.2 为流动相, 示差折光检测器,分离测定了

15、原药阿维菌素微乳剂中的有效成分阿维菌素，结果测得阿维菌素的回收率为95.0%96.8%。袁蕾等10用高效液相色-荧光检测器对土壤中的阿维菌素进行分析,流动为相:乙腈:水= 95:5(体积比)，荧光检测器激发波长: 365 nm, 发射波长: 475 nm，且回收率为85.9%95.9%。对阿维菌素在生物样品和环境介质中的残留分析检测方法研究也很少，而且方法也有所差异。徐浩然等11采用高效液相色谱法紫外检测器测定稻田土壤中的阿维菌素残留，其在土壤中的平均回收率为78.6%83.1%，标准偏差6.5%,方法的最低检出限0.014 mg/kg；杨挺等12用高效液相色谱- 荧光检测器在激发波长为365

16、 nm、发射波长为470 nm处测定阿维菌素在土壤中的残留，方法添加回收率为89. 98%93.20% ,变异系数为2.45%7.98% ,检测限0.0004 mg/kg。李保同等13利用反相高效液相色谱法建立了在小白菜和土壤中阿维菌素残留量的测定方法，方法的添加回收率为89.22%95.17%，变异系数为1.82%4.85%，最低检出浓度为0.001 mg/kg，阿维菌素在小白菜和土壤内的残留分别为0.005 mg/kg 和0.003 mg/kg。1.4.2 国外研究状况 国外对于阿维菌素的残留研究的报道相对较多，检测方法较国内先进。国内外高效液相色谱法被广泛应用，除此之外，国外的检测方法还

17、很多。1 薄层色谱法(TLC) Malanikova 等曾使用TLC 法检测阿维菌素, 在硅胶薄层板上涂上荧光指示剂, 用于样品检测。2 在线超临界流体净化技术(SFEHPLCFLD ) 在线SFEHPLCFLD主要优点在于实现分离分析自动化, 能定量地将萃取物转入分析系统, 灵敏度高,适于痕量组分的分析。3 液相色谱-质谱检测方法(LC MS) LCMS检测灵敏度高,能方便地对痕量兽药多残留组分进行检测。4 液相色谱- 质谱- 质谱联用技术( LC MS MS) LC MS MS 法在液质联用法的基础上再进行质谱串联, 能同时检测更多种药物, 减少了工作量。1.5残留分析方法与技术概况所谓农

18、药残留是指农药施用后残存于植物体内、土壤和环境中的有毒物质及代谢产物的量14。农药残留分析过程包括样品中农药的提取、净化、浓缩和检测几部分，而通常把残留农药的提取、净化和浓缩过程称为前处理15。1.5.1提取技术 由于农药在土壤中的含量很低，要想直接对土壤中的农药进行分析是不可能的，因此可采用物理或化学的方法将土壤中残留农药分离出来，先达到富集的目的，这一过程称为农药的提取，而提取剂和提取技术的选择将决定最终提取效果。农药提取中常用提取剂有：甲醇、正己烷、丙酮、石油醚等，可根据所提取物质结构性质的差异选择单一或混合提取剂。农药提取在一些条件下用单一溶剂不理想时，可选用混合提取剂；徐浩然等11采

19、用丙酮为提取剂提取土壤中阿维菌素，回收率为78.6%83.1%；杨挺等12采用乙腈/水( 2: 1, V /V)，回收率为89.98%93.20%，效果较好。对土壤中残留农药的提取，超声波提取法、振荡提取法和索氏提取法16是使用最多的传统方法，其它方法有液液萃取、微波萃取技术17、有机溶剂萃取法、吸附剂吸附法和浸渍法等技术也是常用的方法。超声波提取方法的原理是利用溶剂和样品之间产生超声空化作用，超声波产生巨大压力直接反复冲击固体样品，导致溶液中出现气泡，然后气泡再增大、破裂，使固体样品分散，从而增大样品与溶剂之间的接触面积，从而加速了样品在溶剂中的溶解速度。和索氏提取法相比，陈永刚等18的实验

20、结果得出超声波提取法提取百分含量稍高，操作简单，节约时间，可以同时进行多个样品的处理而不需要增加装置19。孟平蕊等20 的研究结果表明，对于浓度较低的土壤样品，用超声提取不仅提取完全，而且空白值低，克服了索氏提取的缺点。在国外，Ali Tot、Mehmet Emin Aydin等21用超声波辅助萃取有机氯农药(六六六、七氯、艾氏剂等)，GCECD检测。优化了超声波提取条件，阐明了溶剂类型、溶剂量、提取时间和提取步骤等。结果测得添加回收率大于88%，相对标准偏差低于6%。与传统的提取方法比较，超声波辅助萃取具有较高的提取效率和快速等优点。索氏提取技术是一种传统的液-固相萃取方法。即利用溶剂反复的

21、回流和虹吸原理，让固体连续不断地被纯溶剂萃取富集来提取固体样品，适合于从固体样品中提取物质，其优点是回收只要一次，试剂可回收利用，没有三废的污染22。振荡法是把提取剂加入盛有样品的容器中，振荡数小时，此方法操作简单，是实验室最常用的提取方法。杨挺等7采用乙腈/水( 2: 1, V /V)为提取剂，震荡12h,回收率为89.98%93.20%，回收率较高。固相微萃取技术是以固相萃取为基础发展起来的，利用了固相萃取吸附的几何微区效应，由于固相微萃取装置结构的超微化使得它克服经典固相萃取的许多弱点。固相微萃取技术的原理是一个基于待测物质在样品及萃取涂层中平衡的萃取过程。其最大特点就是集取样、萃取、富

22、集、进样于一体，不需要溶剂，而且操作简便，操作成本低、萃取速度快、不污染环境、便于实现自动化以及易于与色谱，电泳等高效分离检测手段联用，因此，在分析化学领域及药物分析中得到了广泛的应用23。液液萃取法是指溶于水相的溶质与有机溶剂接触后，经过物理或化学作用，部分或几乎全部转移到有机相的过程。原理是利用化合物在两种互不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。经过反复多次萃取，将绝大部分的化合物提取出来。它作为一种分离技术，可用于物质的分离和提纯。这种分离方法具有装置简单、操作容易的特点，既可用来分离、提纯大量的物质，也适合于微量或痕量物质的分离、富集

23、，是分析化学经常使用的分离技术，也广泛用于原子能、冶金、电子、环境保护、生物化学和医药等领域。1.5.2浓缩方法 浓缩是农药残留检测的一个重要步骤，尤其对高效低剂量农药，常用的浓缩方法有自然挥干法、旋转蒸发法、K-D浓缩器浓缩法和气体吹干法。可根据提取液选择比较合适的浓缩方法。如对于石油醚、丙酮、二氯甲烷等作溶剂的提取液用自然挥干法比较有效。但该方法要置于室温下，在通风橱中通风条件下，使溶剂自然挥发，此法速度较慢。而对于一些不易挥发、蒸汽压较低的农药，可采用气体吹干法，此法是用干燥空气或氮气，使溶剂挥发浓缩的方法，对于易氧化的农药应采用氮气。而采用K-D浓缩装置进行减压蒸馏浓缩的方法，此法简便

24、，农药不易损失。是较普遍采用的方法，但对于沸点较高的溶剂如甲醇、甲苯等，用此方法时效果差，而且速度慢，不宜采用。这时可用旋转蒸发法，就是在减压、加温、旋转的条件下浓缩溶剂的方法。此法浓缩速度快，而且农药不易损失，操作简便，是较常用的方法。对蒸汽压高的农药用此法较为合适，只是使用时应注意控制其温度条件不能过高，这样可减少农药的损失。1.5.3衍生化技术 衍生化是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。一般来说，一个特定功能的化合物参与衍生反应，溶解度，沸点，熔点，聚集态或化学成分会产生偏离。由此产生的新的化学性质可用于量化或分离。样品的衍生化的作用主要是把难于分析的物质转化为与其化学结

25、构相似但易于分析的物质，便于量化和分离。 当检测物质不容易被检测时，如无紫外吸收等，可以将其进行处理，如加上生色团等，生成可被检测的物质。在仪器分析中被广泛应用。气相色谱中应用化学衍生反应是为了增加样品的挥发度或提高检测灵敏度，而高效液相色谱的化学衍生法是指在一定条件下利用某种试剂(通称化学衍生试剂或标记试剂)与样品组分进行化学反应，反应的产物有利于色谱检测或分离。一般化学衍生法主要有以下几个目的：1.改变待测物的色谱保留特性以改善分离度；2.改变待测物的检测特性，以增加其对检测器的响应（例：紫外标记、荧光标记、电化学标记）；3.生成稳定的衍生物，改善待测物的不稳定性（例：-SH基团易氧化的问

26、题可通过酰化来解决）。进行化学衍生反应应该满足如下要求：对反应条件要求不苛刻，且能迅速、定量地进行；对样品中的某个组份只生成一种衍生物，反应副产物及过量的衍生试剂不于扰被测样品的分离和检测；化学衍生试剂方便易得，通用性好。1.5.4检测技术 仪器分析法是生物农药残留检测常用的技术，因其具有灵敏度高、准确度好等优点，而常被用作实验室的样品检测。随着提取，净化技术的不断发展也给仪器分析创造了更加优越的使用条件。在农药残留分析实验中，由于大部分农药的活性成分为小分子有机化合物，故多使用气相色谱和高效液相色谱，而气相色谱串联质谱联用等技术和相色谱串联质谱联用技术作为农药残留检测的重要补充也是检测技术不

27、断发展必然的结果。气相色谱法适用于分析相对分子质量较低，挥发性较高的试样，是一种高效能、高灵敏、高选择性、快速的分离分析方法，可以同时分离分析多种组分，而且样品用量少，适合于微量和痕量分析，应用范围较广，可应用于农药残留量、化学、卫生、化工、医药、环境保护等方面。高效液相色谱是一种新的分离分析技术，是于20世纪70年代发展起来的。它是在经典的液体色谱法的基础上，引入了气相色谱法的理论。在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，不仅有经典液相色谱可选择流动相种类多，对样品使用范围广等优点外，其突出点是分析速度快、高分辨率、高灵敏度、分离效能高和重现性好。可用来进行液液分配、液固吸附、离子

28、交换和凝胶渗透色谱分析，可应用于很多农药的分析，至今，高效液相色谱法也广泛地应用于食品工业，制药工业和生物工程等领域24-26。气相色谱串联质谱联用法的优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析集合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具有更高的检测极限。与高效液相色谱法相比，其检测灵敏度更高，假阳性率更低。随着农药残留定性与定量分析的需要，色谱一质谱联用技术得到了广泛应用，且特别适合于多残留分析。至今，国外也把它划为农药残留快速检测技术之列。 液相色谱串联质谱联用技术，其原理与气相色谱串联质谱联用相似，液相色谱作为质谱的特殊进样器，与气相色

29、谱串联质谱联用相比，液相色谱串联质谱联用的优势是适合干热不稳定、难挥发等农药残留的快速定性和定量分析。近年来液相色谱串联质谱联用用于农药残留分析的文献报道逐渐增多。尽管液相色谱串联质谱联用在农药残留分析上还不是一种常规手段，但是很快成为液相色谱串联质谱联用分析的重要补充。 第二章 实验部分2.1 实验试剂及仪器2.1.1主要试剂 药品规格厂家乙酸乙酯分析纯天津市优谱化学试剂有限公司无水甲醇分析纯广东光华科技股份有限公司硅藻土分析纯国药集团化学试剂有限公司乙腈N甲基咪唑三氟乙酸酐色谱纯衍生级衍生级霍尼韦尔有限公司上海晶纯实验有限公司 上海晶纯实验有限公司2.1.2主要仪器 仪器厂家高效液相色谱仪

30、Agilent1100（配FLD） 美国安捷伦公司RE-52AA型旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂HY-4型速多用震荡器 上海浦东物理光学仪器厂 QL-901型涡旋混合器 江苏海门市麒麟医用仪器厂2.1.3原料理化数据名称分子式密度（g/ml）分子量溶点（）沸点（）乙酸乙酯CH2COOC2H50.89988.1177甲醇CH3OH0.79132.04-97.864.7乙腈C2H3N0.7941.05-45.781.12.2田间试验设计 试验农药：5%阿维菌素微乳剂；供试作物：土壤；试验地点：贵州贵阳；试验共设13个处理，包括1个土壤动态试验处理和12个残留试验处理，每个处理各设三个重复小区，每小

31、区面积30 m2。另设1个土壤消解动态处理和对照区。施药方法为兑水喷雾，按SOP FT-02-01规定进行。2.2.1 消解动态试验土壤动态：选用一块白地(30 m2)，按5%阿维菌素4167倍液均匀喷雾水面34遍，采样距施药间隔为2h，1d，2d，3d，5d，7d，10d，14d，21d，28d。采集010cm泥层土壤样本，测定阿维菌素在土壤中的残留量及残留消解半衰期。2.2.2 最终残留实验 于收获期倒推7d、14d、21d，5%阿维菌素微乳剂用6250倍液和4167倍液两个剂量分别设两次、三次喷药，共12个处理，施药间隔7d，分别于距末次施药7d，14d，21d采集土壤(010 cm土层

32、)样本。测定土壤中阿维菌素的最终残留量。对照区：另设，不施药，采对照样。2.2.3 分析样品的制备土壤田间样本采集和实验室样品的制备按SOP FT-04-01的规定进行。样品运输和贮存按SOP FT-01-06的规定进行。2.3 样品的处理及测定2.3.1处理提取：准确称取土壤样品10.0 g于150 mL具塞三角瓶中，加入60 mL乙酸乙酯提取液，在振荡器上提取1h，静置20 min后，在铺有助滤剂的漏斗中减压抽滤，用20 ml乙酸乙酯提取液分3次冲洗三角瓶及滤渣，合并滤液于150 mL梨形瓶中，在旋转蒸发仪上(45 C水浴)减压旋干，待衍生化。衍生化：加入1 ml乙腈，涡旋60s；加0.3

33、 mlN甲基咪唑，涡旋30s；加0.3ml三氟乙酸酐，涡旋30s；黑暗处避光反应30min；加1ml甲醇醇化，涡旋30s；黑暗处避光反应30 min，反应液过0.45 m滤膜，待高效液相色谱测定。2.3.2测定高效液相色谱仪的色谱条件：检测波长：365 nm、470 nm，色谱柱温度：30，进样量：20 L，流速：1.0 mL/min，流动相：甲醇：水=90：10（V/V)。2.4结果与讨论2.4.1方法的添加回收率在土壤空白对照样品中加入一定量的三种质量分数的阿维菌素标样，样品经过处理及衍生化后测定回收率（见表2.1），谱图见图2.1，2.2。阿维菌素在土壤中的平均回收率分别为95.27%、

34、95.47%、96.34 %，相对标准偏差分别为3.47%、2.29%、3.38%，满足农药残留分析的要求。样本添加浓度（mg/Kg)添加回收率(%) RSD（%）12345平均土0.0292.44100.097.3792.6193.9295.273.470.293.7995.7097.7292.7397.3995.472.292.098.5797.1396.4590.7898.7996.343.38表2.1 阿维菌素在土壤中的添加回收图2.1 阿维菌素空白色谱图图2.2 阿维菌素添加回收色谱图2.4.2回归直线方程和标准样品的色谱图称取一定量阿维菌素标样于容量瓶中，用乙腈定容摇匀，配制成一定

35、浓度的标准储备液，逐级稀释配置成一系列的阿维菌素标准溶液，经衍生化后，按2.3.2液相色谱条件下分别进行分析，并绘制标准曲线。以峰面积A和浓度C作图为图2.3。得阿维菌素回归直线方程为 A = 2628C+17.466，R = 0.9991；阿维菌素标准样品色谱图见图2.4。图2.3阿维菌素的线性关系曲线图2.4阿维菌素标准品的色谱图2.4.3阿维菌素在土壤中的残留消解动态 阿维菌素消解动态数据如表2.2所示，其消解动态趋势图分别如图2.5。由图2.5可知阿维菌素在贵州土壤中的半衰期为5.2天。采样时间间隔 峰面积 平均峰面积 残留量 降解率 （d） (A) (mg/kg) (%) 0d 37

36、46.1 3741 3743.55 0.1451 1d 310.8 293.8 302.3 0.0117 91.942d 275.7 254.7 265.2 0.0102 92.973d 762.9 736.1 749.5 0.0288 80.155d 123.1 116.7 119.9 0.0047 96.767d 1726.1 1773.5 1749.8 0.0674 53.5410d 419.3 388.4 403.85 0.0155 89.3114d 41.6 48.2 44.9 0.0017 98.8321d 50.8 54.7 52.75 0.0020 98.6228d 95.5

37、103.1 99.3 0.0039 97.31表2.2 阿维菌素在土壤中消解动态数据表图2.5 阿维菌素在土壤中的消解动态曲线2.4.4阿维菌素在土壤中的最终残留施药剂量分别为低剂量：6250倍液、高剂量：4167倍液，施药23次、采收距最后一次施药7d、14d、21 d的土壤，测得其最终残留如下表2.3。D2-21d、D3-21d残留量已经低于本实验最低检出限，从表中可以得到阿维菌素在土壤中的最终残留量为0.0027 mg/kg0.0225 mg/kg，说明阿维菌素在土壤中属于低残留农药。间隔时间 峰面积 平均峰面积 土平均质量 残留量（d） (A) (g) (mg/kg) D2-7d 16

38、4.9 218.5 215.8 199.73 8.49 0.0087D3-7d 256.5 348.2 223.9 276.2 8.56 0.0119G2-7d 312.1 291.6 317.0 306.9 8.50 0.0133G3-7d 485.0 544.3 512.5 513.93 8.41 0.0225D2-14d 92.3 89.7 88.7 90.23 8.35 0.0040D3-14d 161.6 156.2 147.4 155.07 8.35 0.0068G2-14d 152.5 153.8 140.5 148.93 8.35 0.0066G3-14d 119.4 200.

39、5 196.2 172.03 8.35 0.0076G2-21d 61.9 58.5 56.3 58.9 8.14 0.0027G3-21d 149.0 135.5 134.6 139.7 8.14 0.0063表2.3 阿维菌素在土壤中的最终残留数据表第三章 总 结本实验研究5%阿维菌素微乳剂在土壤中的残留情况，采用最常用的提取溶剂乙酸乙酯分析残留在土壤中的阿维菌素含量，提取效率高，其它杂质干扰小且无需进一步净化处理。提取过程采用振荡提取1h，可有效降低提取液中杂质含量，更有利于定量分析。而且，此方法有利于降低劳动强度。后抽滤旋干，经衍生化后，高效液相色谱(FLD检测器)测定。经过向土壤中添

40、加不同浓度的阿维菌素标样，得到阿维菌素在土壤中的添加回收数据，添加浓度为0.02 mg/kg时，其平均回收率为95.27%；添加0.2 mg/kg，平均回收率为95.47%；添加2.0 mg/kg，平均回收率为96.34%；相对标准偏差分别为3.47%、2.29 %、3.38%。由阿维菌素在土壤中的消解动态和最终残留结果表明，阿维菌素的半衰期为5.2天，阿维菌素最终残留量均小于最大残留限量。说明阿维菌素在土壤中属于低残留农药,且该方法可有效适用于土壤中阿维菌素的定量检测。 参考文献1万方浩,王韧等.我国天敌昆虫产品产业的前景分析J.中国生物治,1999,15(3)135-138.2沈寅初,杨慧

41、心. 杀虫抗生素Avermectin的开发及特性J. 农药译丛, 1994 , 16 (3) , 1-13 .3徐汉虹,陈立译,赵善欢,Avermectin 抗性水平,机制及杭性治理J.农药译丛,l996 ,18(6) ,50 -57 .4Blizzard , Timothy A .Recent progress in th e synthes is of avermectins and milbemyein s .O r g.Preced.In t . , 1994 , 26 (6 ) , 617 -644.5陈芝,宋渊等.阿维菌素的生物合成研究进展与展望J.自然科学进展,2007,17(3

42、),290-295.6蒋才武,陈超球等.阿维菌素的生物合成、理化性质及其应用J.广西师院学报,1999,16（1）,98-101.7游锡火. 阿维菌素类药物的药理作用及毒理作用 J .吉林农业, 2000, 5: 35.8 SHOOP W L, MROZIK H, FISHER M H. Structure and activity of avermectins and milbemycins in animal health J .Veterinry Parasitology, 1995, 59( 2) : 139- 156.9何娟,卢奎.阿维菌素微乳剂高效液相色谱分析方法研究J.分析实验室,2007.26(1);119-121.10袁蕾,王会利等.阿维菌素在油菜和土壤中残留及降解行为研究J.环境化学,2011,30(2),490-494.11徐浩然, 杨仁斌等. 阿维菌素在稻田水、土壤及稻米中的残留研究J. 环境科学与管理,2010,35(4),35-37.12杨挺,赵健等.高效液相色谱法检测土壤中阿维菌素的残留量J.福建分析测试,2006,15(4),10-12.13李保同,裴春梅.阿维菌素在小白菜和土壤中的残留分析及动态研究J.现代农药,2009,8(4),27-30.14岳永德. 农药残留分析(第一版)M. 中国农业出版社, 2004: 1.15王爽, 杨益众. 土