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文档简介
1、胰岛素和肾上腺素对血糖的调节(葡萄糖氧化酶法)实验目的:1. 了解血糖浓度测定的原理和方法。2. 了解并验证胰岛素和肾上腺素对血糖的调节。3. 在实验中培养严谨的作风和准确进行实际操作的能力,提高分析问题的能力。实验原理:胰岛素和肾上腺素是体内对血糖调节的激素, 胰岛素是唯一降低血糖的激素。 通过对实验动物分别注射不同的激素,了解激素对血糖的调节影响。测定血糖的原理:在PH7.0 条件下 , 葡萄糖氧化酶可催化葡萄糖生成葡萄糖酸和H2O2,后者在 H2O2 酶的作用下与苯酚、4- 氨基安替吡啉生成红色醌类物质,在 505nm处有最大吸收峰, 吸光度与葡萄糖含量成正比。实验器材: 器材 :10m
2、m×100mm试管、试管架、恒温水浴、沸水浴、冰浴、蜡笔、721- 分光光度计、兔台、注射器、手术刀片。 试剂1. 酶酚混合试剂主要成分:葡萄糖氧化酶H2O2 酶苯酚4- 氨基安替吡啉2. 葡萄糖标准储存液( 100mmol/L)3. 葡萄糖标准应用液(5mmol/L)取葡萄糖标准储备液5ml,置于100ml 容量瓶中,加苯甲酸溶液至刻度。4. 胰岛素注射液5. 肾上腺素注射液实验内容与方法:一、注射药物并取血:1. 分别取 2 只兔子,称量体重,从耳缘静脉采血2ML。2.2 只兔子按体重分别注射肾上腺素和胰岛素,从注射药物时开始计时,每隔30 分钟取血一次,一共取血4 次,每次2ML。二、血糖的测定1取 16× 150mm试管3 支按下表进行操作:试剂( ml)血清或血浆0.1测定管标准管空白管葡萄糖标准应用液0.1蒸馏水0.1酶酚混合试剂3.03.03.02将上述各管混匀放入37水浴中加热15 分钟,用波长505nm分光光度计进行比色,空白管调零点读取测定管与标准管吸光度。3计算测定管吸光血糖( mmol/L) =标准管吸光×标准管浓度4计算注射药物前后血糖变化情况。实验注意事项:血清加量要准,否则会影响到结果的准确性。实验报
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