第二章鉴别试验

1、第二章第二章 药物的鉴别试验药物的鉴别试验主讲人：沈晓君主讲人：沈晓君 药物的鉴别试验是根据药物的分药物的鉴别试验是根据药物的分子结构、理化性质，采用化学、物理化子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真伪。学或生物学方法来判断药物的真伪。第一节第一节 性状鉴别性状鉴别1 1、什么是药物的鉴别试验？、什么是药物的鉴别试验？ 中国药典和世界各国药典所收载的中国药典和世界各国药典所收载的药品项下的鉴别试验方法，均为用来证药品项下的鉴别试验方法，均为用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而不是对未知药物进行所标示的药物，而不是对未

2、知药物进行定性分析。定性分析。2 2、鉴别试验的项目、鉴别试验的项目A性 状B一般鉴别试验C专属鉴别试验性状性状 药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、溶解度以及物理常数等。包括外观、溶解度以及物理常数等。 外观外观 指溶解度药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质指溶解度药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质溶解度溶解度 指药物的一种物理性质指药物的一种物理性质 ，一定程度反映了药物的纯度。，一定程度反映了药物的纯度。 物理常数物理常数 熔点、比旋度、吸收系数等。熔点、比旋度、吸收系数等。 一般鉴别试验一般鉴别试验 以药物的化学结构及

3、其物理化学性质为以药物的化学结构及其物理化学性质为依据，通过化学反应来依据，通过化学反应来鉴别药物的真伪。鉴别药物的真伪。通通过一般鉴别试验只能证实是过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，某一类药物，而而不能证实是不能证实是哪一种药物。哪一种药物。如：如：托烷生物碱类、芳香第一胺类托烷生物碱类、芳香第一胺类专属鉴别试验专属鉴别试验 根据每一种药物化学结构的差异及其所根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别药物的真伪。的灵敏定性反应，来鉴别药物的真伪。是证是证实某一种药物的依据。实某一种药物的依据。 3 3

4、、鉴别方法、鉴别方法物理常数测定法物理常数测定法化学鉴别法化学鉴别法 光谱鉴别法光谱鉴别法色谱鉴别法色谱鉴别法生物学法生物学法药物鉴别方法新动向药物鉴别方法新动向 v物理常数测定法 物理常数是表示药物物理性质的特征常物理常数是表示药物物理性质的特征常数，在一定条件下是定值，其测定结果不仅数，在一定条件下是定值，其测定结果不仅对药物具有鉴别意义，还可以反映药物的对药物具有鉴别意义，还可以反映药物的纯纯度度，是评价药物质量的主要指标。，是评价药物质量的主要指标。第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定 相对密度相对密度 馏程、熔点、凝点馏程、熔点、凝点 比旋度比旋度 折光率折光率 粘度、

5、酸值、羟值、碘值、皂化值粘度、酸值、羟值、碘值、皂化值 吸收系数吸收系数第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定中国药典收载的物理常数中国药典收载的物理常数1 1、相对密度、相对密度 指在相同的温度（指在相同的温度（Ch.P.Ch.P.规定为规定为2020）和压力）和压力下，某物质的密度与水的密度之比。下，某物质的密度与水的密度之比。 相对密度只是没有单位而已，数值上与实际密相对密度只是没有单位而已，数值上与实际密度是度是相同的相同的。 根据某些物质的相对密度，可推测其某种消防根据某些物质的相对密度，可推测其某种消防特性，采取相应消防措施。特性，采取相应消防措施。 第二节第二节 常用

6、物理常数的测定常用物理常数的测定测定方法测定方法比重瓶比重瓶比重瓶法比重瓶法韦氏比重秤法韦氏比重秤法韦氏比重秤韦氏比重秤第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定2 2、馏程、馏程标准压力：标准压力：101.3MPa101.3MPa结束：结束：供试品仅剩供试品仅剩34mL34mL 或一定比例容积馏出时的温度范围或一定比例容积馏出时的温度范围开始：开始：自开始馏出第自开始馏出第5 5滴算起滴算起第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定 3 3、熔点、熔点初熔供试品在毛供试品在毛细管内开始细管内开始局部液化出局部液化出现明显液滴现明显液滴时的温度时的温度 全熔供试品全部供试品全部

7、液化时的温液化时的温度度 含义：含义： a a 固体熔化成液体的温度固体熔化成液体的温度 b b 熔融同时分解的温度熔融同时分解的温度 c c 熔化时自初熔至全熔的一段温度熔化时自初熔至全熔的一段温度样品在一定样品在一定温度下熔融温度下熔融同时分解产同时分解产生气泡、变生气泡、变色或浑浊色或浑浊。 熔融时同时分解第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定粗测粗测 上述准备工作完成后，在充足的光线下进行操作，上述准备工作完成后，在充足的光线下进行操作，用小火徐徐加热提勒管支管底部用小火徐徐加热提勒管支管底部( (见实验图见实验图12-1)12-1)，控制加热，控制加热速度在每分钟升温速度

8、在每分钟升温2 233，观察并记录样品开始熔化的温度，观察并记录样品开始熔化的温度，即为粗测熔点，作为精测的参考。即为粗测熔点，作为精测的参考。 熔点的测定熔点的测定精测精测 当温度升高至离粗测熔点约当温度升高至离粗测熔点约10101515时，须改用极时，须改用极小火加热，使温度上升约每分钟小火加热，使温度上升约每分钟1 122。仔细观察毛细管中。仔细观察毛细管中样品变化的情况。样品在受热的过程中，将依次出现样品变化的情况。样品在受热的过程中，将依次出现“发发毛毛”、“收缩收缩”、“软化软化”、“出汗出汗”( (出现液滴出现液滴) )、“全熔全熔”等现象。等现象。 初初 熔熔第二节第二节 常用

9、物理常数的测定常用物理常数的测定发毛：发毛：指毛细管内的柱状供试物因受热而在其指毛细管内的柱状供试物因受热而在其表面呈现毛糙。表面呈现毛糙。收缩：收缩：柱状供试物向中心聚集紧缩，或贴在某一柱状供试物向中心聚集紧缩，或贴在某一边壁上。边壁上。软化：软化：柱状供试物在收缩后变软，而形成软质珠柱状供试物在收缩后变软，而形成软质珠状物，并向下变塌。状物，并向下变塌。出汗：出汗：柱状供试物收缩后在毛细管内壁出现细微柱状供试物收缩后在毛细管内壁出现细微液滴，但尚未出现局部液化的明显液滴和持续的液滴，但尚未出现局部液化的明显液滴和持续的熔融过程。熔融过程。第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定

10、将提勒管固定在铁架台上，将提勒管固定在铁架台上，倒入液体石蜡或浓硫酸做为浴液。倒入液体石蜡或浓硫酸做为浴液。将装好样品的毛细管用橡皮圈固将装好样品的毛细管用橡皮圈固定于温度计的下端，使毛细管底定于温度计的下端，使毛细管底端位于温度计水银球的中间端位于温度计水银球的中间( (见见实验图实验图11-1)11-1)，然后将此带有毛，然后将此带有毛细管的温度计通过开口软木塞插细管的温度计通过开口软木塞插入提勒管内，使温度计的水银球入提勒管内，使温度计的水银球位于两支管的中间位于两支管的中间 ( (注意勿使橡注意勿使橡皮圈触及浴液，以免浴液被污染皮圈触及浴液，以免浴液被污染变黑变黑) )。毛细管熔点测定

11、仪毛细管熔点测定仪装置图装置图第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定4 4、比旋度、比旋度 旋光度旋光度：平面偏振光通过含有某种光学活：平面偏振光通过含有某种光学活性物质的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏性物质的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，旋转的度数称旋光振光的平面向左或向右旋转，旋转的度数称旋光度。度。 比旋度比旋度 T TD D ： 在一定波长与温度下，偏在一定波长与温度下，偏振光透过长振光透过长1dm1dm且每且每1ml1ml中含有旋光性物质中含有旋光性物质1g1g的溶的溶液时测得的旋光度称为比旋度。液时测得的旋光度称为比旋度。第二节第二节

12、常用物理常数的测定常用物理常数的测定5 5、吸收系数、吸收系数 吸光物质在给定波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在给定波长、溶剂和温度等条件下，单位浓度、单位液层厚度时的吸收度。单位浓度、单位液层厚度时的吸收度。摩尔吸收系数溶液浓度（1mol/L）液层厚度(1CM)百分吸收系数溶液浓度 1% （ g/ml）液层厚度(1CM)%11cmE%1110cmEM两种吸光系数的换算关系：两种吸光系数的换算关系：第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定C C=2.00mg/100ml=0.002g/100ml=2.00mg/100ml=0.002g/100ml99203071015.32310%

13、11cmEMA = EClA = ECl307002. 0614. 0%1ClAEcm 氯霉素氯霉素(M=323.15)(M=323.15)的水溶液，用纯品配制的水溶液，用纯品配制100ml100ml含含 有有2.00mg2.00mg的水溶液，的水溶液， =278nm,=278nm,l l=1cm,=1cm,A A=0.614=0.614，求，求 、 。 %11cmE计算示例计算示例第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定安宫黄体酮安宫黄体酮如：安宫黄体酮（如：安宫黄体酮（M=386.53M=386.53） max=240 max=2401nm 1nm 注意：注意： 具有相似结构的化

14、合物可能有相同的具有相似结构的化合物可能有相同的maxmax，但吸收系数有差异但吸收系数有差异炔诺酮（炔诺酮（M=298.43M=298.43）max=240max=2401nm 1nm %11cmE%11cmE= 408= 408= 571571第二节第二节 常用物理常数的测定常用物理常数的测定酸值：中和酸值：中和1g油脂所需油脂所需KOH的质量（的质量（mg);皂化值：一克油脂皂化时所需皂化值：一克油脂皂化时所需KOH的质量的质量（mg),越大表示油脂的相对分子质量越低；越大表示油脂的相对分子质量越低；碘值：碘值：100g油脂与碘加成所需碘的质量（油脂与碘加成所需碘的质量（g)越大表示油脂

15、的不饱和程度愈大，干性也愈越大表示油脂的不饱和程度愈大，干性也愈大。大。第三节第三节 药物的化学鉴别法药物的化学鉴别法 化学鉴别法是根据药物的化学鉴别法是根据药物的化学结构和性质，化学结构和性质，在在供试品加入适当的试剂，在一定条件下，发生化学反应，通过产生可观测到的明显现象，来鉴别药物真伪的方法。 包括包括一般鉴别试验一般鉴别试验和和专属鉴别试验。专属鉴别试验。 特点 操作简便、反应快速、实验成本低、应用广，但专属性比仪器分析法差 一般鉴别实验一般鉴别实验 一般鉴别试验是通过化学反应进行试验来证明药品中含有某种离子或基团。 只能确证是哪一类药物，而不能确证是哪一种药物。 有机药物-官能团 无

16、机药物-阴离子、阳离子一般鉴别试验用于证实药物是哪一类，要进一步证实是哪一种药物，还需要结合专属鉴别试验 一般鉴别实验一般鉴别实验 Ch.P附录中有：一般鉴别实验一般鉴别实验1.1.有机氟化物有机氟化物+F-+Ce3+pH4.3有机氟氧瓶燃烧无机氟离子pH4.3 茜素氟蓝硝酸亚铈蓝紫色络合物碱液吸收有机氟氧瓶燃烧无机氟离子pH4.3 茜素氟蓝硝酸亚铈蓝紫色络合物碱液吸收一般鉴别实验一般鉴别实验水杨酸盐水杨酸盐+稀盐酸稀盐酸水杨酸（白色沉淀）水杨酸（白色沉淀）溶于醋酸铵溶于醋酸铵 2. 2. 有机酸盐有机酸盐(1) (1) 水杨酸盐水杨酸盐水杨酸水杨酸 + FeClFeCl3 3中性条件中性条件

17、弱酸性条件弱酸性条件红色配位化合物红色配位化合物紫色配位化合物紫色配位化合物+ 12HCl6 + 4FeCl3一般鉴别实验一般鉴别实验(2) (2) 酒石酸盐酒石酸盐供试品溶液（中性）供试品溶液（中性）+ 氨制硝酸银氨制硝酸银 银镜银镜水浴中水浴中HOCHCOOHHOCHCOOH+2Ag(NH3)2OHHOCCOONH4HOCCOONH42Ag+2NH3+2H2O 水浴中水浴中(3)(3)苯甲酸盐苯甲酸盐+3FeCl3+OH-+7NaCl+2Cl-赭色沉淀赭色沉淀一般鉴别实验一般鉴别实验一般鉴别实验一般鉴别实验3.3.芳香第一胺类芳香第一胺类供试品供试品+ 稀盐酸稀盐酸0.1mol/L亚硝酸钠

18、亚硝酸钠碱性碱性 - -萘酚试液萘酚试液橙黄色橙黄色到到猩红色猩红色沉淀沉淀N2+Cl-.+NaNO2+2HCl+NaCl+2H2ON2+Cl-.+NaOH+NaCl+2H2O一般鉴别实验一般鉴别实验 4.4.托烷生物碱类托烷生物碱类 此类生物碱中具有莨菪酸结构，此类生物碱中具有莨菪酸结构，有有VitaliVitali反应反应, ,显紫色显紫色。 水解水解3HNO3HNO3 3三硝基衍生物三硝基衍生物KOHKOH(C(C2 2H H5 5OH)OH)KOHKOH深紫色深紫色一般鉴别实验一般鉴别实验5.5.无机金属盐无机金属盐（Na, K, Ca, NHNa, K, Ca, NH4 4+ +)

19、) 焰色反应：焰色反应：Na显鲜黄色；显鲜黄色；K显紫色；显紫色；CaCa显砖红色显砖红色 铵盐：铵盐： 供试品供试品+ NaOH氨气氨气使湿润的使湿润的红色红色石蕊石蕊试纸变试纸变蓝蓝使硝酸亚汞试液湿使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显润的滤纸显黑色黑色一般鉴别实验一般鉴别实验6.6.无机酸根无机酸根 氯化物：氯化物： Cl- + Ag+ AgCl 白色乳状白色乳状 Cl- + MnO2 Mn2+ + Cl2 硫酸盐：硫酸盐： SO42- + Ba2+ BaSO4 白色白色 SO42- + Pb2+ PbSO4 白色白色 加盐酸，无白色沉淀加盐酸，无白色沉淀 硝酸盐：硝酸盐： Cu + NO3- Cu

20、(NO3)2+2NO2 （红棕色）（红棕色） Fe2+ +NO3- Fe 3+ +NO 区分区分 NO3- 、NO2- KMnO4褪色褪色 NO2- 不褪色不褪色 NO3-使湿润的使湿润的KI_ _淀粉试纸变蓝淀粉试纸变蓝7.三氯化铁呈色反应（酚羟基）蓝紫色v对乙酰氨基酚一般鉴别实验一般鉴别实验一般鉴别实验一般鉴别实验8.丙二酰脲 此类化合物具有二酰亚胺集团（CONHCONHCO） 在合适的PH下，可与某些重金属离子，如Ag+、Cu+等反应呈色或产生有色沉淀： 银盐反应 在碳酸钠溶液中，生成钠盐而溶解，再与硝酸银溶液反应，首先生成可溶性的一银盐，加入过量的硝酸银溶液，则生成难溶性的二银盐白色沉淀。 铜盐反应 在吡啶溶液中生成的烯醇式异构体与铜离子吡啶溶液反应，形成稳定的配位化合物，产生类似双缩脲的呈色反应，显紫色或生成紫色沉淀。按原理分类 （1）呈色反应鉴别法 （2）沉淀生成反应鉴别法 （3）荧光反应鉴别法 （4）气体生成反应鉴别法 （5）试剂褪色的鉴别法 （如：（如：有机氟化物有机氟化物）（如：（如：溴水褪色溴水褪色）（如：（如：苯甲酸苯甲酸盐类的三盐