第6章芳酸类非甾体抗炎药的分析

1、第6章芳酸类非甾体抗炎药的分析药物分析各论学习药物分析各论学习（具体某类药物）（具体某类药物）各论的学习方法各论的学习方法学习是一种探索和习惯学习是一种探索和习惯: :理解记忆理解记忆 药物药物 结构结构 理化性质理化性质 鉴别鉴别 杂质检查杂质检查 含量测定含量测定第六章第六章 芳酸类非甾体抗芳酸类非甾体抗炎药物的分析炎药物的分析 遵义医学院遵义医学院20112011级药物制剂专业课程级药物制剂专业课程学习要求学习要求1.典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质2.鉴别试验鉴别试验3.特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法4.含量测定方法含量测定方法非甾体抗炎药

2、非甾体抗炎药（Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs）v非甾体抗炎药（非甾体抗炎药（Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs）是一类不含有甾体骨架的抗炎）是一类不含有甾体骨架的抗炎 药，多数具有芳酸基本结构。药，多数具有芳酸基本结构。v本类药物的结构特点：本类药物的结构特点： 水杨酸类水杨酸类 邻氨基苯甲邻氨基苯甲/ /乙酸类乙酸类 芳基丙酸类芳基丙酸类 吲哚乙酸类吲哚乙酸类 苯并噻嗪甲酸类苯并噻嗪甲酸类 其它非甾体抗炎药其它非甾体抗炎药第一节第一节 典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质典型芳酸类非甾体抗

3、炎药物的结构与性质一、典型药物与结构特点一、典型药物与结构特点OOHORR(水杨酸类)OHOHO(水杨酸)(Salicylic Acid)OOHOCH3O(阿司匹林)(Aspirin)OOHOOOH(双水杨酯)(Salsalate)FFOHOHO(二氟尼柳)(Difunisal) 水杨酸类水杨酸类( (邻羟基苯甲酸类邻羟基苯甲酸类) )酸性酸性光谱特性光谱特性OHNOCH3CH3甲芬那酸HMefenamic AcidOHNORH邻氨基苯甲酸类酸性酸性酸性酸性光谱特性光谱特性 邻氨基苯甲酸类邻氨基苯甲酸类NROORH邻氨基苯乙酸类NNaOOClClH双氯芬酸钠Diclofenac Sodium酸

4、性酸性酸性酸性光谱特性光谱特性基团特性基团特性 邻氨基苯乙酸类邻氨基苯乙酸类UV 276nmRRCH3HOO芳基丙酸类CH3HOOCH3CH3布洛芬IbuprofenCH3HOOO酮洛芬KetoprofenCH3HOOOCH3萘普生Naproxen酸性酸性 芳基丙酸类芳基丙酸类NOOH3CHOCH3ClO吲哚美辛 IndometacinNRRCH3OHO吲哚乙酸类酸性酸性光谱特性光谱特性 吲哚乙酸类吲哚乙酸类NSOHCH3NROOOH苯并噻嗪甲酸类NSOHCH3NOONOH吡罗昔康 PiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam水解水解光谱特性光谱特性 苯并噻

5、嗪甲酸类苯并噻嗪甲酸类NO2HNSCH3OOO尼美利舒 NimesulideHONCH3OH对乙酰胺基酚 Paracetamol 其它非甾体类抗炎药其它非甾体类抗炎药水解水解光谱特性光谱特性二、本类药物的主要理化性质二、本类药物的主要理化性质n 酸性酸性 ：pKa 3pKa 36 6n 水解反应：酯水解反应：酯 酸酸 + + 醇（酚）醇（酚）n 光谱特性：含共轭体系，在一定波长处有光谱特性：含共轭体系，在一定波长处有UVUV吸收。吸收。 均有红外吸收均有红外吸收基团或元素特征基团或元素特征第二节第二节 鉴别试验鉴别试验一、与三氯化铁反应一、与三氯化铁反应 水杨酸反应水杨酸反应OHOHOOOOF

6、eOH+FeCl3+ H2O+ 3HCl紫堇色pH46阿司匹林：紫堇色阿司匹林：紫堇色双水杨酯：紫色双水杨酯：紫色二氟尼柳：深紫色二氟尼柳：深紫色均通过产生水杨酸与三氯化铁反应显色均通过产生水杨酸与三氯化铁反应显色 酚羟基反应酚羟基反应 对乙酰氨基酚与三氯化铁显蓝紫色对乙酰氨基酚与三氯化铁显蓝紫色HONCH3OH对乙酰胺基酚 ParacetamolFeCl3+Fe1/3ONCH3OH+HCl蓝紫色NSOHCH3NOONOH吡罗昔康 PiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam显玫瑰红色显玫瑰红色显淡紫色显淡紫色二、缩合反应显色二、缩合反应显色CH3HOOO酮

7、洛芬+NHNO2NO2NH2CH3HOONNO2NNO2橙红色H2SO4-H2OH三、重氮化三、重氮化- -偶合反应（芳伯胺基）偶合反应（芳伯胺基）NH2H+, HNO2N2+Cl-NNOHCOOHRCOOHROHOH-RCOOH芳伯胺芳伯胺 or 水解产生芳伯胺水解产生芳伯胺红色偶氮化合物红色偶氮化合物H H+ +，亚硝酸钠，亚硝酸钠OHOH- -，b b- -萘酚萘酚OCOCH3COONHCOCH3+3H2OHCl贝诺酯HONH2HCl+OHCOOHNaNO2,2HClHON2+Cl-OHNaOHOHNNOH橙红色四、四、氧化反应氧化反应甲芬那酸甲芬那酸 H2SO4 深蓝色深蓝色(O)K2

8、Cr2O7并产生绿色荧光并产生绿色荧光随即变为棕绿色随即变为棕绿色五、五、水解反应水解反应白色沉淀白色沉淀 +醋酸臭气醋酸臭气 酯键酯键 or or 酰胺键酰胺键 特征现象特征现象阿司匹林阿司匹林D DCOOHOCOCH3COONaOHCOOHOHNa CO23H2SO4六、特征元素反应六、特征元素反应 Cl Cl- AgCl（双氯酚酸钠）（双氯酚酸钠） S S2- PbS （美洛昔康）（美洛昔康）OHOH- -D DAg+高温高温Pb2+七、七、 光谱法光谱法 UV、IR max， min-A-吸收系数吸收系数A 1 /A 2UV八、色谱法八、色谱法供试品保留时间供试品保留时间对照品保留时间

9、对照品保留时间-COOH-OH-COOHPh-C邻位取代邻位取代Ph第三节第三节: : 特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法表表6-3 典型非甾体抗炎药物的主要有关物质典型非甾体抗炎药物的主要有关物质药物名称药物名称有关物质有关物质结构式结构式代码代码/名称名称药物药物名称名称有关物质有关物质结构式结构式代码代码/名称名称阿司匹林阿司匹林双水杨酯双水杨酯游离游离水杨酸水杨酸萘普生萘普生I 6-甲氧基甲氧基-2-萘乙酮萘乙酮甲芬那酸甲芬那酸2,3-二甲基二甲基苯胺苯胺对乙酰对乙酰氨基酚氨基酚氨基酚氨基酚对氯苯乙酰对氯苯乙酰胺胺一、阿司匹林中游离水杨酸与有关物质的检查一、阿司匹林中游离水杨酸与有关

10、物质的检查1. 游离水杨酸游离水杨酸来源：生产中乙酰化不完全来源：生产中乙酰化不完全 贮藏中水解产生贮藏中水解产生ONaCO2加压，ONaCOONaOHCOOHH+COOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,7075 C。ASP水杨酸COOHOOOH双水杨酯双水杨酯OH-CO2副产物危害性：危害性：1.对胃肠道的强烈刺激性对胃肠道的强烈刺激性 2. 被氧化生成有色醌型化合物，使阿司匹林变色被氧化生成有色醌型化合物，使阿司匹林变色COOHOHCOOHOHHOOOCOOHOOHOOHCOOHCOOHHOOOCOOHHOCOOHOO+COOHOOOCOOH-+ 检查原理检查原理- ChP be

11、fore 2010 用水杨酸与用水杨酸与 Fe3+ 生成紫堇色配生成紫堇色配离子的原理离子的原理, 用稀硫酸铁铵溶液显色法检查用稀硫酸铁铵溶液显色法检查 供试品溶液制备过程中阿司匹林水解供试品溶液制备过程中阿司匹林水解- ChP2010（HPLC） 制备供试品溶液：制备供试品溶液：1%冰醋酸甲醇溶液（防水解）冰醋酸甲醇溶液（防水解） 外标法；不得超过外标法；不得超过0.1%- 原料、制剂限量不同原料、制剂限量不同原料：原料： 0.1%片：片： 0.3%肠溶片：肠溶片： 1.5%肠溶胶囊：肠溶胶囊： 1.0%泡腾片：泡腾片： 3.0%栓剂：栓剂： 3.0%2.2.有关物质有关物质OH(CH3CO

12、)2OOCOCH3+OCOCH3COOHOCOCH3COO+OHCOOHOHCOO醋酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯HPLC法法有关物质有关物质原料苯酚原料苯酚 + 副产物副产物 HPLC（图（图6-2）阿司匹林阿司匹林 水杨酸水杨酸 乙酰水杨酰水杨酸乙酰水杨酰水杨酸a:阿司匹林供试品阿司匹林供试品(10mg/ml)；b:0.5%自身对照自身对照(50 g/ml)；c: 0.05%自身对照自身对照(灵敏度试验灵敏度试验5 g/ml)；d:水杨酸对照水杨酸对照(10 g/ml)；e:空白空白阿司匹林的检查阿司匹林的检查五、对乙酰氨基酚中氨基酚和对氯苯乙酰胺HPLCClNO2NH2HOHONO2HO

13、NHCOCH3水解还原酰化ClNHCOCH3限量要求：对氨基酚不得过限量要求：对氨基酚不得过0.005%0.005%； 对氯苯乙酰胺不得超过对氯苯乙酰胺不得超过0.005%0.005%第四节第四节 含量测定含量测定 羧基：酸碱滴定、非水滴定羧基：酸碱滴定、非水滴定 酯基：剩余酸碱滴定酯基：剩余酸碱滴定 苯环：紫外分光光度法、苯环：紫外分光光度法、HPLCORCOOH原料药：酸碱滴定法原料药：酸碱滴定法制剂：制剂： UV 、HPLC一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法酸碱酸碱滴定法滴定法水解后剩余量滴定法水解后剩余量滴定法阿司匹林阿司匹林 USP, BP, JP非水溶液滴定法非水溶液滴定法吡罗昔康吡罗昔

14、康吡啶环显碱性吡啶环显碱性, 可在可在冰醋酸溶液中用高冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定氯酸滴定液滴定 剩余量滴定法剩余量滴定法美洛昔康美洛昔康水及与水混溶的有水及与水混溶的有机溶剂中难溶机溶剂中难溶,溶于溶于氢氧化钠滴定液后氢氧化钠滴定液后盐酸回滴定盐酸回滴定 直接滴定法直接滴定法水杨酸水杨酸,阿司匹林阿司匹林,双双水杨酯水杨酯,二氟尼柳二氟尼柳,甲甲芬那酸芬那酸,布洛芬布洛芬,酮洛酮洛芬芬,萘普生萘普生,尼美舒利尼美舒利以以ASP及其制剂为例及其制剂为例( (一一) ) 直接滴定法直接滴定法 苯甲酸苯甲酸 水杨酸水杨酸酸性较强酸性较强COHOHO直接滴定直接滴定AspirinAspirin、双

15、水杨酯、二氟尼柳、甲芬那酸、布洛芬、尼美、双水杨酯、二氟尼柳、甲芬那酸、布洛芬、尼美舒利等均采用本法测定含量。舒利等均采用本法测定含量。p pKa 36 的药物溶于中性醇的药物溶于中性醇,可直接用可直接用NaOH滴定滴定p pKa 69 的药物要用非水溶液滴定法的药物要用非水溶液滴定法中性乙醇COOHOCOCH3NaOH20以下COONaOCOCH3H2O1. 测定法测定法 本品约本品约0.4g, 精密称定精密称定, 加中性乙醇加中性乙醇20ml溶解后溶解后,加加酚酞指示液酚酞指示液3滴滴, 用氢氧化钠滴定液用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定滴定2. 讨论讨论乙醇：溶解乙醇：溶解Asp，

16、防止，防止Asp水解水解;中性乙醇：对酚酞指示液显中性，消除滴定误差中性乙醇：对酚酞指示液显中性，消除滴定误差滴定在不断振摇下稍快进行滴定在不断振摇下稍快进行, 防阿司匹林水解防阿司匹林水解受阿司匹林的水解产物水杨酸及醋酸的干扰受阿司匹林的水解产物水杨酸及醋酸的干扰只能用于合格原料药的测定。只能用于合格原料药的测定。本法特点：简单本法特点：简单( (二二) ) 剩余量滴定法剩余量滴定法NSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几乎不溶，在丙酮中微溶。所以乎不溶，在丙酮中微溶。所以ChP使用使用定量过量的氢氧化

17、钠滴定液溶解后，再定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后，再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。烯醇式结烯醇式结构构:酸性酸性为什么氢氧为什么氢氧化钠能溶解化钠能溶解之？之？(三三) 水解后剩余量滴定法水解后剩余量滴定法OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O取本品约，精密称定，准确加取本品约，精密称定，准确加NaOH液，缓缓煮沸液，缓缓煮沸10min，放冷，放冷，以酚酞为指示剂，用以酚酞为指示剂，用H2SO4液液(0.25mol/L)滴定剩余的滴定剩余的NaOH，并，并将滴定结果用空白试验校正。每将滴

18、定结果用空白试验校正。每1ml的的NaOH液液(0.5ml/L)相当于相当于的的C9H9O4USP32-NF271、水解后剩余量滴定法、水解后剩余量滴定法含量% = ( V0-V) FTW 100%T = 0.5 12180.16 = 45.04 (mg/ml)滴定度滴定度2、 两步滴定法两步滴定法水解后剩余量滴定法的改进水解后剩余量滴定法的改进 用于用于Aspirin片测定片测定片剂中有稳定剂片剂中有稳定剂HOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸橼酸Citric acidHOCHCOOHCHCOOHHO酒石酸Trataric acid水解产物水解产物水杨酸水杨酸SAHAc第一步：第一步：

19、NaOH滴定所有的酸：滴定所有的酸：ASP，CA，TA， SA，HAc第二步：水解后剩余滴定第二步：水解后剩余滴定取本品取本品1010片，精密称定，研细，精密称取适量片，精密称定，研细，精密称取适量( (约相当于阿司约相当于阿司匹林匹林0.3g)0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇，置锥形瓶中，加中性乙醇( (对酚酞指示剂显中对酚酞指示剂显中性性)20ml)20ml，振摇使，振摇使ASPASP溶解，加酚酞指示液溶解，加酚酞指示液3 3滴，滴加滴，滴加NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)至显粉红色，再精密加至显粉红色，再精密加NaOHNaOH液液(0.1mol/L)40ml

20、(0.1mol/L)40ml，置，置水浴上加热水浴上加热15min15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用，并时时振摇，迅速放冷至室温，用H H2 2SOSO4 4液液(0.05mol/L)(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml1ml的的NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相当于的相当于的C C9 9H H8 8OO4 4COONaOCOCH3NaOHCOONaOHNaAc H2O2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O阿司匹林片含量测定方法阿司匹林片含量测定方法(ChP2005)如下如下: l

21、含量计算含量计算供试品中阿司匹林的含量供试品中阿司匹林的含量,由水解时消耗的碱量计算由水解时消耗的碱量计算第第1步步: 中和时中和时, 阿司匹林的游离羧酸中和阿司匹林的游离羧酸中和第第2步步: 水解后剩余量滴定法时阿司匹林与氢氧化钠反水解后剩余量滴定法时阿司匹林与氢氧化钠反应的摩尔比为应的摩尔比为1:1滴定度滴定度: T = 0.1(1/1) 180.16=18.02(mg/m1)片剂含量片剂含量: 标示量%=WW标示量100%(V0-V)FT空白消耗空白消耗样测消耗样测消耗校正因数校正因数滴定度滴定度片剂规格片剂规格平均片重平均片重游游离离S SA A偏偏高高时时结结果果偏偏高高不不能能完完全全排排出出干干扰扰缺点优点操操作作简简便便水水杨杨酸酸干干扰扰少少结结果果准准确确，避避免免游游离离S SA A及及片片剂剂中中稳稳定定直接滴定法水解后剩余滴定法两步滴定法(四四) 非水溶液滴定法（自学）非水溶液滴定法（自学）1. 原理原理吡罗昔康具有吡啶环吡罗昔康具有吡啶环, 显碱性显碱性, 可在冰醋酸溶液可在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定中用高氯酸滴定液滴定 2. 测定法测定法本品约本品约0.2g, 精密称定精密称定, 加冰醋酸加冰醋酸20ml使溶解使溶解, 加加结晶紫指示液结晶紫指示液1滴滴, 用高氯酸滴定液用高氯酸滴定液(0.