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文档简介

1、基因文库讲课提纲一、 目的要求：1. 基因文库的基本概念2. 基因文库的分类3. 基因文库的意义4. 基因文库的构建5. 不同基因文库的特点二、 授课内容1. 使用类比的方法使同学们生动形象的理解基因文库的概念基因文库（gene library）即是“基因的图书馆”图书馆的定义是“经过规划管理，收藏图书以方便人们阅读或研究的场所”将此定义套入基因文库中即“Gene library就是经过规划管理，收藏基因信息以方便人们使用的场所”使同学们生动的了解了构建基因文库的目的。再介绍基因文库的通俗概念即：文库(library)是指一种全体的集合。基因文库(gene library)则是指某一生物类型全

2、部基因的集合。这种集合是以重组体形式出现。某生物DNA片段群体与载体分子重组，重组后转化宿主细胞，转化细胞在选择培养基上生长出的单个菌落(或噬菌斑)(或成活细胞)即为一个DNA片段的克隆。全部DNA片段克隆的集合体即为该生物的基因文库。 构建基因文库的意义不只是使生物的遗传信息以稳定的重组体形式贮存起来，更重要的是它是分离克隆目的基因的主要途径。2. 介绍基因文库的分类基因组DNA文库（genomics DNA library)基因文库cDNA文库（cDNA library） 3. 分别对两种基因文库进行介绍1) 基因组DNA文库（genomics DNA library)i. 基因组DNA文

3、库的定义：以DNA片段的形式储存着某种生物全部基因组DNA（包括所有编码区与非编码区）信息其实质就是采用“化整为零”策略，将庞大的基因分解成一段段，每段包含一个或几个基因ii. 基因组DNA文库构建过程：通过图表的方式说明整个基因组DNA文库的构建过程，并且将比较抽象的分生词汇用类比的方式进行介绍。iii. 基因组DNA文库特点：l 提供全套遗传信息，即完整的基因组DNAl 可以研究基因组中控制基因转录的调控序列，l 内含子分布与作用，l 了解以及重复序列的数量与分布。2) cDNA文库的介绍：a) cDNA文库定义：是包含某一组织细胞在一定条件下表达的全部mRNA经逆转录合成的克隆群体，以cDNA片段的形式储存着该组织细胞基因表达信息。b) 用中心法则介绍cDNA的含义：DNAmRNA转录蛋白质翻译逆转录会进行非编码区与内含子的切除c) 介绍如何构建cDNA文库：mRNA逆转录酶合成的各种双链cDNA片段cDNA用的载体重组质粒cDNA文库d) cDNA文库的特点：² cDNA无内含子，长度比DNA文库小，操作更加方便² mRNA比基因组中基因少，筛选特定基因工作量较小² 可在原核生物中表达有生物活性蛋白质

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