分子生物学期末试题

1、分子生物学期末考试试题、名词解释1、反式作用因C能直接或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。2、基因家族:3、C值矛厉：C值是指真核生物单倍体的DNA含量，般的，真核生物的进化程度越高，C值越人，但在些两栖类生物中，其C值却比哺乳动物大的现象。原因是 它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多彼不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。4、核型：指个物种所特有的染色体数目和每条染色体所特有的形态特征。5、RNA editing：转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。二、判断：1、真核生物所有的mRNA都有POIyA结构。 （X ）组蛋白的mRN

2、A没有2、由于密码子存在摇摆性，使得-种IRNA分子常常能够识别-种以上同一种氨基酸的密码子。（）3、人肠杆菌的连接醐以ATP作为能量来源。（X）以NAD作为能量来源4、IRNA只在蛋白质合成中起作用。（X ） tRNA还有其它的生物学功能，如可作为逆转录酶的引物5、DNA聚合酶和RNA聚合酚的催化反应都需要引物。（X ）RNA聚合酶的催化反应不需要引物6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸（X ）真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制（X ）质粒具有复制起始原点，能在宿主细胞中独立自主地进行复制8、RNA W为不含有DNA基因组，所以根据

3、分了遗传的中心法则，它必须先进行反转录，才能复制和增殖。（X ）不定，有的RNA病看可直接进行RNA复制和翻译9、细菌的RNA聚合酶全势由核心酶和P因了组成。（X ）细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和因了组成10、核小体在复制时组蛋口八聚体以全保留的方式传递给了代。（）11、色氨酸操纵了中含有衰减子用列（）12、SOS框是所有din基因（SOS基因）的操纵了都含有的20bp的IeXA结合位点。（ ）三、填空:11、原核生物的启动了的四个保守区域为转录起始点、-10区、35区、10区与35区的距离O2、根据对DNA序列和蛋白质因了的要求，可以把重组分为同源重组、位点专性重组/特异位点重组、转座重组

4、、异常重组四类。3、研究启动了功能的主要方法是启动了的突变，研究酶与启动了间识别与结合的方法有足迹法和碱基修饰法o、碱性一壳氨酸拉链（bZIP）o4、真核生物中反式作用因了的DNA结合结构域有螺旋一转角一螺W（HTH）.碱性一螺旋环螺旋（bHLH）.锌指nc finger）5、根据DNA复性动力学，DNA序列可以分成哪四种类型？单序列、轻度重复序列、中度重复序列、高度重复序列四、选择题（10分，每题1分）1、在真核基因农达调控中，（B）调控元件能促进转录的速率。A、衰减了 B、增强了 C、repressor D、TATA BOX2、核基因mRNA、的内元拼接点序列为（D ）。A、AGGUB.

5、GA.UGC. UGGAD、GUAG3、下列何种因子不会诱变DNA（ D ）A、亚硝酸B、UVC、丫旋橙D、饱和脂肪乳剂4、RNA聚合酶1的功能是（C）A转录IRNA和5sRNA基因；B转录蛋白质基因和部分SnRNA基因：C只转录rRNA基因；D转录多种基因5、如果段DNA产生了+ 1的译码突变，可以加以校正的是（D）A突变型氨fi IRNA合成势B有突变型反密码/的IRNAC有切割个核甘酸的酚D有四个碱展长的反密码/的IRNA6、参与重组修复的势系统中，具有交换DNA链括性的是（D）A DNA聚合酚I B ReCB蛋白C ReCC蛋白D ReCA蛋白7、原核RNA POl识别的启动（位于：（

6、A）A、转录起始点的上游：B、转录起始点的下游：1、原核生物的启动了的四个保守区域为转录起始点、JO区、35区、10区与35区的距离O2、根据对DNA序列和蛋白质因了的要求，可以把重组分为同源重组、位点专性重组/特异位点重组、转座重组、异常重组四类。3、研究启动了功能的主要方法是启动了的突变，研究酶与启动了间识别与结合的方法有足迹法和碱基修饰法o、碱性一壳氨酸拉链(bZIP)o4、真核生物中反式作用因了的DNA结合结构域有螺旋一转角一螺W(HTH).碱性一螺旋环螺旋(bHLH).锌指nc finger)C、转录终点的下游：D、无定位置:98、在研丸原核翻译过程中，可用不同的抑制剂研究翻译诸阶段

7、，其中链霉素可抑制：（CA、起始B、延长C、肽基有P位移至A位D、核糖体移位9、在什么情况下，乳箱操纵子的转录活性最高（A ）A高乳糖，低葡萄糖B高乳糖，高葡萄糖C低乳糖，低葡萄糖D低乳糖，高葡萄糖10、设密码/为5XYZ3,反密码了为5,ABC 3*,则处于摆动位置上的碱基为（C ）A X-C B Y-B C Z-A五、简答：1. 叙述由段DNA序列形成多种蛋白产物的机制。答：由段DNA形成多种蛋白产物的可能机制有：阅读框不同、抗终止作用、可变剪切和RNA编辑。重叠基因在X174中最早发现，两个邻近的基因以种巧妙的方式发生重叠，转录出来的mRNA以不同的阅读框阅读并被农达，产生两种以上的蛋白

8、产物C在噬 菌体中有不同时期农达的操纵（，如左向早期操纵/可以转录出两种mRNA,这是由于依赖于Pw r-的终II：作用以及早期基因编码的抗终II：蛋白的抗终II：作用造成的。 抗终止蛋口与RNA聚合酶结合后修饰了酶的构象，使其不再识别弱终II： P,从而使段DNA可以转录出多种mRNA,从而产生两种以上的蛋白产物。真核生物的hnRNA含有内含&通过剪接可将其出去形成Mrna.但有的高等真核细胞存在可变剪接，即来自-个基因的RNA,其某个内含了的5 '供体在不同的条 件下和不同内含子的3'受体进行剪接，从而将来自个基因的mRNA前体剪接产生多种mRNA,翻译出不同的蛋口

9、质。另外，在真核生物中存在RNA编辑，将mRNA 在转录后进行插入、缺失或核昔酸的替换，改变DNA模板的遗传信息，从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白质。1、各种二核昔酸对的排列顾序不同，对双螺旋结构的影响不同。（1）请问那种的Tm最低？答：的Tm值最低。（2）含这种二核昔酸的序列有那些，为什么？（7分）答：含有A/T的主要有复制起始点、原核生物启动了的-IO区、真核生物启动了的TATA框，此外，还有生物体选 择以UAA作为最有效的终止密码r=DNA在复制和转录时要在起始原点和启动了区形成起始复合物，复制起始点、原核生物启动（的-IO区、真核生物启动/的TATA框富含AT对，二者之间有两条氢键，

10、 在此处易于解开双链，容易形成起始复合物，使复制和转录过程顺利进行。生物体选择以UAA作为最有效的终止密码了，I対为在64的密码（中，假使UAA具有和它配对的 反密码了，所形成的产物在生理条件下也是不稳定的，有利于肽链的释放，而且UAA很少发生无义抑制突变，有利于肽链的正常终止。3、详述人肠杆菌色氨酸操纵/的调 控机理。（】2分答：人肠杆菌色氨酸操纵/的转录受阻遏和衰减两种机制的控制，前者通过阻遏蛋白和操纵基因的作用控制转录的起始，后者通过前导序列形成特殊的空 间结构控制转录起始后是否进行下去。1）色氨酸操纵/的可阻遏系统：在阻遏系统中，起负调控的调节基因的产物是个无活性的阻遏蛋白，色氨酸是辅

11、阻遏物：当色氨酸不足时，阻遏蛋口无活性，不能和操纵 基因结合，色氨酸操纵了能够转录：当色氨酸充足时，阻遏蛋白和它结合而彼激活，从而结合到操纵基因上，而色氨酸操纵/的操纵基因位于启动基因内，I大1此，洁性阻遏 物的结合排斥了 RNA聚合酶的结合，从而抑制了结构基因的农达。2）色氨酸操纵子的衰减调控在色氨酸操纵/的操纵基1対和第个结构基因之间有-段前导序列L,在前导序列上游部分有个核糖体结合位点，后面是以起始密码AUG开头的14个氨基酸的编码区， 编码区有两个紧密相连的色氨酸密码（，后面是个终II：密码Y- UGA,在开放阅读框下游有个不依赖PWr的终止了，是段富含G/C的回文序列，可以形成发夹结

12、 构，因此可以在此处终止转录。另外前导序列包含4个能进行碱基互补配对的片断1区、2区、3区和4区。它们能以1、2和3、4或2、3的方式 进行配对，从而使前导序 列形成二级结构的变化。在细菌中，翻译与转录偶连，-旦RNA聚合酶转录出IrPmRNA中的前导肽编码区，核糖体便立即结合上去翻译这序列。当细胞中缺乏色氨酸 时，TrP-IRNATm的浓度很低，核确体翻译前导肽至两个连续的色氨酸密码了处就陷入停顿，这时核穂体只占据1区，由RNA聚合酶转录的2区和3区便可配对，4区游离 在外，这样就不能形成终止了结构，RNA聚合圜就可以直转录下去，最后完成trp全部结构基因的转录，得到完整的mRNA分J当细胞

13、中存在色氨酸时，就有定浓度 的Trp-IRNATm,核糖体便能顺利通过两个连绽的色氨酸密码了而翻译出整个前导肽，直到前导肽序列后面的终止密码f UGA处停ll：。此时，核糖体占据了 I区和2区， 结果3区和4区配对，形成转录终II：/结构，使RNA聚合酶终止转录。实现衰减调控的关键在于时间和空间上的巧妙安扌II、在空间上，两个色氨酸密码f的位置很重要, 不可随意更改；在时间上，核糖体停顿于两个色氨酸密码f上时，序列4应当还未转录出来。分子生物学试卷一、名词解释（共10题，每题2分，共20分）1、质粒：2、目的基因：3、转录：4、染色体：5、原核生物：6、基因组：7、翻译：8、复制：9、基因农达

14、：10、HGP二、填空题（共28空，每空1.5分，共42分）1、DNA与RNA在组成成分上的基本区别包括，DNA含有、，而RNA含有、。2、RNA主要包括、共三种。3、真核生物基因组的基本特征包扌舌、-而原核生物基因组的基本特征包描、。4、DNA复制是个的过程，即子代分子的来自亲代，而是新合成的。这个复制特点保的。5、基因工程包括五个基本流程：、和。6、病毒根据其遗传物质可分为：病毒和病毒。7、基因农达主要生成：、。三、简答题：（共3题，每题6分，共18分）1 PCR技术有哪三人基本环节？2 tRNA和DNA的二级结构各有何基本特点？3逆转录过程的基本原理是什么？有何医学意义？四、问答题：（共

15、2题，每题10分，共20分） 1、真核生物与原核生物基因农达调控各自有何基本特点？其意义是什么？2、何谓人类基因组计划，其意义如何？江西省高等教育考试（非主干课程）分子生物学试卷参考答案一、名词解释（共10题,每题2分,共20分）I、细菌核外环状DNA2、生物技术中的应用基因3、RNA的合成过程4、核内遗传信息贮存形式5、早期细胞类型6、 物种全部基因之和7、蛋白质合成过程8、DNA合成过程9、转录加翻译的信息实现过程10、人类基因组计划二、填空（共28空,每空1.5分,共42分）1、脱氧核糖，T,核糖，U2、tRNA.InRNA. Rrna,3、断裂基因，基因家族，重复序列多，细胞器基因；操

16、纵子，连续基因，重复序列少,无细胞器基閃4、半保留，i半，另一半，高保真性5、分，切接,转,筛，6、DNARNA7、RNA蛋白质三、简答（共3题,每题6分,共18分）1、变性,退火,延伸，（各2分）2、IRNA含氨基酸臂与反密码环.（3分）DNA含两条平行螺旋链与碱基互补（3分）3、逆转录酸以病毒RNA为模板合成CDNA进步在缩主细胞转变成前病毒（4分）并予进步说明医学意义（2分）四、问答（共2题,每题IO分,共20分）1、特点：从两类调控的环节与主耍环节与方式加以区别（6分前者环节多于后者,后者以操纵了模式并进步说明意义（4分）2、对人类自身基因序列等的研究（4分，其总义可从基础,医学,药学

17、等方而说明（6分）分子生物学试题及答案分子生物学试题及答案一、名词解释1. CDNA与CCCDNA： CDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA； CCCDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DA。2. 标准折叠单位：蛋口质二级结构单元a螺旋与B 折叠通过各种连接多肽可以组成特殊儿何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。儿乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此乂将其称为标准折叠单位。3. CAP：环腺昔 酸（CAMP）受体蛋口 CRP （CAMP receptor PrOtein ）, CAMP 与 CRP 结合后所形成的复合物称激活蛋口

18、 CAP （CAMP activated PrOtein ）4. 回文序列：DA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。5. micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA,与RNA序列互补， 可抑制mRNA的翻译。6.核酶：具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。7模体：蛋白质分子空间结构中存在 着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域8.信号肽：在蛋白质合成过程中N端有1齐36个氨基酸残基的肽段，引导蛋口质的跨膜。9. 弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核昔酸序列。10.魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌 将会产生一

19、个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟昔 四磷酸（PPGPP）和鸟背五磷酸（PPPGPP） o PPGPP与PPPGPP 的作用不只是一个或儿个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称 为魔斑。11上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子，弱化子等。12DNA探 针：是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。14单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。13.考斯质粒：是 经过人工构建的一种外

20、源DNA载体，保留噬菌体两端的CoS区，与质粒连接构成。16.蓝-白斑筛选：含LaCZ基因（编码半乳糖昔酶）该 酶能分解生色底物X-gal （5-澳-4-氯-3-呵味-B-D-半乳糖昔）产生蓝色，从而使菌株 变蓝。当外源DM插入后，LaCZ基因不能表达，菌株呈 白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-口斑筛选。17顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18 KIenOW酶：DNA聚合酶I大片段，只是从 DNA聚合酶I全酶中去除了 5' 3'外切酶活性19.锚定PCR：用于扩增已知一端序列的的DA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然 后

21、分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。20.融合蛋白：真核蛋口的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋口与外源蛋白结合在一起所组成的蛋口质。二、填空1. ' DNA的物理图谱是DNA分子的邙艮制性内切酶酶解）片段的排列顺序。2. RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3. 原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4.蛋口质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋口伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5.启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件 ）。6.分子生物学的研究内容主要包含（结构

22、分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物 体吸收的外源DXA改变了其遗传潜能）。8. hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、（mRNA的5末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3z末端多了一个多聚腺昔酸（POIyA）尾巴）。9. 蛋口质多亚基形式的优点是（亚基对DA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋Cl质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影 响）.（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关

23、闭）。10. 蛋口质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。11半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以 作为碳源供细胞生长）；另一方面（它乂是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于CAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成； 同时需要一个依赖于CAMP-CRP的启动子Sl对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（SI ）开始。12DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终H的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DA重 组实验通常包含以下儿个步骤： 提取供体生物的Ll的基因（或称外源基因），酶接连接到另

24、一 DNA分子上（克隆载体）,形成一个新的重组DXA分子。 将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋口质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋口质合成的严格控制称为（松弛 型质粒）。14PCR的反应体系要具有以下条件：a、被分离的IJ的基因两条链各一端序列相互补的DNA引物（约20个碱基左右）。b、具有热稳定性的酶如：TagDXA聚合酶。c、dNTPd、作为模板的目的DNA序列15PCR的基本反应过

25、程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。16、转基因动物的基本过程通常包括：将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中；接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；完成胚胎发育，生长为后代并带有外源基因；利用这些能产生外源蛋白的动物作为种畜，培育新的纯合系。17杂交瘤细胞系的产生是山（脾B）细胞与（骨髓瘤）细胞杂交产生的，山于（脾细胞）可以利用次黃卩票吟，（骨细胞）提供细胞分裂功 能，所以能在HAT培养基中生长。18.随着研究的深入第一代抗体称为（多克隆抗体）、第二代（单克隆抗体）、第三代（基因工程抗 体）。19. IJ前对昆虫病毒的基因工程改造主要集中于杆状病毒，表现在引入

26、（外源毒蛋口基因）；（扰乱昆虫正常生活周期的基因）；（对病毒基因进行修饰）。20.哺乳类RNA聚合酶II启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是（TFllD ）、（ SP-I ）和（CTFNF1 ） o 21. RNA聚合酶II的基本转录因子有、TFn-AS TFn-B. TFII-D. TFn-E他们的结合顺序是：（D、A、B、E ）。其中TFll-D的功能是（与TATA盒结合 ）22.与DA结合2勺转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下儿种（螺旋-转角-螺旋）、（锌指模体）、（碱性-亮氨酸拉链模体）。23限制性内切酶的切割方式

27、有三种类型分别是（在对称轴5'侧切割产生5'粘端）、（在对称轴3'侧切割产生3'粘端（在对称轴处切 割产生平段）。124.质粒DNA具有三种不同的构型分别是：（SC构型）、（ OC构型）、（L构型）。在电泳中最前面的是（SC构型）。25外源基因表达系统，主要有（大肠杆菌）、（酵母）、（昆虫）和（哺乳类细胞表）。26.转基因动物常用的方法有：（逆转录病毒感染法）、（DM显微注射法）、（胚胎干细胞法）。三、简答1. 分别说出5种以上RNA的功能？转运RNAtRNA转运氨基酸核蛋口体rRNA核蛋口体组成成信使RNAmRNA蛋白质合成模板不均一核hnRNA成熟mRNA的

28、前体小核RNASnRNA参与hnRNA的剪接小胞浆RNASCRNA/7SL-RNA蛋口质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义RNAanRNA/micRNA对基因的表达起调节作用核酶RibOZyme RNA有酶活性的RNA2. 原核生物与真核生物启动子的主要差别？原核生物TTGACA - TATAAT起始位点-35 -10真核生物增强子-GC -CAAT-TATAA-5mGpp-起始位点-IIo -70 -253. 对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面？天然质粒往往存在着缺陷，因而不适合用作基因工程的载体，必须对之进行改造构建：3、加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择,通常是抗

29、生素基因。b、增加或减少合适的酶切位点，便于重组。C、缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。d、改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝。e、根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件4举例说明差示筛选组织特异cDA的方法？制备两种细胞群体，IJ的基因在其中一种细胞 中表达或高表达，在另一种细胞中不表达或低表达，然后通过杂交对比找到目的基因。例如：在肿瘤发生和发展过程中，肿瘤细胞会呈现与正常细胞表达水平不同的mRXA,因此，可以通过差示杂交筛选出与肿瘤相关的基因。也可 利用诱导的方法，筛选出诱导表达的基因。5. 杂交瘤细胞系的产生与筛选？脾B细胞+骨髓瘤细胞，加聚乙二醇（PEG

30、 ）促进细胞融合，HAT培养基中培养（内含次黃瞟吟、氨基蝶吟、T ）生长出来的脾B-骨髓 瘤融合细 胞继续扩大培养。细胞融合物中包含：脾-脾融合细胞：不能生长，脾细胞不能体外培养。骨-骨融合细胞：不能利用次黄瞟吟，但可通过第二途径利用叶酸还原酶合成卩票岭。氨基蝶吟对叶酸还原酶有抑制作用，因此不能生长。骨- 脾融合细胞：在HAT中能生长，脾细胞可以利用次黃卩票吟，骨细胞提供细胞分裂功能。6、利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA 一级结构的原理与方法？原理是釆用核昔酸链终止剂一2, , 3, -双脱氧核昔酸终止DNA的 延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-0H, 旦参入到DM链中，此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则，每当DNA 聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP,结果导致脱氧核昔酸链延长的终止；二是参入dTP,使 DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTPo根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读岀DNA序列。7、激活蛋口（CAP）对转录的正调控作用？环腺昔酸（CAMP）受体蛋口 CRP （CAMP receptor PrOtein） , CAMP与