重组人促红细胞生成素对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用

1、重组人促红细胞生成素对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用         08-07-04 16:22:00     作者：刘亚 蔡锦方 李振贵    编辑：studa20【关键词】  再灌注损伤    摘  要：目的观察重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对肢体骨骼肌缺血再灌注(IR)损伤的保护作用。方法建立大鼠后肢缺血再灌注模型。40只大鼠随机均分为：假手术组(组)，IR组(组)，IR+

2、生理盐水组(组)，IR+rHuEPO组(组)。取血浆测定丙二醛(MDA)、肌酸磷酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量。取骨骼肌标本测定髓过氧化酶(MP0)活性、湿重干重比(Wetdry)。结果组与组比较，血浆和骨骼肌的各项生化指标显著增高(P001)；组血浆及骨骼肌各项测定指标较组相比明显降低(P001)。组和组之间比较，差异无显著意义。结论rHuEPO对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤有保护作用。关键词：再灌注损伤；  骨骼肌；  重组人促红细胞生成素Protective effect of recombinant human erythropoietin on ische

3、mia/reperfusion injury of rat skeletal muscleAbstract：ObjectiveTo observe the protective effect of recombinant human erythropoietin(rHuEPO）on ischemia/reperfusion(IR）injury of skeletal muscle in the limbs of ratsMethod After establishing the rat model of hind limb ischemia/reperfusion,forty rats wer

4、e divided into 4 groups:sham operation group（Group ),I/R group（Group ),I/R + normal saline treatment group(Group ),I/R + rHuEPO treatment group(Group )The levels of malodialdehy(MDA), creatinephosphokinase(CPK）and lactatedehpdrogesase(LDH）in plasma and myeloperoxidase(MPO）ratio,wet/dry of skeletal m

5、uscle were measured respectivelyResultThe indexes of plasma and skeletal muscle in group were significantly higher than those in group(P001),while the indexes of the group were significantly lower than those in group (P001)， and indexes of group has no difference with those of Group ConclusionThe rH

6、uEPO can protect the skeletal muscle from ischeinia/reperfusion injury in ratsKey words：Reperfusion injury;  Skeletal muscles;  Recombinant human erythropoietin    肢体的创伤、断肢再植、组织移植以及止血带的应用时间过长均可引起缺血再灌注(IR)损伤。它可影响缺血组织的存活及功能，且可累及远隔器官，严重时可引发多器官功能衰竭而致病人死亡。最近研究发现促红细胞生成素(EPO)是一种多功能

7、营养因子及保护因子，可减轻脊髓、心肌、肾脏等组织器官的IR损伤13。EPO对肢体骨骼肌IR损伤的影响，目前尚未见有报道。通过本项研究，探讨重组人促红细胞生成素（rHuEPO）对肢体骨骼肌IR损伤的影响，为临床应用rHuEPO治疗肢体骨骼肌IR损伤提供一定的实验依据。1  材料和方法11  动物分组及处理雄性Wistar大鼠40只，体重(250±20)g(山东大学医学院动物实验中心提供)，随机均分为4组：假手术组(组)，IR组(组)，IR+生理盐水组(组)，IR+rHuEPO组(组)。动物模型制作：参照文献4方法制成。1戊巴比妥钠40 mgkg腹腔麻醉，沿左侧股鞘走

8、行切开皮肤，在8倍手术显微镜下分离股动静脉，用无创性血管夹夹闭股动脉，股鞘下用张力带环扎左侧肢体以阻断侧支循环4 h。于再灌注前5 min，组尾静脉注入650lkg生理盐水，组尾静脉注入4 000IUkg rHuEPO(日本麒麟啤酒株式会社制造，国药准字S20010076)。、组于再灌注4 h，心脏采血并取左后肢腓肠肌。组仅切开暴露股血管，采血、取材，方法同上。12  检测指标及方法硫代巴比妥酸法测定血浆中丙二醛(MDA)含量，全自动生化分析仪测定血浆中肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)。骨骼肌组织匀浆、用MPO测试盒(南京建成生物工程研究所)测定髓过氧化酶(MPO)的活性

9、。取腓肠肌200 mg立即测其湿重，然后于80 恒温干燥箱中干燥48 h，再测干重，最后计算湿重干重比(Wetdry)。13  统计学分析数据结果用x-±s表示，行方差分析，均数间差别比较用LSD检验。2  结  果21  血浆标本测定项目的变化缺血再灌注组恢复血流灌注4 h后，组MDA、CPK、和LDH的含量与组相比显著增高(P001)。以上3项指标组与组相比差异无显著意义(P005)。以上3项指标组与组相比降低，差异显著(P001)。结果见表1。表1  各组血浆MDA、CPK、LDH的变化(略)注：*组，组，组分别和组比较P001；组和组比较P00122  骨骼肌标本测定项目的变化缺血再灌注