五味子糖浆中防腐剂的防腐效力测定

1、五味子糖浆中防腐剂的防腐效力测定吴 潇 (广西桂林食品药品检验所, 桂林 541002)摘要:目的 测定五味子糖浆中防腐剂对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌, 白色念珠菌和黑曲霉的抑菌作用。方法 将5种微生物接种在五味子糖浆中,经不同时间，用微生物限度检查测定其防腐效力。结果 对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌, 白色念珠菌有较强的抑菌作用. 结论 五味子糖浆中防腐剂的防腐效力符合美国药典标准。关键词: 五味子糖浆; 防腐剂; 防腐效力Test on the Antiseptic Effects of Preservative in Wuweizi syrup.Wu xiao（

2、Guangxi Zhuangzu Autonomous Region Guilin Institute For Drug Control，Guilin 541002. ）Verify the anti sep sis result of different anti sep tic to a few in common use liquid products,ABSTRACT Objective The antiseptic effects of preservatives in Wu weizi syrup on Escherichia coli ,staphylococcus aureus

3、 , pseudomonas aeruginosa , Candida albicans and aspergillus niger were tested. MethodsInoculate 5 kinds of microorganisms in Wu weizi syrup, the ability of preservation from decay was test by microbial limit in different times. Result That has stronger inhibition effect for Escherichia coli , staph

4、ylococcus aureus , pseudomonas aeruginosa , Candida albicans Conclusions The antiseptic effects of preservatives in Wuweizi syrup met requirement in the USP version.KEY WORDS Wuweizi syrup；Preservative；Antiseptic effects.为了控制药品质量，在一些制剂中加入一定量的防腐剂是常用的方法之一, 中国药典2005年版对糖浆剂中防腐剂山梨酸的用量规定不得超过0.3%,山梨酸钾的杀菌抑菌性

5、能与山梨酸相同,许多糖浆剂中用山梨酸钾, 其用量按山梨酸计,为了考察在这一浓度下是否有防腐效力，笔者参考文献1，对五味子糖浆中的防腐剂山梨酸钾进行了防腐效力测定，现介绍如下:1、实验材料营养琼脂培养基，玫瑰红钠琼脂培养基，营养肉汤培养基，改良马丁培养基，改良马丁琼脂培养基（培养基均为北京三药科技有限公司生产）；铜绿假单胞杆菌 CMCC (B) 10104 ，金黄色葡萄球菌CMCC(B)26 003，大肠埃希菌CMCC(B)44 102，白色念珠菌CMCC(F)98 001，黑曲霉菌CMCC(F)98 003（菌种均为中国医学微生物菌种保藏管理中心提供）；五味子糖浆（批号：070401、0704

6、02、070501，生产单位为桂林裕民药业）。 2、实验方法2.1菌液的制备2 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物接种至营养肉汤培养基，经37培养18-24小时，备用。取白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基，经25 培养2448小时，备用。取经25 培养57天的黑曲霉菌改良马丁琼脂斜面培养物，用无菌0.9氯化钠溶液洗下霉菌孢子，备用。2.2 菌液浓度的测定分别取上述菌液适量，用无菌0.9氯化钠溶液按十倍系列稀释到适宜的稀释度, 取稀释液1ml加入平皿中，平行制备两个平皿，立即倾注45约15ml相应的琼脂培养基，待凝固后，细菌置3035培养2448h，真菌置2328培养

7、4872h，逐日点计结果。按测定的菌数结果计算出各菌液的浓度。2.3 防腐效力测定方法及结果 取20ml五味子糖浆5份, 分别加入上述已备妥的菌悬液各适量 (接种菌液的体积不超过供试液体积的1%,使相加后的最终含菌浓度为10-6 cfu / ml)，作为供试液，在2025 避光密闭保存。分别经0、6、24、48 h及7、14、28d等规定时间，按2.2项方法测定各供试液的活菌浓度，结果见表1。表1 接种不同时间段各菌存活浓度试验菌样品批号活菌计数（cfu/ ml）0h6h24h48h7d14d28d大肠埃希菌07040121×1034×10/07040227×10

8、37×10/07050141×1039×10/金黄色葡萄球菌070401107×10427×10338×10242/07040276×10425×10350×10258/07050188×10423×10334×10266/铜绿假单胞菌07040118×10370×1028/07040219×10379×1022/07050121×10367×1026/白色念珠菌07040116×10444×10

9、3200/07040216×10461×103260/07050117×10441×103140/黑曲霉菌07040111×10482×10355×10338×103410220/07040211×10473×10360×10337×103670340/07050112×10487×10370×10339×103530400/注：“/”表示未检出。由表1可知，供试品保存7天时，大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌已未检出；保存14天

10、时，黑曲霉菌虽能检出，数量已大大降低，28天时已未检出。3 讨论3.1 因目前我国药典未收载防腐剂效力测定法，亦无判断标准，本文参照美国药典对实验结果作判断，即在下列情况供试液中的防腐剂是有效的：在14d，存活细菌浓度减少到不多于最初活菌浓度的0.1%；在14d，活霉菌及酵母浓度保持或低于最初活霉菌及酵母浓度；在28d检查周期内的其余时间，每一种供试液的微生物浓度仍保持或低于指定水平。由上述测定结果可知，五味子糖浆中的防腐剂山梨酸钾在处方中的浓度下是有防腐效力的。3.2 山梨酸钾主要在酸性溶液中形成分子态的山梨酸才能进入细胞而起抑菌作用,pH值低于4时, 山梨酸抑菌活性高,当pH值高于6时,

11、抑菌活性低3。五味子糖浆pH值为5左右，理论上山梨酸钾在其中亦是有效的。笔者根据中国药典2005年版对五味子糖浆建立微生物限度检查法时，直接取原液为供试液，5种试验菌用常规法即可达90%以上，因此在本实验中所采用的测定供试液的活菌浓度方法（常规法）是可行的，也说明使山梨酸钾抑菌活性可忽略不计，其原因主要有两个：一是所用培养基pH值为7，山梨酸钾抑菌活性低；二是山梨酸钾在培养基中的浓度已非常低，不足以抑菌。3.3 本实验结果表明，五味子糖浆如污染了以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及白色念珠菌为代表的几类微生物，存放48h后，已检测不出；如污染了以黑曲霉为代表的霉菌，存放28天后，也检测不出。这样的检测结果虽然是样品符合规定，但并不能真实地反