生物化学考前辅导班ppt课件

1、生命科学系生命科学系杨卫民杨卫民content一、各类学校题型与分值一、各类学校题型与分值卷 面 分 析填空：填空：2020 30 30空，空， 10 10 15 15分；分；选择：选择：1010 15 15题，题， 10 101515分；分；名词：名词：5 51010个，个， 10 102020分分简答题：简答题：5 5 8 8个，个，20204040分；分； 计算：计算：1 1 2 2题，题， 10 10 15 15分；分；问答题：问答题： 40 40 50 50分；分；时机题比时机题比例很低！例很低！content二、反复调查的知识点二、反复调查的知识点样 卷 分 析酶活计算酶活计算DN

2、ADNA复制、复制、RNARNA转录、蛋白质的生物合成转录、蛋白质的生物合成生物氧化生物氧化代谢调理：酶活、酶量支配子；激素代谢调理：酶活、酶量支配子；激素糖、脂、蛋白、核酸代谢糖、脂、蛋白、核酸代谢名词解释：化学浸透学说 是目前最有压服力的解释氧化磷酸化作用机理的是目前最有压服力的解释氧化磷酸化作用机理的学说，电子传送释放出的自在能驱动学说，电子传送释放出的自在能驱动H H从线粒体从线粒体基质跨过内膜进入到膜间隙膜外基质跨过内膜进入到膜间隙膜外，从而构成，从而构成跨线粒体内膜外高内低的跨线粒体内膜外高内低的H H电化学梯度。当电化学梯度。当H H经过经过FOF1-ATPFOF1-ATP合酶回

3、流进入线粒体基质时生成合酶回流进入线粒体基质时生成ATPATP2.2.化学浸透学说化学浸透学说 关于光合磷酸化的机理有多种学说，如中间产物学说、变关于光合磷酸化的机理有多种学说，如中间产物学说、变构学说、化学浸透学说等，其中被广泛接受的是化学浸透构学说、化学浸透学说等，其中被广泛接受的是化学浸透学说。学说。 化学浸透学说化学浸透学说(chemiosmotic theory)(chemiosmotic theory)由英国的米切尔由英国的米切尔(Mitchell(Mitchell1961)1961)提出，该学说假设能量转换和偶联机构提出，该学说假设能量转换和偶联机构具有以下特点：具有以下特点：

4、由磷脂和蛋白多肽构成的膜对离子和质子的透过具有选由磷脂和蛋白多肽构成的膜对离子和质子的透过具有选择性择性 具有氧化复原电位的电子传送体不匀称地嵌合在膜具有氧化复原电位的电子传送体不匀称地嵌合在膜 膜上有偶联电子传送的质子转移系统膜上有偶联电子传送的质子转移系统 膜上有转移质子的膜上有转移质子的ATPATP酶酶 在解释光合磷酸化机理时，该学说强调：光合电子传送链在解释光合磷酸化机理时，该学说强调：光合电子传送链的电子传送会伴随膜内外两侧产生质子动力的电子传送会伴随膜内外两侧产生质子动力(proton (proton motive force,pmf)motive force,pmf)，并由质子动

5、力推进的合成。许，并由质子动力推进的合成。许多实验都证明了这一学说的正确性。多实验都证明了这一学说的正确性。问答：以原核生物为例，论述蛋白质的生物合成过程。10 答：蛋白质的合成亦称翻译，可分为四个阶段：答：蛋白质的合成亦称翻译，可分为四个阶段： 1. 氨基酸的活化氨基酸的活化氨酰氨酰tRNA2 2. 大肠杆菌中肽链合成的起始大肠杆菌中肽链合成的起始 3 mRNA上的上的SD序列可与小亚基上序列可与小亚基上16SrRNA的的3进展碱基进展碱基配对，在起始因子的参与下先构成配对，在起始因子的参与下先构成30S起始复合物，再构起始复合物，再构成成70S起始复合物起始复合物70S-mRNA-fMet

6、tRNAfMet。 3. 多肽链的延伸多肽链的延伸3 在多肽链上每添加一个氨基酸都需求经过进位，转肽和在多肽链上每添加一个氨基酸都需求经过进位，转肽和移位三个步骤。反复进位、转肽、移位，肽链沿移位三个步骤。反复进位、转肽、移位，肽链沿NC方方向延伸。向延伸。 4. 翻译的终止及肽链的释放翻译的终止及肽链的释放 2 锦上添花：新生肽链的折叠与后加工锦上添花：新生肽链的折叠与后加工氨氨基基酸酸的的活活化化EEAAEAAtRNAAAEtRNAAAEtRNAAA氨基酸氨基酸氨酰腺苷酸氨酰腺苷酸第一步第一步第二步第二步氨氨基基酸酸的的活活化化3-氨酰氨酰-tRNACHO-HN-CH-COO-tRNACH

7、O-HN-CH-COO-tRNA CH2 CH2 CH2 CH2 S S COO- COO- +H2N-CH-COO-tRNA +H2N-CH-COO-tRNA CH2 CH2 CH2 CH2 S S COO- COO-Met-tRNAiMetfMet-tRNAtMet转甲酰酶转甲酰酶 a、专注性： 对氨基酸有极高的专注性，每种氨基酸都有专注的酶，只作用于L-氨基酸，不作用于D-氨基酸。 对tRNA 具有极高专注性。 b、校正作用：氨酰- tRNA合成酶的水解 部位可以水解错误活化的氨基酸。 原核生物多肽链的合成分为三个阶段：肽链合成的起始、肽链的延伸、肽链合成的终止和释放。1、肽链合成的起始

8、2、肽链的延伸3、肽链合成的终止及释放30S亚基亚基 mRNA IF3- IF1复合物复合物30S mRNA GTP- fMet tRNA- IF2- IF1复合物复合物70S起始复合物起始复合物 mRNA +30S亚基亚基-IF3IF-3IF2GTPIF3 IF2 IF1IF2-GTP-fMet-tRNAIF350S50S亚基亚基IF2+ IF1+GDP+PiIF-1IF170S起始起始复合物复合物某些原核生物某些原核生物mRNA中蛋白质合成起始区的序列中蛋白质合成起始区的序列肽链的延伸1 1释放因子释放因子RF1RF1或或RF2RF2进入核糖体进入核糖体A A位。位。 2 2多肽链的释放多

9、肽链的释放3 370S70S核糖体解离核糖体解离tRNARFRF肽键的构成肽键的构成TuTs循环循环TsTs-GDP多多核糖体与核糖体循环多多核糖体与核糖体循环合成终了合成终了的肽链的肽链多核糖体多核糖体3mRNA延伸中的肽链延伸中的肽链5核糖体循环核糖体循环多细胞程度多细胞程度分子程度分子程度细胞程度细胞程度神经系统调理神经系统调理激素调理激素调理酶调理酶调理蛋蛋白白质质脂脂水水糖糖核酸核酸无机盐等无机盐等主要知识点回想前前 言言 酶和辅酶酶和辅酶 生物氧化生物氧化 糖化学及糖代谢糖化学及糖代谢 脂化学及脂代谢、生物膜脂化学及脂代谢、生物膜 核酸及核酸代谢核酸及核酸代谢 蛋白质及蛋白质代谢蛋

10、白质及蛋白质代谢 物质代谢调理及激素的作用机制物质代谢调理及激素的作用机制主要知识点回想目目 录录主要知识点回想一、酶与辅酶一、酶与辅酶酶的本质、催化特点、分类酶的本质、催化特点、分类 核酶、抗体酶、固定化酶、别构酶核酶、抗体酶、固定化酶、别构酶酶的组成、活性中心概念酶的组成、活性中心概念酶作用专注性假说酶作用专注性假说诱导契合学说诱导契合学说酶反响动力学酶反响动力学 米氏方程、转换数米氏方程、转换数Kcat、酶活、酶活 VmaxS V= Ks + S 抗体酶抗体酶80年代后期出现的，本年代后期出现的，本质是免疫球蛋白。在易变区被质是免疫球蛋白。在易变区被赋予了酶催化性。赋予了酶催化性。核酶是

11、非蛋白酶。它是一类特殊核酶是非蛋白酶。它是一类特殊的的RNA。可以催化。可以催化RNA分子中的分子中的磷酸酯键的水解及其逆反响。磷酸酯键的水解及其逆反响。当酶被底物饱和时，每一催化中当酶被底物饱和时，每一催化中心在单位时间内所能转换底物分心在单位时间内所能转换底物分子的数量，即每摩尔酶活性中心子的数量，即每摩尔酶活性中心在单位时间内转换底物的摩尔数在单位时间内转换底物的摩尔数/S 。 分子活性分子活性寡聚蛋白多个亚基寡聚蛋白多个亚基1IU：在最适条件下，每：在最适条件下，每分钟内催化分钟内催化1mol产物产物生成所需的酶量。生成所需的酶量。比活性比活性U/mg蛋白质蛋白质酶活力计算题 10ml

12、10ml唾液，稀释唾液，稀释2020倍，取倍，取1ml1ml测定淀粉酶活力，测测定淀粉酶活力，测知每知每5min5min水解淀粉产生水解淀粉产生2.5g2.5g复原糖复原糖, ,测定其稀释液测定其稀释液中蛋白质含量为中蛋白质含量为1mg/ml,1mg/ml,计算唾液中淀粉酶的总活计算唾液中淀粉酶的总活力，比活力，转换数力，比活力，转换数(S-1 )(S-1 )。 酶活定义：在最适条件下每分钟水解淀粉生成酶活定义：在最适条件下每分钟水解淀粉生成1g1g葡葡萄糖的酶量称为萄糖的酶量称为1 1个活力单位。个活力单位。 葡萄糖分子量葡萄糖分子量180,180,淀粉酶分子量淀粉酶分子量500005000

13、0。主要知识点回想一、酶与辅酶一、酶与辅酶酶的作用机制酶的作用机制 了解酸碱催化、共价催化等了解酸碱催化、共价催化等P391酶的抑制造用酶的抑制造用 三种可逆抑制剂三种可逆抑制剂影响酶反响的要素影响酶反响的要素 温度、温度、pH、激活剂、激活剂高级高级构造构造活性活性中心中心解离解离EDTA半胱氨酸半胱氨酸金属离子金属离子酶促反响动力学酶促反响动力学 酶促反响动力学酶促反响动力学(kinetics of enzyme-(kinetics of enzyme-catalyzed reactions)catalyzed reactions)是研讨酶促反响速度及是研讨酶促反响速度及其影响要素的科学。

14、其影响要素的科学。 这些要素主要包括酶的浓度、底物的浓度、这些要素主要包括酶的浓度、底物的浓度、pHpH、温度、抑制剂和激活剂等。、温度、抑制剂和激活剂等。 留意：速度指反响的初速度留意：速度指反响的初速度V0 V0 ；研讨某一要；研讨某一要素对酶促反响速度的影响时，应该维持反响中素对酶促反响速度的影响时，应该维持反响中其它要素不变。其它要素不变。 1 1. . 米氏方程米氏方程V=Vmax SKm + SnKm Km 即为米氏常数，即为米氏常数，nVmaxVmax为最大反响速度为最大反响速度n当反响速度等于最大速度一当反响速度等于最大速度一半时半时, ,即即V =1/2Vmax,Km =S

15、V =1/2Vmax,Km =S n上式表示上式表示, ,米氏常数是反响米氏常数是反响速度为最大值的一半时的底速度为最大值的一半时的底物浓度。物浓度。n因此因此, ,米氏常数的单位为米氏常数的单位为mol/Lmol/L。nKmKm值小，值小，1/Km1/Km大，亲和力大。大，亲和力大。底物浓度对酶促反响速度的影响底物浓度对酶促反响速度的影响1/V-1/Km 0 1/S斜率斜率= Km/ Vmax1/Vmax双倒数作图法双倒数作图法 VmaxS V= Ks + S 酶的抑制 (机制)IISSSI II II IIISCompetitiveNon-competitiveUncompetitiveE

16、E另一结合区抑制剂底物图解抑制机理及說明I 只与自在的 E 結合，会与 S 竞争；S可抑制 I 的抑制。I 可与自在的 E 或 ES 結合， S不能抑制 I 的抑制。I 只能与 ES 結合， S反而有利 I 的抑制。E + S ES E + P + IEI E + S ES E + P + + I I EI + S EIS E + S ES E + P + I EIS EISXVmax 不变；Km 变大Vmax 变小；Km 不变Vmax 及 Km 均变小酶的活性部位酶的活性部位 与酶的活性直接相关的区域为酶的活性与酶的活性直接相关的区域为酶的活性中心。是酶与底物结合并发扬其催化作中心。是酶与底

17、物结合并发扬其催化作用的部位。用的部位。 结合酶的辅助因子是活性中心的重要组结合酶的辅助因子是活性中心的重要组成部分。成部分。 活性中心的氨基酸残基在一级构造上能活性中心的氨基酸残基在一级构造上能够相距甚远，甚至位于不同肽链，经过够相距甚远，甚至位于不同肽链，经过折叠后而在空间构造上相互接近。折叠后而在空间构造上相互接近。酶活性的调理控制酶活性的调理控制一别构调理一别构调理经过酶构象的改动来调理酶活性的作经过酶构象的改动来调理酶活性的作用称为变构调理。大部分别构酶的用称为变构调理。大部分别构酶的动力学曲线不符合米氏方程。动力学曲线不符合米氏方程。给酶共价结合一个基团或者去掉一个基团，从而改动其

18、活给酶共价结合一个基团或者去掉一个基团，从而改动其活性的调理方式。常见磷酸化。性的调理方式。常见磷酸化。糖原磷酸化酶糖原磷酸化酶a 糖原磷酸化酶糖原磷酸化酶b二共价调理二共价调理Active relaxed formInactive tense form主要知识点回想一、酶与辅酶一、酶与辅酶酶的调理作用酶的调理作用 酶活调理：酶原激活、可逆的共价修饰、别构调理酶活调理：酶原激活、可逆的共价修饰、别构调理 酶量调理酶量调理转录程度进展转录程度进展辅酶辅酶 水溶性维生素的活性方式及功能水溶性维生素的活性方式及功能P434传递CO2羧化酶生物素生物素VH 癞皮病传递2H 脱氢酶NADCo、NADPC

19、o）尼克酸、酰胺Vpp恶性贫血转移H或R 变位酶VB12辅酶钴胺素VB12脂溢性皮炎转移氨基转氨酶磷酸吡哆醛吡哆醛VB6传 递 乙 酰基脱氢酶、硫激酶COA泛酸VB5口角炎传递2H脱氢酶FMN、FAD核黄素VB2脚气去掉CO2脱羧酶TPP硫胺素VB1 缺乏病作用酶辅酶结构V传递CO2羧化酶生物素生物素VH 癞皮病传递2H 脱氢酶NADCo、NADPCo）尼克酸、酰胺Vpp恶性贫血转移H或R 变位酶VB12辅酶钴胺素VB12脂溢性皮炎转移氨基转氨酶磷酸吡哆醛吡哆醛VB6传 递 乙 酰基脱氢酶、硫激酶COA泛酸VB5口角炎传递2H脱氢酶FMN、FAD核黄素VB2脚气去掉CO2脱羧酶TPP硫胺素VB

20、1 缺乏病作用酶辅酶结构V 核酶：具有催化活性的核酶：具有催化活性的RNA。非蛋白酶，。非蛋白酶，识别特定识别特定RNA片段，进展内切，具有内切片段，进展内切，具有内切，衔接，聚合等核酸酶功能。，衔接，聚合等核酸酶功能。 如：如： 原生动物四膜虫原生动物四膜虫26SRNA的内含子的内含子L19 RNA可自行催化可自行催化no protein。 核酸酶：即核酸水解酶，化学本质为蛋白核酸酶：即核酸水解酶，化学本质为蛋白质，催化核酸的水解。质，催化核酸的水解。核酶核酶ribozyme)ribozyme)和核酸酶和核酸酶主要知识点回想二、生物氧化氧化磷酸化二、生物氧化氧化磷酸化1 1、概念、特点、概念

21、、特点 P114 P1142 2、高能磷酸化合物类型、高能磷酸化合物类型磷氧键型化合物磷氧键型化合物 3- 3-磷酸甘油酸磷酸、乙酰磷酸、磷酸甘油酸磷酸、乙酰磷酸、 ATP ATP、磷酸烯醇式丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸、氮磷键型化合物氮磷键型化合物 磷酸肌酸、磷酸精氨酸磷酸肌酸、磷酸精氨酸硫酯键型化合物硫酯键型化合物 酰基辅酶酰基辅酶A A甲硫键型化合物甲硫键型化合物 S- S-腺苷甲硫氨酸腺苷甲硫氨酸RCOSCoACOO-CHNH3+CH2CH2S+H3CACH2CCH3CH3CHOHCONHCH2CH2CNHCH2CH2SHOOOOHPOOHHONNNH2NNOPOOOHPOOOHCH2核苷

22、酸衍生物核苷酸衍生物主要知识点回想3 3、脱氢酶的辅酶：、脱氢酶的辅酶： NAD+ NAD+、NADP+NADP+、FADFAD、FMNFMNOCH2OPOPOCH2OHOHOOO-O-N+CON H2OOHOH(OPO3H2)NNN H2NNOC H2O P O P O C H2O HO HOOO-O-N+C O N H2OO HO H (O P O3H2)NNN H2NNCH3CH3NCCNHNNOOCH2CHCHCHCH2OPOOHOHOHOOHOCH2OHOHNNNH2NNFMN FADNAD+NADP+核苷酸衍生物核苷酸衍生物主要知识点回想二、生物氧化氧化磷酸化二、生物氧化氧化磷酸化

23、4 4、电子传送链成员、陈列顺序、抑制剂、电子传送链成员、陈列顺序、抑制剂NADH-Q NADH-Q 复原酶复原酶琥珀酸琥珀酸-Q -Q 复原酶复原酶细胞色素复原酶细胞色素复原酶细胞色素氧化酶细胞色素氧化酶非蛋白电子载体非蛋白电子载体可溶性外周蛋白可溶性外周蛋白主要知识点回想二、生物氧化氧化磷酸化二、生物氧化氧化磷酸化5 5、氧化磷酸化作用机制化学浸透学说、氧化磷酸化作用机制化学浸透学说、P/OP/O、解偶联、解偶联剂剂DNPDNP作用机制作用机制6 6、氧化磷酸化的调控、氧化磷酸化的调控 能荷能荷7 7、底物程度磷酸化、底物程度磷酸化主要知识点回想三、糖化学及糖代谢三、糖化学及糖代谢1 1、

24、糖的概念、分类、糖的概念、分类2 2、重要的单糖及衍生物、重要的单糖及衍生物 单糖磷酸酯、糖苷单糖磷酸酯、糖苷0-0-糖苷键糖苷键、N-N-糖苷键、氨基糖糖苷键、氨基糖3 3、单糖的物理性质、单糖的物理性质 变旋景象变旋景象5 5、常见二糖、常见二糖 单糖单位、糖苷键类型单糖单位、糖苷键类型 复原糖鉴定复原糖鉴定4 4、单糖的化学性质、单糖的化学性质 成脎、成苷、颜色反响成脎、成苷、颜色反响糖原合成糖原合成糖代谢糖代谢糖异生糖异生主要知识点回想TCA循环循环丙酮酸氧化脱羧丙酮酸氧化脱羧糖原分解糖原分解激酶：可以在激酶：可以在ATP和任何一种底物之间起催化作用，转移磷酸基团的一类酶。和任何一种底

25、物之间起催化作用，转移磷酸基团的一类酶。磷酸酶：水解磷酸基团的酶。磷酸酶：水解磷酸基团的酶。HMS途径途径生理意义生理意义肝脏中肝脏中6-P-G磷酸酶、肌肉中磷酸酶、肌肉中Cori循环循环6-P-G脱氢酶脱氢酶6-P-GNADPH+H+，磷酸戊，磷酸戊糖糖异构化异构化基团转移基团转移供能供能糖原合酶、糖原分糖原合酶、糖原分支酶、支酶、UDP-G焦磷酸焦磷酸化酶化酶糖原磷酸化酶、糖原转移糖原磷酸化酶、糖原转移/脱支脱支酶、磷酸葡萄糖变位酶酶、磷酸葡萄糖变位酶有氧有氧EMP厌氧厌氧乳酸发酵乳酸发酵乙醇发酵乙醇发酵丙酮酸脱氢酶系丙酮酸脱氢酶系/TPP3NADH+H+、FADH2 、 GTPNADH+

26、H+2ATP糖酵解糖酵解6-磷酸葡萄糖葡萄糖果糖6-磷酸果糖1，6-二磷酸果糖3-磷酸甘油醛磷酸二羟丙酮糖原1-磷酸葡萄糖ATPATP第一阶段第一阶段第二阶段第二阶段耗能耗能3-磷酸甘油酸磷酸3-磷酸甘油酸2-磷酸甘油酸磷酸烯醇式丙酮酸丙酮酸ATPATP产能产能NADH+H+酶促化学修饰对酶活性的调理酶促化学修饰对酶活性的调理 酶酶化学修饰类型化学修饰类型酶活性改变酶活性改变糖原磷酸化酶糖原磷酸化酶磷酸化酶磷酸化酶b激酶激酶糖原合成酶糖原合成酶丙酮酸脱羧酶丙酮酸脱羧酶磷酸果糖激酶磷酸果糖激酶丙酮酸脱氢酶丙酮酸脱氢酶HMG-CoA还原酶还原酶HMG-CoA还原酶激酶还原酶激酶乙酰乙酰CoA羧化酶

27、羧化酶脂肪细胞甘油三脂脂肪酶脂肪细胞甘油三脂脂肪酶黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化磷酸化磷酸化/脱磷酸化脱磷酸化-SH/-S-S-激活激活/抑制抑制激活激活/抑制抑制抑制抑制/激活激活抑制抑制/激活激活抑制抑制/激活激活抑制抑制/激活激活抑制抑制/激活激活激活激活/抑制抑制抑制抑制/激活激活激活激活/抑制抑制脱氢酶脱氢酶/氧化酶氧化酶主

28、要知识点回想四、脂化学生物膜及脂代谢四、脂化学生物膜及脂代谢1 1、脂质的概念、分类及作用储存、构造、活性脂质、脂质的概念、分类及作用储存、构造、活性脂质 脂质体脂质体 P81 P812 2、脂肪酸种类、理化性质、脂肪酸种类、理化性质 熔点与烷烃链长度成正比熔点与烷烃链长度成正比，与不饱和程度成反比、溶解度、成脂酰，与不饱和程度成反比、溶解度、成脂酰CoACoA、 乳化作用乳化作用3 3、三酰甘油的理化性质、三酰甘油的理化性质 皂化、酸值、碘值皂化、酸值、碘值7 7、脂蛋白构造特点及功能、脂蛋白构造特点及功能5 5、萜、萜VAVA、VDVD、VEVE、VKVK，异戊二烯和类固醇类固醇，异戊二烯

29、和类固醇类固醇激素，环戊烷多氢菲激素，环戊烷多氢菲6 6、胆固醇、胆汁酸、胆固醇、胆汁酸4 4、磷脂、磷脂 甘油磷脂、鞘磷脂母体化合物构造式甘油磷脂、鞘磷脂母体化合物构造式 典型化合物典型化合物: :脑磷脂、卵磷脂的构造组成脑磷脂、卵磷脂的构造组成？他汀类药物他汀类药物将食物中的将食物中的TG从小肠转运到肝脏从小肠转运到肝脏转运胆固醇到转运胆固醇到肝外组织细胞肝外组织细胞转运内源性转运内源性TG到到脂肪及肌肉组织脂肪及肌肉组织将胆固醇从周围将胆固醇从周围组织转运到肝脏组织转运到肝脏主要知识点回想四、生物膜四、生物膜1 1、构造特点流体镶嵌模型、膜脂组成、构造特点流体镶嵌模型、膜脂组成影响磷脂流

30、影响磷脂流动性的要素：动性的要素：所含的所含的FA不饱和程度、不饱和程度、链长，胆固链长，胆固醇、鞘磷酯醇、鞘磷酯的含量，膜的含量，膜蛋白及温度，蛋白及温度，pH等等。等等。 主要特征：主要特征： 膜中的磷脂疏水尾相对，极性头朝外，根本构造是磷脂双分膜中的磷脂疏水尾相对，极性头朝外，根本构造是磷脂双分子层，有一定的流动性。子层，有一定的流动性。 蛋白质分子有的镶嵌在膜脂中，有的贯穿磷脂双层，膜蛋白质分子有的镶嵌在膜脂中，有的贯穿磷脂双层，膜PrPr可可侧向运动，围绕与膜平面垂直的轴旋转，但不能翻腾。侧向运动，围绕与膜平面垂直的轴旋转，但不能翻腾。 膜膜PrPr与膜脂，膜与膜脂，膜PrPr与膜与

31、膜PrPr等的相互作用限制了膜的流动性。等的相互作用限制了膜的流动性。 膜在化学组成及构造上的不对称性，保证了膜功能物质运膜在化学组成及构造上的不对称性，保证了膜功能物质运输，信息传送的方向性。输，信息传送的方向性。 糖类多以糖蛋白，糖脂的构成结合在细胞外表糖类多以糖蛋白，糖脂的构成结合在细胞外表天线，在天线，在接受信息与细胞识别上起重要作用。接受信息与细胞识别上起重要作用。 膜构造膜构造液态镶嵌模型液态镶嵌模型19721972，S.J.SingerS.J.Singer 液态镶嵌模型液晶态镶嵌模型液态镶嵌模型液晶态镶嵌模型膜是蛋白质在粘滞的膜是蛋白质在粘滞的流体状脂质双层中所构成的镶嵌物。流体

32、状脂质双层中所构成的镶嵌物。侧向分散侧向分散/ /挪动、翻转、全反挪动、翻转、全反式式偏转异构化运动、围绕与偏转异构化运动、围绕与膜平面垂直的轴摆动、旋转膜平面垂直的轴摆动、旋转主要知识点回想四、生物膜四、生物膜2 2、生物膜的主要功能、生物膜的主要功能 能量转换、物质运输、信息识别与传送能量转换、物质运输、信息识别与传送自动运输自动运输 Na+,K+-ATP Na+,K+-ATP酶泵酶泵 下下P47P47被动运输被动运输糖和氨基酸的运送糖和氨基酸的运送磷酸烯醇式丙酮磷酸烯醇式丙酮酸转磷酸化酶酸转磷酸化酶系统系统PTSPTS协同运输协同运输基团转运基团转运酮体的合成酮体的合成脂代谢脂代谢脂肪酸

33、的合成脂肪酸的合成主要知识点回想软脂肪酸的氧化软脂肪酸的氧化129ATP活化胞浆，转运肉碱脂活化胞浆，转运肉碱脂酰转移酶，酰转移酶，-氧化线粒体氧化线粒体甘油代谢甘油代谢 脂肪发动脂肪发动胆固醇的合成胆固醇的合成乙酰乙酰CoATCA羟甲基戊二酸单酰羟甲基戊二酸单酰CoAHMG- CoA酮体肝内生成，肝外酮体肝内生成，肝外利用硫解利用硫解/激酶激酶胆固醇代谢：胆汁酸、激素、胆固醇代谢：胆汁酸、激素、VD3储能储能胆盐乳化、脂蛋白运输胆盐乳化、脂蛋白运输乙酰乙酸、乙酰乙酸、-羟丁酸、羟丁酸、丙酮丙酮HMG-CoAHMG-CoA裂解酶裂解酶HMG-CoAHMG-CoA复原酶复原酶甘油三酯脂肪酶甘油三

34、酯脂肪酶柠檬酸柠檬酸- -丙酮酸穿越至胞浆丙酮酸穿越至胞浆乙酰辅酶乙酰辅酶A A羧化酶羧化酶3-磷酸甘油磷酸甘油磷酸二羟磷酸二羟丙酮丙酮3-磷酸甘油酸磷酸甘油酸EMP单位碳原子单位碳原子产能效率高产能效率高主要知识点回想五、核酸及核酸代谢五、核酸及核酸代谢1 1、核酸定义、核酸定义2 2、分类、分类 DNA RNA DNA RNA 紫外吸收紫外吸收一级构造一级构造二级构造二级构造 双螺旋双螺旋 tRNA mRNA rRNA tRNA mRNA rRNA PCR变性、复性、杂交增色、减色效应变性、复性、杂交增色、减色效应三级构造三级构造高级构造高级构造 蛋白复合物蛋白复合物3 3、分别、提纯、定

35、量、分别、提纯、定量 了解了解4 4、核苷酸序列测定、核苷酸序列测定 了解了解PCR聚合酶链式聚合酶链式 反响反响 即聚合酶链反响技术即聚合酶链反响技术(Polymerase Chain Reaction)(Polymerase Chain Reaction)，是，是8080年代中期开展起来的体外核酸扩增技术。年代中期开展起来的体外核酸扩增技术。 PCR PCR技术的根本原理：技术的根本原理：PCRPCR由变性由变性-退火退火-延伸三个根本反延伸三个根本反响步骤构成：模板响步骤构成：模板DNADNA的变性：加热至的变性：加热至9393左右，模板左右，模板DNADNA双双链解离，成为单链；单链链

36、解离，成为单链；单链DNADNA与引物的退火与引物的退火( (复性复性) )：温度降至：温度降至5555左右，特异性的引物与模板左右，特异性的引物与模板DNADNA单链的单链的3 3末端结合；引物末端结合；引物的延伸：的延伸：DNADNA模板模板-引物结合物在引物结合物在TaqDNATaqDNA聚合酶的作用下，以聚合酶的作用下，以dNTPdNTP为原料，合成一条新链；这种新链又可成为下次循环的模为原料，合成一条新链；这种新链又可成为下次循环的模板，反复变性板，反复变性-退火退火-延伸三过程，就可获得更多延伸三过程，就可获得更多DNADNA。每完成。每完成一个循环需一个循环需2 24 4分钟，分

37、钟， 2 23 3小时就能将目的基因扩增放大几百小时就能将目的基因扩增放大几百万倍。万倍。 PCR技术的开展与运用：技术的开展与运用：P596DNase I脚印实验脚印实验 蛋白质结合在蛋白质结合在DNA片段上，能维护结合部位不被片段上，能维护结合部位不被DNase破坏，破坏，DNA分子经酶切作用后遗留下该片段分子经酶切作用后遗留下该片段(亦称亦称“脚印脚印)，进而可以确定它的序列。，进而可以确定它的序列。在电泳凝胶的放射性自显影图片上，相应于蛋白质结合的部位没有放射性在电泳凝胶的放射性自显影图片上，相应于蛋白质结合的部位没有放射性标志条带。标志条带。 DNase I脚印实验的实验流程如下：待

38、检双链脚印实验的实验流程如下：待检双链DNA分子用分子用32P作末端标作末端标志，通常只标志一端；蛋白质与志，通常只标志一端；蛋白质与DNA混合，等两者结合后，参与适量的混合，等两者结合后，参与适量的DNase I，消化，消化DNA分子，控制酶的用量，使之到达每个分子，控制酶的用量，使之到达每个DNA分子只发生分子只发生一次磷酸二酯键断裂，并列设置未加蛋白质的对照；从一次磷酸二酯键断裂，并列设置未加蛋白质的对照；从DNA上除去蛋白上除去蛋白质，将变性的质，将变性的DNA加样在测序凝胶中作电泳和放射性自显影，与对照组相加样在测序凝胶中作电泳和放射性自显影，与对照组相比后解读出脚印部位的核苷酸序列

39、。比后解读出脚印部位的核苷酸序列。嘌呤元素来源嘌呤元素来源嘧啶元素来源嘧啶元素来源核酸代谢核酸代谢嘌呤核苷酸合成嘌呤核苷酸合成主要知识点回想碱基降解碱基降解核蛋白经胃酸、核酸酶、核苷酸核蛋白经胃酸、核酸酶、核苷酸酶、核苷磷酸化酶成磷酸戊糖和酶、核苷磷酸化酶成磷酸戊糖和碱基碱基嘧啶核苷酸合成嘧啶核苷酸合成NH3+CO2+H2O黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶 痛风痛风 别嘌呤醇别嘌呤醇嘧啶嘧啶嘌呤嘌呤 尿酸尿酸从头合成、从头合成、补救途径补救途径PRPP脱氧核糖核苷酸合成脱氧核糖核苷酸合成P399 图图33-11DNA复制、复制、RNA生物合成生物合成主要知识点回想5、DNA复制复制起始起始 - 延伸延

40、伸 - 终止终止结果结果:半保管半保管端粒、端粒酶端粒、端粒酶真核生物真核生物酶、辅助因子、全过程酶、辅助因子、全过程DNA聚合酶聚合酶III过程过程:半不延续半不延续冈崎片段冈崎片段复制叉挪动方向复制叉挪动方向单链结合蛋白单链结合蛋白RNA引物引物DNA衔接酶衔接酶DNA拓扑异构酶拓扑异构酶DNA解旋酶解旋酶引物酶引物酶引发体引发体DNA聚合酶聚合酶I复制叉复制叉主要知识点回想6、RNA生物合成生物合成起始起始 - 延伸延伸 - 终止终止转录泡转录泡识别部位识别部位 结合部位结合部位 RNA RNA转录开场转录开场+1+1 GTPGTP，ATP)ATP)酶、辅助因子、全过程酶、辅助因子、全过

41、程逆转录酶逆转录酶逆转录酶是一种多功能酶逆转录酶是一种多功能酶 以以RNARNA为模板合成互补的为模板合成互补的DNADNA链，构链，构成成RNARNADNADNA的杂合分子。的杂合分子。 具有具有Rnase HRnase H样的活力，水解样的活力，水解RNARNADNADNA的杂合分子中的的杂合分子中的RNARNA。 以新合成的单链以新合成的单链DNADNA为模板，合成互为模板，合成互补链，构成双链补链，构成双链DNADNA分子。分子。主要知识点回想6、RNA生物合成生物合成转录产物的加工转录产物的加工原核生物原核生物真核生物真核生物mRNAtRNArRNAmRNAtRNArRNA去除内含子

42、去除内含子加帽又加尾加帽又加尾甲基化甲基化3-CCA-OH甲基化甲基化修饰修饰剪接、甲基剪接、甲基化修饰化修饰多数不多数不用加工用加工7 7、原核细胞基因表达的模型、原核细胞基因表达的模型支配子学说支配子学说 主要知识点回想诱导支配子乳糖支配子诱导支配子乳糖支配子 分解代谢分解代谢 阻遏支配子色氨酸支配子阻遏支配子色氨酸支配子 合成代谢合成代谢 组成：启组成：启动子、支动子、支配基因、配基因、构造基因构造基因 葡萄糖效应葡萄糖效应降解物阻遏降解物阻遏衰减作用衰减作用组成酶组成酶诱导酶诱导酶cAMP受体蛋白受体蛋白CRP降解物基因活化蛋白降解物基因活化蛋白CAPOR+cAMP作用于启动子，作用于

43、启动子，促进转录促进转录葡萄糖分解代谢产物葡萄糖分解代谢产物抑制腺苷酸环化酶活抑制腺苷酸环化酶活性，性，cAMPcAMP减少，分解减少，分解代谢酶转录程度低。代谢酶转录程度低。启动子启动子支配基因支配基因构造基因构造基因启动基因，转录调控的控启动基因，转录调控的控制部位，制部位，RNA聚合酶的结聚合酶的结合部位，是基因转录的起合部位，是基因转录的起点。点。主要知识点回想原核细胞基因表达的模型原核细胞基因表达的模型支配子学说支配子学说 诱导支配子乳糖支配子诱导支配子乳糖支配子 分解代谢分解代谢 阻遏支配子色氨酸支配子阻遏支配子色氨酸支配子 合成代谢合成代谢 衰减作用衰减作用衰减子：一种位于构造基

44、因上游前导衰减子：一种位于构造基因上游前导区的终止子。区的终止子。转录能否进转录能否进展展转录能否继转录能否继续续主要知识点回想六、蛋白质及蛋白质降解、氨基酸分解六、蛋白质及蛋白质降解、氨基酸分解1 1、蛋白质的根本单位、蛋白质的根本单位AA -AA -氨基酸构造式氨基酸构造式酸碱化学酸碱化学AAoAAo、PIPI光学性质光学性质AA的分别的分别 分配层析分配层析 离子交换层析离子交换层析化学反响化学反响AAAA分类分类R R基极性特点基极性特点芳香族氨基酸芳香族氨基酸280nm280nm茚三酮显色、茚三酮显色、SangerSanger反响、反响、EdmanEdman反响反响主要知识点回想六、

45、蛋白质及蛋白质降解、氨基酸分解六、蛋白质及蛋白质降解、氨基酸分解2 2、蛋白质的四级构造、蛋白质的四级构造一级构造：一级构造：AAAA的陈列顺序的陈列顺序 肽键肽键 一级构造测定一级构造测定二级构造：借助氢键构成的规那么构造二级构造：借助氢键构成的规那么构造 四种四种三级构造：疏水作用三级构造：疏水作用 空间折叠空间折叠 分子伴侣分子伴侣 功能单功能单位位四级构造：疏水作用四级构造：疏水作用 亚基间相互作用亚基间相互作用 别构酶别构酶X X射线衍射法射线衍射法构造与功能的关系肌红蛋白、血红蛋白构造与功能的关系肌红蛋白、血红蛋白蛋白质的变性蛋白质的变性本质：蛋白质分子中的次级键被破坏，引起天然构

46、本质：蛋白质分子中的次级键被破坏，引起天然构象解体。象解体。景象：生物活性丧失，一些侧链基团暴露，溶解度景象：生物活性丧失，一些侧链基团暴露，溶解度降低构成沉淀，分子构造松散，易被蛋白水解酶分降低构成沉淀，分子构造松散，易被蛋白水解酶分解。解。变性剂：尿素、盐酸胍、变性剂：尿素、盐酸胍、SDS超二级构造基元或膜体：超二级构造基元或膜体：、 P220 P220 构造域：功能域，三级构造的部分折叠构造域：功能域，三级构造的部分折叠区，相对独立的严密球实体。区，相对独立的严密球实体。P222P222亚基：四级构造的蛋白质中每个球状蛋亚基：四级构造的蛋白质中每个球状蛋白质称为亚基。白质称为亚基。P24

47、2P242球状蛋白折叠层次球状蛋白折叠层次主要知识点回想六、蛋白质及蛋白质降解、氨基酸分解六、蛋白质及蛋白质降解、氨基酸分解3 3、蛋白质的分别、纯化、表征、蛋白质的分别、纯化、表征蛋白质的酸碱性质蛋白质的酸碱性质纯化方法纯化方法分子大小分子大小溶解度溶解度电荷电荷选择性吸附选择性吸附亲和层析亲和层析凝胶过滤凝胶过滤SDS-PAGE 等电点沉淀等电点沉淀盐溶、盐析盐溶、盐析离子交换离子交换IEFIEFPAGEPAGE疏水层析疏水层析蛋白质外蛋白质外表疏水性表疏水性差别差别生物学生物学亲和力亲和力了解了解P315表表7-7电泳纯电泳纯含量测定方法：凯氏定氮含量测定方法：凯氏定氮16%、双缩脲法肽

48、键、考马斯亮蓝法、双缩脲法肽键、考马斯亮蓝法主要知识点回想六、蛋白质降解、氨基酸分解六、蛋白质降解、氨基酸分解4 4、蛋白质的降解、蛋白质的降解内源性蛋白降解机制：溶酶体、泛肽标志内源性蛋白降解机制：溶酶体、泛肽标志外源性蛋白消化：外源性蛋白消化：胰蛋白酶：碱性氨基酸胰蛋白酶：碱性氨基酸糜蛋白酶：芳香族氨基酸糜蛋白酶：芳香族氨基酸胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶羧肽酶：羧基末端肽小肽羧肽酶：羧基末端肽小肽氨肽酶：氨基末端肽小肽氨肽酶：氨基末端肽小肽 外源性外源性AAAA吸收：吸收：依赖于依赖于Na+Na+的自动运输的自动运输- -谷氨酸酰基循环谷氨酸酰基循环GSHGSH主要知识点回想转氨基作用转氨基作

49、用氧化脱氨氧化脱氨L-谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶结合脱氨转氨酶与结合脱氨转氨酶与L谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶结合脱氨、腺嘌呤核苷酸循环结合脱氨结合脱氨、腺嘌呤核苷酸循环结合脱氨氨的运输：肌肉内葡萄糖氨的运输：肌肉内葡萄糖-丙氨酸循环丙氨酸循环谷氨酸脱氢酶、谷氨酰胺合成酶谷谷氨酸脱氢酶、谷氨酰胺合成酶谷氨酰胺氨酰胺关键酶：氨甲酰磷酸合成酶关键酶：氨甲酰磷酸合成酶与与TCA的联络：精氨琥珀酸的联络：精氨琥珀酸AA种类：瓜、精、鸟、天冬氨酸等种类：瓜、精、鸟、天冬氨酸等维生素作为辅酶的作用维生素作为辅酶的作用一碳单位一碳单位 FH4，S-腺苷甲硫氨酸腺苷甲硫氨酸5 5、AAAA的分解的分解蛋白质的生物合

50、成原核生物蛋白质的生物合成原核生物主要知识点回想 AA的活化与搬运氨基酰tRNA的合成 肽链合成的起始起始复合物的构成 四个阶段 70S-mRNA-fMet-tRNA 肽链的延伸包括进位,转肽,移位. 肽键的终止终止codon 信号肽信号肽构造及功能构造及功能RNA种类及作用种类及作用蛋白质蛋白质分子伴侣分子伴侣蛋白质的后加工一级、高级蛋白质的后加工一级、高级主要知识点回想七、物质代谢调理和激素的作用机制七、物质代谢调理和激素的作用机制1、P540图图39-1 四大物质代谢相互关系表示图四大物质代谢相互关系表示图 乙酰辅酶乙酰辅酶A的来源与去路的来源与去路2、P543图图39-5 主要产能营养物分解代谢的三个步骤主要产能营养物分解代谢的三个步骤主要知识点回想七、激素的作用机制七、激素的作用机制激素由细胞分泌出来，由体液运往各靶器官和靶细胞激素由细胞分泌出来，由体液运往各靶器官和靶细胞起作用。起作用。高等动物的激素分三类；含氮类激素、类固醇激素、高等动物的激素分三类；含氮类激素、类固醇激素、脂肪酸衍生物激素。脂肪酸衍生物激素。作用机制：作用机制： 含氮类激素的作用机制含氮类激素的作用机制第二信使学说第二信使学说 类固醇激素的作用机制类固醇激素的作用机制调理基因表达调理基因表达一、膜受体一、膜受体cAMPcAMP作用途径