武汉大学天然产物的提取板蓝根

1、天然产物的提取 板蓝根武汉大学专业：应用化学学号：200622030135研究内容v板蓝根简介v化学成分及药理作用v药用成分的提取方法及流程v临床应用及不良反应v市场效用及研究进展 1.板蓝根 板蓝根为十字花科植物菘蓝Isatisindigotica Fort.、欧洲菘蓝Itinctoria L.、爵床科植物马蓝Bap hicacanthus cusia(Nees) Brem.的根茎及根。 别名大蓝根、大青根、靛青根、蓝靛根、靛根 。 主产于河北、江苏等省。 1.1 板蓝根形态1.2 板蓝根栽培技术1.选地与整地 板蓝根系深根植物, 宜选土层深厚, 疏松肥沃, 排水良好, 远离城市污染的土壤种

2、植。前茬作物收获后及时深耕, 耕前每公顷施腐熟农家肥7. 5 10. 5 万kg, 均匀撒入地内, 翻耕深度2535cm , 耕后耙细、整平、作畦。雨水多的地方作高畦, 雨水少的地方作平畦。 2.播种 种子成熟后采收、晒干,存放于通风干燥处备用。春播在5 月上旬,播种量每公顷30kg ,播深23cm ,覆土1cm ,稍加镇压,保持土壤湿润,当气温在1820 时,经7d 左右即可出苗。3.田间管理 中耕除草、间苗、追肥、病虫防治2.1 化学成分v1. 吲哚类化合物v2. 喹唑酮类化合物v4. 芥子苷类化合物 v3. 喹啉酮类化合物v5. 含硫类化合物v6. 有机酸类化合物v7. 氨基酸类化合物v

3、8. 甾醇类化合物v9. 其他2.2 药理作用v1. 抗菌作用v2. 抗病毒作用(1)对一般病毒的作用(2) 对肾综合征出血一热病毒(HFRSV)的作用(3) 对人巨细胞病毒(HCMV)的作用(4) 对肝炎病毒(HBV)的作用v3. 对内毒素的作用v4. 对免疫系统的作用v5. 抗癌作用v6. 活血作用v7. 药代动力学的研究3.药用成分的提取流程及方法3.1 板蓝根药用的主要有效成分 目前认为具有治疗作用的活性成分主要存在于靛蓝、靛玉红和多糖中。v1.靛玉红 别名炮弹树碱，为红色针状品体，熔点356358摄氏度，可升华，稍溶于乙醇和酷酸，不溶于水，分子式及分子量分别为：C16H10N2O2；

4、262. 26靛玉红的药理作用: 1.抗癌作用:对小鼠白血病L7212的抑制率较高，对小鼠肉瘤也有一定抑制作用，对小鼠Lewis肺癌也有明显抑制作用。 2.临床治疗慢性粒细胞性白血病总有效率达90%以上，疗效快，副作用小。NHONOHv2.靛蓝 蓝色针状结晶，有升华性，易溶于吡啶，可溶于乙酸乙酯。分子式C16H10O2N2。靛蓝的药理作用主要表现为对肝的保护作用，据报道，靛蓝混悬液对四氯化碳引起的小鼠肝损伤有一定的保护作用。 NNHHOOv3.多糖 多糖一般为无定型粉末，无甜味，无还原性，多数具有旋光性。难溶于水或溶于热水成胶体，不溶于亲脂性有机溶剂。多糖具有多种生物活性，是理想的免疫增强剂，

5、它能促进T细胞、B细胞、NK细胞等免疫细胞的功能，还能促进白介素、干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子的产生。3.2 有关板蓝根有效成分研究工作v（1）赵萍萍等采用双波长薄层扫描定量法测定靛玉红的含量;测定标准偏差为2%，加样回收率达95%以上 .v（2）梁文法等使用薄层扫描法测定了板蓝根中靛蓝和靛玉红的含量，直接扫描测定，加样平均回收率为102.1%;v（3）许祯灿等应用薄层扫描法测定同一产地不同采收期的板蓝根中靛玉红与靛蓝含量，结果表明:12月份靛玉红含量最高，11月份靛蓝含量最高;v（4）崔熙等报道了板蓝根中游离氨基酸的含量，故认为精氨酸很可能是板监根中起药理作用的一个主要有效成分。3.3 有

6、效成分的提取分离及含量测定的研究现状3.3.1 多糖的提取分离及含量测定研究现状3.3.1.1 多糖的提取与分离1.提取水煮醇沉微波方法 2.分离纯化分步沉淀法钙、银及钡复盐形成法凝胶过滤法Sevag法另外还可用离子交换法，活性炭吸附等方法纯化和分离。3.多糖含量测定研究现状及测定方法（1）多糖的定性测试：甲醇法 将多糖样品配成1 mg/ml溶液，取0.1m1 0.5molNaOH，加入甲醇1ml，出现白色混浊现象，则判断有多糖。(以水作为对照)蒽酮法 将多糖样品配成1 mg/ml溶液，取0.1mo1，加入0.1 ml 0.5mol NaOH，再加入蒽酮试剂几滴，呈蓝色，则判断有多糖。(以水为

7、对照)薄层层析法 吸附剂为硅胶H薄层板。展开剂为乙酸乙酯-水-乙酸-甲酸。（2）多糖的定量测定3, 5-二硝基水杨酸(DNS )法 此法是根据糖的还原性进行的测定，其原理是利用3, 5-二硝基水杨酸与多糖水解产物共热后还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与反应液的颜色强度呈比例关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。苯酚-硫酸法 此种方法是将糖转变成糖醛衍生物进行测定，其原理是根据单糖、多糖和它们的衍生物与苯酚-硫酸试剂反应可生成橙黄色溶液，此溶液在490nm波长处有特征吸收。蒽酮-硫酸法 糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物，可与蒽酮试剂缩合产生颜色物质，反应后溶液呈亮绿色，于630

8、nm处有最大吸收，显色与多糖含量呈线性关系。3.3.2 靛蓝、靛玉红的提取分离及含量测定研究现状3.3.2.1 靛蓝、靛玉红的提取分离水煮，醇沉法：提出的靛蓝、靛玉红含量甚少； 渗漉法：用70%乙醇作渗漉溶媒，具有分离、提取效果好，无需加热，减少了药物水解和氧化的机会，工艺简单；根据实验室的具体条件，可采用回流法。3.3.2.2 靛蓝、靛玉红含量测定研究现状及测定方法氧化滴定法直接比色测定法薄层色谱法双波长分光光度法正交函数分光光度法导数光谱法柱色谱比色法反相高效液相色谱法等3.4板蓝根多糖的提取分离及含量测定3.5靛蓝、靛玉红的提取分离及含量测定 3.5.1 靛蓝、靛玉红的提取试验方法： 精

9、确称取四份各为60g的干燥板蓝根粗粉，分别加入不同浓度(90%、75%、60%、45%）的乙醇480ml，回流提取4hrs，过滤，将滤液减压浓缩至无醇味，用氯仿萃取，直至氯仿层透明。取氯仿层，减压回收氯仿，在60的恒温干燥箱中烘干、称重、粉碎，得靛蓝、靛玉红的混合物，以该提取物为指标，测定产率。3.5.2 靛蓝、靛玉红的分离利用靛蓝、靛玉红的溶解性将它们分开 将得到的靛蓝、靛玉红混合物粉末放置在50ml烧杯里，加入适量吡啶，充分振摇，使其溶解，然后过滤，将滤渣直接在60的恒温烘箱中烘干，得到靛玉红;将滤液减压回收溶剂，同样在60的恒温烘箱中烘干，得到靛蓝。4.临床应用及不良反应4.1临床应用呼吸系统疾病的应用消化系统疾病的应用皮肤及骨胳疾病的应用眼科疾病的应用病毒性心肌炎代谢性疾病的应用泌尿系统疾病的应用4.2 不良反应v皮肤过敏反应v过敏性休克v过敏致死亡v肾损害v多发性肉芽肿v溶血反应 此外,还有报道口服含有板蓝根的消炎片和中药煎剂出现上消化道出血。 5.市场效用及研究进展5.1 板蓝根走势分析2006 年的板蓝根生产不会有突破性发展 走势行情影响因素： 其一，禽流感疫情。 其二，排除禽流感因素，单就其需求和库存而言，市场供求关系应为供求偏紧状态。 其三，就种植者心态而言，种植面积不会发展到生产过剩的地步。5.2 展望v