章药物的杂质检查PPT学习教案

1、会计学14/19/20222影响药物的质量反映出生产或贮藏过程中存在的问题。对药物所含杂质进行检查既可保证药品质量和用药的安全、有效，同时也为生产、流通过程的质量保证和企业管理的考核提供依据。杂质的存在导致的问题：第1页/共68页4/19/20223概述 药物的纯度要求 杂质的来源和种类 杂质的限量检查一般杂质检查特殊杂质检查第2页/共68页4/19/20224第一节 概 述药物的纯度指药物的纯净程度杂质检查也称纯度检查一、药物的纯度要求一、药物的纯度要求1. 药物纯度药物纯度：是反映药品质量的一项重要指标。杂质超标的后果：外观性状物理常数药物的稳定性活性降低，毒副作用增加第3页/共68页4/

2、19/20225如：ASA中除了SA外，还存在乙酰水杨酸酐、乙酰水杨酰水杨酸等SA的衍生物，具有致敏作用。OCCH3C O COOOH3CCOOOCOOHCOOCOCH3OHCOOHOCOCH3COOHASA SA其它示例见教材P38阿司匹林第4页/共68页4/19/202262. 对药物纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来的，随着分离检测技术的提高，能进一步发现药物中存在的新杂质，从而加强对药品生产工艺过程的控制，不断提高药物的纯度要求对药物纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来的，随着分离检测技术的提高，能进一步发现药物中存在的新杂质，从而加强对药品生产工艺过程的控制，不断提高药物的纯度

3、要求，使之，使之不断改进不断改进，更加完善。，更加完善。如：盐酸罂粟碱的特殊杂质检查ChP 1985，目视比色法检查吗啡ChP 1990，改为：薄层色谱法检查有关物质。原因：薄层或红外发现，合成法生产的盐酸罂粟碱中除了吗啡，还有一未知物质。ChP 2010，又改为：HPLC法检查有关物质。第5页/共68页4/19/20227OCH3HClNCH3OONCH3OCH3HClOCH3HClONC2H5再如：盐酸哌替啶，即度冷丁()1948年收入BP，1970年经GC分离鉴定出两种无效杂质()和()，有时高达20%30%。产生原因：工艺条件控制不当ChP 2010：HPLC法检查有关物质。第6页/共

4、68页4/19/20228第7页/共68页4/19/20229质量标准中药物的检查项下包括：a 杂质检查b 有效性指与药物疗效有关的一些指标。如：氢氧化铝的制酸力，药用碳的吸着力等c 安全性异常毒性，热原，降压物质，无菌试验等d 药物制剂要求重量差异，崩解时限，含量均匀度等第8页/共68页4/19/202210第9页/共68页4/19/2022111 1杂质的杂质的来源来源：生产过程中引入生产过程中引入 贮藏过程中产生贮藏过程中产生2 2 依杂质来源依杂质来源分类分类：一般杂质：一般杂质 特殊杂质特殊杂质 工艺杂质，降解产物，反应物工艺杂质，降解产物，反应物 及试剂中混入的杂质等及试剂中混入的

5、杂质等 依杂质毒性依杂质毒性分类分类：信号杂质：信号杂质 毒性杂质毒性杂质 依杂质理化性质依杂质理化性质分类分类: :有机杂质有机杂质 无机杂质无机杂质 残留溶剂残留溶剂二、杂质的来源与种类二、杂质的来源与种类对于规定中的各种杂质检查项目，系指该药品在既定工艺进行生产和对于规定中的各种杂质检查项目，系指该药品在既定工艺进行生产和正常贮藏过程中可能含有或产生并控制的杂质正常贮藏过程中可能含有或产生并控制的杂质(如残留溶剂、有关物质如残留溶剂、有关物质等等)；改变生产工艺时需另考虑增修订有关项目。；改变生产工艺时需另考虑增修订有关项目。药典凡例第药典凡例第17条条第10页/共68页4/19/202

6、212原料、中间体、副产物、无效异构体或晶型、试剂、溶剂、制剂中新产生的杂质等A + B C D + E原料原料中间产物中间产物副产物副产物产品产品试剂试剂溶剂溶剂催化剂催化剂金属容器、管道、装置金属容器、管道、装置异构体多晶型异构体多晶型做做制剂时用的辅料，新产生的杂质等制剂时用的辅料，新产生的杂质等第11页/共68页4/19/202213+NNCH3OClCH3OH(CH2)6N4 HClClNCOCH3COCH2ClC6H12ClCH2COClClNHCH3COC2H5OHFe, HClCH3SO4-ONClCH3CH3C6H5(CH3)2SO4ONCl地西泮地西泮（安定）（安定）3-苯

7、苯-5-氯嗯呢氯嗯呢天然产物提取：天然产物提取： 结构相似、性质相近结构相似、性质相近教材教材P39：碳酸酐酶抑制药双氯非那胺：碳酸酐酶抑制药双氯非那胺检查：乙醇溶液的澄清度和颜色；氯化物；有关物质等检查：乙醇溶液的澄清度和颜色；氯化物；有关物质等检查：碱性溶液的澄清度；氯化物；有关物质等检查：碱性溶液的澄清度；氯化物；有关物质等合成过程中合成过程中产生的杂质：产生的杂质：第12页/共68页4/19/202214H2NCOCH2CH2N(C2H5)2O.HCl盐酸普鲁卡因注射液，高温灭菌盐酸普鲁卡因注射液，高温灭菌H2NCOCH2CH2N(C2H5)2OH2NCOHOHOCH2CH2N(C2H

8、5)2+对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸做做制剂时用的辅料，新产生的杂质等：制剂时用的辅料，新产生的杂质等：阿司匹林：水杨酸的检查阿司匹林：水杨酸的检查教材教材P39：肾上腺素注射液：肾上腺素注射液第13页/共68页4/19/202215无效、低效的异构体或晶型：无效、低效的异构体或晶型： 光学异构体（左旋体，右旋体）两种都有治疗作用，但大小不同： 肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体的12倍； 盐酸普萘洛尔左旋异构体的- 受体阻断作用比右旋体大60倍几何异构体（顺式体，反式体）维生素A全反式的生物活性最高一种有治疗作用，另一种主要产生副作用：氯胺酮，右旋副作用(中枢兴奋)；两种有不同的药理作用：右旋

9、丙氧吩镇痛，左旋止咳；两种都有治疗作用，主要副作用由其中一种产生：反应停，左旋及其代谢物毒性；第14页/共68页4/19/202216无效、低效的异构体或晶型：无效、低效的异构体或晶型： 多晶型(晶型不同，理化常数，溶解度，稳定性，体内吸收和疗效也不同）无味氯霉素有多晶现象，B晶型易被酯酶水解而吸收，为有效晶型，而A晶型则不易被酯酶水解，活性很低生产过程中难以除净；贮存过程中受光、热、湿等影响控制药物中无效、低效及具有毒性的异构体或晶型，在药物纯控制药物中无效、低效及具有毒性的异构体或晶型，在药物纯度研究中日益受到重视度研究中日益受到重视第15页/共68页4/19/202217严格控制药品的贮

10、藏条件贮藏条件，是保证临床用药安全有效的一个重要方面。贮藏过程中：保管不当、贮藏时间过长在外界条件(如：湿度、温度、光、空气)影响或微生物作用下， 发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、发霉等变化，产生有关杂质。后果： 外观、物理常数、药物稳定性和质量，疗效降低甚至失去、产生毒性等。第16页/共68页4/19/202218一般杂质一般杂质: 在自然界分布比较广泛，在多种药物的在自然界分布比较广泛，在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质。生产或贮存过程中容易引入的杂质。如：氯化物、硫酸盐、重金属、酸碱度、水分、砷盐、铁盐如：氯化物、硫酸盐、重金属、酸碱度、水分、砷盐、铁盐.特殊

11、杂质特殊杂质：在特定药物的生产和贮存过程中，因其：在特定药物的生产和贮存过程中，因其生产工艺或药物本身的性质可能引入的杂质。生产工艺或药物本身的性质可能引入的杂质。第17页/共68页4/19/202219药典未规定的杂质：一般不需要检查。遇特殊情况：需要进一步追踪、检查。 如：改变了原料、生产方法。新药研究：要对纯度、稳定性进行考察。了解可能引入的杂质为制订其质量标准提供依据；尽可能对杂质进行分离，研究其结构和降解机制，为药物的生产、贮藏及新的药物设计提供相关信息药物的杂质检查也是药物的杂质检查也是不断发展变化的不断发展变化的注意注意：药典中规定的检查项目，是指正常生产和储存中可能产生并需控制

12、的杂质。药典中未规定检查的杂质，一般有以下几种情况：正常生产和储存中不可能引入；含量甚微，对人体和药物质量无不良影响；限量要求较宽，现有工艺生产的产品均能达到；对杂质认识不足，有待于积累资料第18页/共68页4/19/202220药物中杂质的限量除考虑杂质本身的性质杂质本身的性质(安全性安全性)外，还要结合实际的生产水平实际的生产水平(生产的可行性生产的可行性)，产品的稳定性产品的稳定性，参考各国药典的标准来制订。三、杂质的限量三、杂质的限量药物中的杂质在不影响疗效、不产生毒性、保证药物质量的原则下，允许药物存在有一定量的杂质。这一允许量被称为杂质的限量。即药物中所含杂质的最大允许量杂质的限量

13、：杂质的限量：100%量供试杂质的最大允许量杂质限量品限量表示(g/g)方法 ：%，ppm第19页/共68页4/19/202221杂质限量控制方法：对照法：有杂质对照品 取一定量的被检杂质标准溶液和一定量的供试品溶液，相同条件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量。反应灵敏度法：供试液中加入一定量试剂，一定反应条件下是否出现正反应比较法：取一定量的供试品依法检查，测定特定待检杂质的参数(如吸光度)，与规定限量比较，不得更大注意注意：平行原则平行原则不出现正反应正反应为合格限量检查法限量检查法(Limit test)：通常不要求测定其准确含量，只需检查杂质是否超过限量定量测定法定量测定

14、法后二者示例见：教材 P41第20页/共68页4/19/202222：葡萄糖中重金属检查取葡萄糖4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，依法检查重金属（中国药典，附录H 第一法），含重金属不得过百万分之五。问应取标准铅溶液多少ml（每1ml相当于10g的Pb）?2ml10100 . 4105CSLV100%SCVL66100%量供试杂质的最大允许量杂质限量品100%SCVL对照法杂质限量计算方法：100%供试标准溶液的体积标准溶液的浓度品量第21页/共68页4/19/202223：对乙酰氨基酚中氯化物检查取对乙酰氨基酚(扑热息痛，解热镇痛药)2.0g，加水100m1，

15、加热溶解后冷却，滤过，取滤液25m1，依法检查氯化物(中国药典，附录A)，所发生的浑浊与标准氯化钠溶液5.0ml(每1ml相当于10g的Cl-)制成的对照液比较，不得更浓。问氯化物的限量是多少?%100SVCL%01. 0%100251000 . 2510106注意：注意：u统一单位u求的目的（L？C？V? S? ）u是否稀释u限量表示方法第22页/共68页4/19/202224第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法在中国药典中收载于附录中，药典正文中直接引用。氯化物检查法硫酸盐检查法铁盐检查法 硫氰酸盐法 巯基乙酸法重金属检查法 硫代乙酰胺法 硫化钠法 微孔滤膜法砷盐检查法 古蔡氏法

16、二乙基二硫代氨基甲 酸银法溶液颜色检查法 目视比色法 分光光度法 色差计法 易碳化物检查法溶液澄清度检查法炽灼残渣检查法干燥失重测定法 常压恒温干燥法 干燥剂干燥法 减压干燥法与恒温减压干燥法 热分析法 水分测定法残留溶剂测定法第23页/共68页4/19/202225一、氯化物检查法一、氯化物检查法1.原理原理：Cl+AgAgCl（白色）硝酸硝酸酸性条件下，微量氯化物与AgNO3溶液反应，生成白色浑浊。与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的浑浊比较，不得更大加硝酸的作用：1）加速AgCl生成，产生较好的乳浊2）避免Ag2CO3, Ag3PO4 , Ag2O等的形成，消除这些阴离子的干扰Cl的

17、浓度： 50-80g/50ml为宜。相当于标准NaCl 溶液(10g Cl/ml) 5.0-8.0mlH+第24页/共68页4/19/202226mlmlml401025水稀硝酸水供试品mlml4010水稀硝酸标准液比较暗处摇匀水min5,500 . 13mlmlAgNO2.方法方法如溶液显碱性，如溶液显碱性，可滴加硝酸使成可滴加硝酸使成中性中性溶液如不澄清溶液如不澄清，应滤过，应滤过容器：容器：50ml纳氏比色管纳氏比色管第25页/共68页4/19/202227用含硝酸的蒸馏水洗净滤纸中Cl至洗液遇AgNO3不产生浑浊，再过滤供试液两份供试液1份AgNO3反复过滤至澄清标准Cl与水，作为对照

18、液对照液1份AgNO3 作为样品液样品液比较对照液与样品液对照液与样品液的浑浊程度3.注意注意氯化物适宜浓度： 50-80g/50ml硝酸酸性：作用 酸度以50ml供试液中含稀硝酸10ml为宜供试液若不澄清供试液若有色，采用内消色法解决避光黑色背景下，从上至下观察第26页/共68页4/19/202228Cl的存在状态：的存在状态：溶于水溶于水的药物直接测定不溶于水不溶于水的药物：加水振摇，过滤，取滤液检查；若药物在稀乙醇或丙酮中有一定溶解度，可加稀乙醇或丙酮溶解后再检查；也可采用超声，加热等方法，使Cl溶解，取滤液或上清夜进行检查有机氯有机氯有机破坏第27页/共68页4/19/202229二、

19、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法1.原理原理：SO42 + Ba2+ BaSO4(白色)标准K2SO4溶液（100 g SO42 /ml ）2.方法方法mlml240稀盐酸水供试品mlml240稀盐酸水标准液后比较摇匀水min105052%25mlmlBaClH+第28页/共68页4/19/202230酸及酸度：加稀盐酸使成酸性，作用：防止BaCO3,Ba3(PO4)2 形成。但酸度不能过大，否则会使硫酸钡溶解，降低灵敏度。以50ml供试液中含稀盐酸2ml为宜溶液有色：内消色法。药物不易溶于水：加适量有机溶剂(如稀乙醇或丙酮)溶解后再检查3.注意注意黑色背景下，从上至下观察避光第29页/共68页4

20、/19/202231三、铁盐检查法三、铁盐检查法1.硫氰酸盐法硫氰酸盐法ChP USP为什么要检查铁盐？可能会加快药物的氧化和降解(1)原理原理：Fe3+ + 6SCN Fe(SCN)63 （红色） H+标准铁溶液：硫酸铁铵溶液FeNH4(SO4)2 12H2O (10 g Fe3+ /ml )第30页/共68页4/19/202232(2)方法方法ml25水供试品ml25水标准液，摇匀比较水硫氰酸铵水mlmlml5033035mgml504过硫酸铵稀盐酸第31页/共68页4/19/202233(3)注意注意标准硫酸铁铵配制时为防止水解，需加适量硫酸过硫酸铵的作用：氧化剂，氧化Fe2+ Fe3+

21、 ；防止光线导致的硫氰酸铁配位离子还原或分解褪色过量硫氰酸铵的作用：反应为可逆反应，加过量硫氰酸铵试剂可增加生成的配位离子的稳定性；提高反应灵敏度；消除氯化物，PO43，SO42,枸橼酸根等与铁盐形成有色配合物引起的干扰反应在HCl酸性中进行：可防止Fe水解。 酸度：50ml溶液中含稀盐酸4mlFe3+的浓度：目视法：10-50g Fe3+ /50ml为宜，相当于标准硫酸铁铵FeNH4(SO4)2 12H2O 1.0-5.0ml； 若用吸光度比较，则在5-90g Fe3+ /50ml时，溶液的A与浓度线性关系良好。第32页/共68页4/19/202234供试液与对照液色调不一致或呈色浅不易比较

22、：可加正丁醇或异戊醇提取环状结构的有机药物：需经炽灼破坏Fe的存在形式：Fe2+无此反应，需加入氧化剂过硫酸铵或硝酸(需加热煮沸除去剩余硝酸）氧化Fe2+ Fe3+第33页/共68页4/19/202235铁盐检查法（2010年版二部）附录 G 铁盐检查法 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品,加水溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35ml后，加30硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml, 摇匀；如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液（取各药品项下规定量的标准铁溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成25ml,加稀盐酸4ml与

23、过硫酸铵50mg，用水稀释使成35ml，加30硫氰酸铵溶液3ml,再加水适量稀释成50ml，摇匀）比较，即得。 如供试管与对照管色调不一致时，可分别移至分液漏斗中，各加正丁醇20ml提取，俟分层后，将正丁醇层移置50ml纳氏比色管中，再用正丁醇稀释至25ml，比较，即得。 标准铁溶液的制备 称取硫酸铁铵 FeNH4(SO4)212H2O 0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。 临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10g的Fe) 第34页/共68页4/19/202236铁盐 取

24、炽灼残渣项下遗留的残渣，加盐酸1ml，置水浴上蒸干，再加稀盐酸1ml 与水适量，置水浴上加热，滤过，坩埚用水洗涤，合并滤液与洗液使成25ml，依法检查（附录 G），与标准铁溶液1.0ml 用同一方法制成的对照液比较，不得更深(0.001%) 泛影酸中铁盐检查： 泛影酸泛影酸第35页/共68页4/19/2022372.巯基醋酸法巯基醋酸法-BP(2) 注意注意 在加巯基醋酸试液前，先加入20%枸橼酸溶液2 ml，使枸橼酸与铁离子形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀(1) 原理原理 巯基醋酸还原Fe3+为Fe2+，在氨碱性试液中巯基醋酸与Fe2+作用生成红色配位离子。与硫氰酸盐法比较，

25、较为灵敏，但试剂较贵与硫氰酸盐法比较，较为灵敏，但试剂较贵第36页/共68页4/19/202238四、重金属检查法四、重金属检查法 重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠(即与S2-)作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等。影响药物的稳定性和安全性。药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。 第37页/共68页4/19/202239ChP收载3种方法第一法第一法 硫代乙酰胺法第二法第二法 炽灼后的硫代乙酰胺法第三法第三法 硫化钠法第38页/共68页4/19/202240应用范围应用范围：在实验条件下供试液澄清、无色，对检查无干扰或经处理

26、后对检查无干扰的药物 一般是溶于水、稀酸、乙醇的药物原理原理第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 +H2SH2S + Pb2+ 2H+ + PbS（黄-棕黑色）第39页/共68页4/19/202241ml25规定方法供试品mlmlpH2525 . 3规定溶剂醋酸盐缓冲液标准铅溶液后比较摇匀，硫代乙酰胺试液min22ml方法方法容器：容器：3支支25ml纳氏比色管纳氏比色管甲：甲：乙：乙：丙：丙：mlml，pH2525 . 3规定溶剂醋酸盐缓冲液液与甲相同量的标准铅溶与乙相同的溶剂溶解与乙相同量的供试品a、丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中显示的

27、颜色与甲管比较，不得更深；b、如丙管中显出的颜色浅于甲管，应取样按第二法第二法重新检查。标准铅溶液：硝酸铅溶液。 10g Pb2/ml第40页/共68页4/19/202242试品有微量试品有微量Fe3+：在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出S产生混浊影响比色，可在甲、乙、丙三管中分别加入相同量的Vc 0.5-1.0g，使Fe3+还原成Fe2+再按上法检查。注意注意pH3.5醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液本反应的pH对显色有很大影响，在pH3-3.5时，PbS较完全。配制供试液(乙管)时，如使用的盐酸超过1ml，氨试液超过2ml，或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，甲管溶液(对照液)应取同样同量的试剂置瓷

28、皿中蒸干后，加醋酸铅缓冲液(pH3.5)2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水或各品种项下规定的溶液稀释成25ml。Pb2适宜比色范围适宜比色范围：10-20g/25ml，相当于标准铅溶液12ml观察方法观察方法：白色背景下，从上至下观察供试液有色时供试液有色时：在甲管中滴加少量稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙、丙管一致。如仍不能使颜色一致，应取样按第二法第二法检查。 第41页/共68页4/19/202243重金属 取本品1.0g，加乙醇23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，依法检查（附录 H第一法），含重金属不得过百万分之十 阿司

29、匹林原料药中的重金属检查：第42页/共68页4/19/202244第二法第二法 炽灼破坏后硫代乙酰胺法炽灼破坏后硫代乙酰胺法应用范围应用范围：在水、稀酸或乙醇中难溶，及含芳环或杂环的有机药物原理原理：将供试品炽灼破坏后，残渣加硝酸进一步破坏，破坏完全后，蒸干，加盐酸转化为易溶于水的氯化物，再按第一法检查第43页/共68页4/19/202245方法方法：取各品种项下规定量的供试品，按炽灼残渣检查法(附录 N)进行炽灼处理，然后取遗留的残渣，或直接取炽灼残渣项下遗留的残渣，供试品若为溶液，取各品种项下规定量的溶液，蒸发至干，再按上述方法后处理后取遗留的残渣，供试品处理方法：使完全灰化炽灼放冷至氧化

30、氮气体除尽后蒸干加硝酸除尽低温加热至硫酸放冷缓缓炽灼至完全炭化供试品一定量硫酸C6005005 . 0105 . 0，ml，ml加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽氧化氮蒸气除尽后，放冷第44页/共68页4/19/202246对照液：（乙管）取配制供试液的试剂，置瓷皿中蒸干后，ml2515ml(pH3.5)2ml水标准铅溶液一定量水醋酸盐缓冲液管微热溶解后入纳氏比色mlml，ml25(pH3.5)2ml152水醋酸盐缓冲液红色滴加氨试液对酚酞显微加水盐酸管微热溶解后入纳氏比色水浴蒸干供试液（甲管）：后比较摇匀，硫代乙酰胺试液min22ml第45页/共68页4/19/202247注意注意：炽

31、灼温度：500-600，以免温度过高造成重金属损失炽灼残渣加硝酸处理后，必须蒸干，除尽氧化氮，否则亚硝酸可使H2S氧化，析出S，影响比色消除盐酸或其它试剂中可能存在的重金属的影响： 配制供试液时，使用盐酸超过1ml(或与盐酸1ml相当的稀盐酸)，使用氨试液超过2ml，及用硫酸、硝酸进行有机破坏或用其它试剂处理者，除另有规定外，对照液应取同样量试剂在瓷皿中蒸干后，依法检查。含钠或氟有机药物用铂坩埚或硬质玻璃蒸发皿：消除腐蚀瓷坩埚引入重金属的可能性观察方法：白色背景下，从上至下观察第46页/共68页4/19/202248安乃近原料药中的重金属检查：重金属 取本品1.0g，置石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿

32、中，加硫酸1ml 使湿润，缓缓炽灼至硫酸蒸气除尽，放冷，加硝酸0.5ml ，继续炽灼至氧化氮蒸气除尽后，在500600炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干，加水15ml使溶解，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使成25ml，依法检查（附录 H 第一法），含重金属不得过百万分之二十第47页/共68页4/19/202249在碱性介质中，用硫化钠作显色剂，使Pb2+生成PbS，与一定量标准铅溶液以同法处理后所呈颜色比较第三法第三法 硫化钠法硫化钠法应用范围应用范围：溶于碱性水溶液，不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。磺胺类，巴比妥类原理原理：注意

33、注意：方法方法：摇匀溶解后入纳氏比色管供试品适量滴硫化钠试液水试液520ml，5mlaOHN供试液：对照液：一定量标准铅液同法处理硫化钠临用新制。原因：硫化钠对玻璃有一定腐蚀性，且久置后会产生絮状物第48页/共68页4/19/202250四种方法的比较：四种方法的比较：显色剂酸碱度应用范围原理方法注意事项第一法硫代乙酰胺pH3-3.5第二法硫代乙酰胺pH3-3.5第三法硫化钠碱性第49页/共68页4/19/202251五、五、砷盐（砷盐（Arsenic）检查法检查法古蔡氏法二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC）第50页/共68页4/19/202252As3+ 3Zn + 3H+ AsH3+

34、3Zn2+AsO33-+ 3Zn + 9H+ AsH3+ 3Zn2+ +3H2OAsH3 + HgBr2 （试纸） 砷斑与2ml标准砷溶液同法操作。 砷斑： As(HgBr)3 (黄色)； AsH(HgBr)2(棕色)； As2Hg3 (棕黑色)第一法第一法 古蔡氏法古蔡氏法原理原理:金属锌与酸作用产生新生态的氢，氢与药物中微量砷盐反应，生成具挥发性的砷化氢气体，遇溴化汞试纸产生黄至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液在同样条件下生成的砷斑比较，颜色不得更深第51页/共68页4/19/202253方法：方法：仪器装置仪器装置精密量取2ml，置A瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸

35、性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即将照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置2540水浴中,反应45分钟，取出溴化汞纸试，即得 标准砷斑的制备取按各品种项下规定方法制成的供试品溶液，置A瓶中,照标准砷斑的制备，自“再加碘化钾试液5ml”起，依法操作 样品砷斑的制备相当于2g砷。此时砷斑清晰第52页/共68页4/19/202254标准砷溶液的制备 称取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。 临用前，精密量取贮备液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10

36、ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于1g的As) 第53页/共68页4/19/202255供供试试品、品、HCl、H2O、Zn、KI、SnCl2Pb(Ac)2棉花棉花HgBr2试纸试纸A 砷化氢发生瓶B 中空磨口塞C 导气管D 具孔有机玻璃旋塞E 具孔有机玻璃旋塞盖标准砷斑标准砷斑样品砷斑样品砷斑与砷化氢反应的灵敏度强于氯化汞，但色斑稳定性差。故反应中应保持干燥及避光，并立即与标准砷斑比较第54页/共68页4/19/202256 Pb(AC)2棉花棉花的作用：消除锌粒和供试品中可能含有的少量的硫化物的影响。 Zn粒及供试品中可能含有少量S2,在酸性条件下产生 H2S，与HgBr2作

37、用，生成HgS，干扰测定，故在测砷管中部，用Pb(Ac)2棉花填充，以消除干扰。100 g S存在也不干扰。 S2- + 2H+ H2S H2S + HgBr2 2HBr + HgS （汞斑） H2S + Pb(Ac)2 PbS + 2HAc 第55页/共68页4/19/202257KI和酸性和酸性SnCl2的作用：的作用： 将五价砷还原为三价砷，加快反应速度； KI生成的I2被SnCl2还原成I-，I-与反应中生成的Zn2+形成稳定的配位离子，利于反应向右进行，促进AsH3的生成 抑制锑化氢的生成。 100g Sb存在也不干扰 SnCl2与锌形成Zn-Sn齐，去极化，从而使氢气均匀而连续地发

38、生第56页/共68页4/19/202258消耗KI，SnCl2 并氧化AsH3注意：注意：（S2,SO32,S2O32）+H+H2S或SO2 遇HgBr2试纸HgS或Hg (干扰测定) 供试品为含硫药物含硫药物:解决方法：可先加加HNO3处理处理，使硫化物氧化成SO42, 以消除干扰。例 硫代硫酸钠 供试品为铁盐铁盐：解决方法：可先加酸性酸性SnCl2，使Fe3+ Fe2+，再检查。 例 枸橼酸铁铵第57页/共68页4/19/2022592As3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As+ 3SnCl4 + 6H+胶态、棕褐色胶态、棕褐色 供试品为环状环状药物:须先进行有机破坏，有机破坏，否则结果偏低或难检出Ca(OH)2例 呋塞米无水 Na2CO3 例 苯甲酸钠碱破坏法 含锑含锑药物，改用药物，改用白田道夫白田道夫（Betterdorff ）法）法第58页/共68页4/19/202260第二法第二法 二乙基二硫代氨基甲酸银法二乙基二硫代氨基甲酸银法（silver diethyl dithio carbamate) （Ag-DDC法法）原理原理:金属锌与酸作用产生新生态的氢，氢与药物中微量砷盐反应，生成具挥发性的砷化