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l l （3 3）5 35 3外切酶活性外切酶活性35kD76kD苦草杆菌蛋白酶裂解全酶苦草杆菌蛋白酶裂解全酶5 3外切酶外切酶5 3聚合酶聚合酶 3 5外切酶外切酶5 3聚合酶聚合酶 3 5外切酶外切酶Klenow片段片段DNA聚合酶聚合酶I全酶全酶（一）核酸分子与固相介质的结合（一）核酸分子与固相介质的结合1 1、支持介质的类型和性质、支持介质的类型和性质硝酸纤维薄膜：硝酸纤维薄膜： 本底低，易检测杂交信号对小于本底低，易检测杂交信号对小于500500碱基的碱基的 核酸结合力低，脆性大易破裂。核酸结合力低，脆性大易破裂。尼龙膜和带电荷的尼龙膜：尼龙膜和带电荷的尼龙膜： 耐用，结合力强，但其本底高。耐用，结合力强，但其本底高。1 1、噬菌体、噬菌体/ /克隆的转移克隆的转移l（1 1）毛细转移）毛细转移l（2 2）真空转移）真空转移l（3 3）电转移）电转移l1 1、烘烤、烘烤 802802小时小时l2 2、紫外光固定、紫外光固定 l3 3、碱固定、碱固定l1 1、预杂交、预杂交（1 1）目的：减少非特异性杂交）目的：减少非特异性杂交（2 2）成分：）成分：去污剂：去污剂：1%SDS 1%SDS （可促进溶液对薄膜的覆盖，可（可促进溶液对薄膜的覆盖，可 抑制抑制RNaseRNase酶活性）酶活性

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