--光学显微镜

1、光学显微镜的构造、原理及使用戒毒管理局检验培训班课件戒毒管理局检验培训班课件 甘超甘超 2014.8.8主要内容一、显微镜的结构二、显微镜的光学原理及几个基本概念三、显微镜的使用及注意事项目的与要求一、掌握显微镜低倍镜、高倍镜、油镜的使用二、熟悉使用显微镜时的规则三、了解显微镜各个部件的功能显微镜的基本结构目镜目镜：安装在镜筒的上：安装在镜筒的上端，起着将物镜所放大端，起着将物镜所放大的物像进一步放大的作的物像进一步放大的作用。每台显微镜通常配用。每台显微镜通常配置置2 23 3个不同放大个不同放大倍率倍率的的目镜目镜，常见的有，常见的有5 5、1010和和1515（表示放表示放大倍数）的大倍

2、数）的目镜目镜，可根，可根据不同的需要选择使用，据不同的需要选择使用，最常使用的是最常使用的是1010目镜。目镜。 物镜：安装在物镜转换物镜：安装在物镜转换器上。每台光镜一般有器上。每台光镜一般有3 34 4之个不同放大之个不同放大倍率倍率的物镜，每个物镜由数的物镜，每个物镜由数片凸透镜和凹透镜组合片凸透镜和凹透镜组合而成，是显微镜最主要而成，是显微镜最主要的光学部件，决定着光的光学部件，决定着光镜分辨力的高低。常用镜分辨力的高低。常用物镜的放大倍数有物镜的放大倍数有1010、4040和和100100等几种。等几种。一般一般1010的物镜称为低的物镜称为低倍镜；将倍镜；将4040的称为高的称为

3、高倍镜；将倍镜；将100100的称为的称为油镜。油镜。保护成像的光路与亮度连接目镜和物镜 连接镜座和镜臂 承载中间部分元件载物台作用是安放载玻片，形状有圆形和方形两种，其中方形的面积为120mm110mm。中心有一个通光孔，通光孔后方左右两侧各有一个安装压片夹用的小孔。分为固定式与移动式两种。有的载物台的纵横坐标上都装有游标尺，一般读数为0.1mm，游标尺可用来测定标本的大小，也可用来对被检部分做标记。 聚光器安装在载物台下，其作用是将光源经反光镜反射来的光线聚焦于样品上，以得到最强的照明，使物象获得明亮清晰的效果。聚光器的高低可以调节，使焦点落在被检物体上，以得到最大亮度。调节调节X轴轴Y轴

4、方向轴方向都是升降镜筒，调节焦距，以便观察清楚物像，粗准焦螺旋的升降范围大，属于粗略调节，细准焦螺旋的升降范围小，属于精确调节。 2 显微镜的光学原理2.1折射和折射率 光线在均匀的各向同性介质中，两点之间以直线传播，当通过不同密度介质的透明物体时，则发生折射现象，这是由于光在不同介质的传播速度不同造成的。 2.2凸透镜的五种成象规律(1) 当物体位于透镜物方二倍焦距以外时，则在象方二倍焦距以内、焦点以外形成缩小的倒立实象； (2) 当物体位于透镜物方二倍焦距上时，则在象方二倍焦距上形成同样大小的倒立实象； (3) 当物体位于透镜物方二倍焦距以内，焦点以外时，则在象方二倍焦距以外形成放大的倒立

5、实象； (4) 当物体位于透镜物方焦点上时，则象方不能成象； (5) 当物体位于透镜物方焦点以内时，则象方也无象的形成，而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚象。显微镜的成像原理 显微镜和放大镜起着同样的作用，就是把近处的微小物体成一放大的像，以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。 物体位于物镜前方，离开物镜的距离大于物镜的焦距，但小于两倍物镜焦距。所以，它经物镜以后，必然形成一个倒立的放大的实像AB。 AB靠近F2的位置上。再经目镜放大为虚像AB后供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身，而是物体被物镜所成的已经放大了一次

6、的像。 3 显微镜的几个基本概念光源：能发射光波的物体。 可见光频率范围：7.51014 - 3.91014 Hz。 真空中对应的波长范围：390nm 760nm 相应光色：紫、蓝、青、绿、黄、橙、红分辨率(鉴别距离)：显微镜能分辨的最小距离，用D表示。显微镜的鉴别距离越小，分辨率越高。 D=0.61/ nsin D：分辨率 :光波的波长 N:介质折射率 :物镜镜口角孔径角：由标本上一点发出的进入物镜最边缘光线L和进入物镜中心光线OA之间的夹角称为孔径角。数值孔径：令NA = nsin , 叫物镜的数值孔径。 数值孔径与显微镜的分辨率有密切关系，越短，NA越大，分辨率越高。物镜数值孔径放大率

7、在显微镜下所看到的物像和实际物体之间的大小比例叫显微镜的放大率或放大倍数。显微镜下物像的放大主要由物镜、镜筒长度、目镜所决定。适合的放大倍数决定于物镜的数值孔径，一船应为数值孔径的5001000倍。显微镜放大倍数放大倍数显微镜的放大倍数显微镜的放大倍数 为目镜倍数乘物镜倍数，为目镜倍数乘物镜倍数，如目镜为如目镜为10倍，物镜为倍，物镜为40倍倍,则放大倍数为则放大倍数为4010倍（放大倍（放大400倍）。优良的显微镜可倍）。优良的显微镜可放大放大2000倍。倍。 使用显微镜的操作规程使用显微镜的操作规程（1）搬动显微镜必须要）搬动显微镜必须要用右手握紧执手用右手握紧执手，左手，左手托住镜座，才

8、能托住镜座，才能做较远做较远距离的移动。距离的移动。显微镜的使用显微镜的使用（2）将显微镜置于实验台上时，应放在身体）将显微镜置于实验台上时，应放在身体的左前方，右侧可放记录本或绘图纸等。的左前方，右侧可放记录本或绘图纸等。显微镜的使用显微镜的使用（3）使用显微镜前，首先要调节好光源。在）使用显微镜前，首先要调节好光源。在实验室中可利用灯光或自然光，但不能用直实验室中可利用灯光或自然光，但不能用直射的阳光，以免损伤眼睛。为了迅速而正确射的阳光，以免损伤眼睛。为了迅速而正确地对光，应先用地对光，应先用10物镜，把光圈放到最大物镜，把光圈放到最大位置。在用眼睛观察目镜中视野的同时，转位置。在用眼睛

9、观察目镜中视野的同时，转动反光镜，使视野的光线最明亮、最均匀。动反光镜，使视野的光线最明亮、最均匀。如果靠近光源，可用平面的反光镜；如果光如果靠近光源，可用平面的反光镜；如果光源距离较远，可用凹面的反光镜。源距离较远，可用凹面的反光镜。显微镜的使用显微镜的使用（4）进行观察时，应先用进行观察时，应先用10物镜。为了避免物镜。为了避免物镜压坏制片（在使用高倍物镜时最易发生），物镜压坏制片（在使用高倍物镜时最易发生），必须用下面方法聚焦：即一方面从侧面注视物必须用下面方法聚焦：即一方面从侧面注视物镜与制片间的距离；一方面转动粗聚焦器，使镜与制片间的距离；一方面转动粗聚焦器，使镜筒逐渐下降，直到接近

10、盖玻片为止。观察目镜筒逐渐下降，直到接近盖玻片为止。观察目镜视野，慢慢转动粗聚焦器使镜筒逐渐上升，镜视野，慢慢转动粗聚焦器使镜筒逐渐上升，直到看清制片中的影像为止直到看清制片中的影像为止。然后转动镜头转。然后转动镜头转换器用高倍物镜（换器用高倍物镜（40或或44）观察。使用）观察。使用高倍物镜如需要用细聚焦器聚焦时，其旋钮转高倍物镜如需要用细聚焦器聚焦时，其旋钮转动量最好不要大于半圈动量最好不要大于半圈注意事项注意事项（1）任何旋钮转动有困难时，绝不能用力过大，）任何旋钮转动有困难时，绝不能用力过大，而应查明原因，排除障碍。如果自己不能解决时，而应查明原因，排除障碍。如果自己不能解决时，要向指

11、导教师说明，帮助解决。要向指导教师说明，帮助解决。（2）保持显微镜的清洁，尽量避免灰尘落到镜头）保持显微镜的清洁，尽量避免灰尘落到镜头上，否则容易磨损镜头。必须尽量避免试剂或溶上，否则容易磨损镜头。必须尽量避免试剂或溶液沾污或滴到显微镜上，这些都能损坏显微镜。液沾污或滴到显微镜上，这些都能损坏显微镜。特别是高倍物镜很容易被染料或试剂沾污，如被特别是高倍物镜很容易被染料或试剂沾污，如被沾污时，应立即用擦镜纸擦拭干净。显微镜用过沾污时，应立即用擦镜纸擦拭干净。显微镜用过后，应用清洁棉布轻轻擦拭（不包括物镜和目镜后，应用清洁棉布轻轻擦拭（不包括物镜和目镜镜头）。镜头）。注意事项注意事项（3）要保护物

12、镜、目镜和聚光器中的透镜。光学）要保护物镜、目镜和聚光器中的透镜。光学玻璃比一般玻璃的硬度小，易于损伤。擦拭光学玻璃比一般玻璃的硬度小，易于损伤。擦拭光学透镜时，只能用专用的擦镜纸，不能用棉花，棉透镜时，只能用专用的擦镜纸，不能用棉花，棉布或其它物品擦拭。擦时要先将擦镜纸折叠为几布或其它物品擦拭。擦时要先将擦镜纸折叠为几折（不少于四折），从一个方向轻轻擦拭镜头，折（不少于四折），从一个方向轻轻擦拭镜头，每擦一次，擦镜纸就要折叠一次。然后绕着物镜每擦一次，擦镜纸就要折叠一次。然后绕着物镜或目镜的轴旋转地轻轻擦拭。如不按上述方式擦或目镜的轴旋转地轻轻擦拭。如不按上述方式擦拭，落在镜头上的灰尘很易损伤透镜，出现一条拭，落在镜头上