《生物化学实验》实验教学大纲

1、生物化学实验实验教学大纲课程代码：UHOR1010课程名称：生物化学实验 英文名称：Experiments in Biochemistry 实验室名称：园艺园林实验室课程学时：36实验学时：36一、本课程实验教学目的与要求生物化学实验是增强学生理解理论内容、提高学生实验操作能力和加强实践环节锻炼的应用基础课。本课程以实践环节为主，根据课程的性质、任务、要求及学习的对象，将课程内容分为基础实验、综合性实验和创新设计性实验等三种类型。通过实验课教学与实验操作，使学生掌握生物分子分离、纯化、鉴定的一般技术和原理及其基本操作技能。使学生巩固和加深生物化学理论知识，通过实践进一步学生独立分析问题和解决问

2、题的能力，同时要求学生要有创新精神，学会从生产中找出问题，用实事求是的科学态度认识问题，提高社会实践的应变能力，为今后学习和工作打下基础。二、主要仪器设备及现有台套数 仪器设备需要数量仪器设备需要数量高压电泳仪1台超低温冰箱1台生化培养箱2台空气振荡培养箱1台超纯水制备系统1套水浴振荡培养箱2台电子显示水浴锅2台普通台式离心机3台多用途电泳仪及配件2套冷冻高速离心机1台752分光光度计3台酸度计（pH计） 3台紫外分光光度计1台电子天平3台微量移液器（2-1000 l）10套凝胶成像仪1台凝胶层析装置6套玻璃仪器30套三、实验课程内容和学时分配序号实验项目名 称目的与要求实验内容学时分配实验类

3、型每组人数必开选开1蛋白质等电点的简易测定了解蛋白质的两性电离性质，学习一种pI测定方法配制不同pH梯度的溶液，观察、分析待测蛋白质的沉淀情况3基础性2-3选开2分光光度计线性分辨范围测定了解光谱技术的基本原理，学会正确使用分光光度计进行分析制备待测溶液，用多种不同类型的分光光度计进行定量分析3设计性2-3选开3双缩脲法测定蛋白质含量掌握双缩脲法定量分析蛋白质的原理与方法配制双缩脲试剂，制作标准曲线，在540nm下检测蛋白质样品的吸光度3设计性2-3必开4考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量掌握考马斯亮蓝法定量分析蛋白质的原理与方法配制显色试剂，制作标准曲线，在595nm下检测蛋白质样品的吸光度3综

4、合性2-3选开5酵母RNA的分离了解核酸的理化性质，掌握核酸及其组分的制备方法准备样品和配制试剂，样品经加热、离心、洗涤及干燥后，称量计算得率3综合性2-3必开6酵母RNA组分的鉴定学习鉴定核酸组分的方法，加深理解核酸的理化性质配制检测试剂，RNA样品加酸加热水解，对水解液的核酸组分进行鉴定3综合性2-3必开7维生素C含量的测定掌握维生素C定量分析的基本原理与操作方法配制2,6-二氯酚靛酚试剂，滴定待测样品，计算Vc含量3基础性2-3选开8绿豆总蛋白及SOD的提取掌握植物蛋白质提取的基本方法，加深理解蛋白质理化性质配制磷酸盐缓冲液，新鲜材料加缓冲液研磨匀浆，冷冻离心得到SOD粗提液3综合性2-

5、3必开9硫酸铵沉降法纯化SOD学习蛋白质沉淀与变性的相关理论，掌握蛋白质的硫酸铵沉降法取总蛋白粗提液，按要求加入硫酸铵至目的浓度，盐析获得SOD组分3设计性2-3必开10葡聚糖凝胶层析脱盐学习凝胶层析的基本原理，掌握利用葡聚糖凝胶层析进行蛋白质脱盐的技术和方法选取葡聚糖凝胶，清洗、装柱、平衡、上样、洗脱、收集、鉴定，绘制洗脱曲线，评价脱盐效果6综合性2-3必开11SOD活性的测定学习SOD催化反应的基本原理，掌握SOD活性测定的方法和步骤选取不同量酶液，依次加入NBT等试剂反应，560nm下比色，根据抑制相关曲线，计算SOD活力3设计性2-3必开12转氨酶的提取及活力测定学习生物体内转氨酶活性

6、测定的原理和方法配制提取缓冲液，新鲜材料匀浆、离心，测定提取液的谷丙转氨酶活力3综合性2-3必开13SDS法测定蛋白质相对分子质量学习蛋白质电泳的基本原理，掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳技术配制凝胶缓冲液，制备电泳凝胶、加样电泳、染色，计算迁移率和相对分子质量9综合性2-3必开四、考核方式1、实验报告：实验报告的撰写要求使用专用实验报告纸。实验报告的内容应包括：实验目的，实验的基本原理，实验所用的仪器设备及试剂，实验操作程序，实验结果与分析，实验应注意事项等内容。2、考核方式考核可采取闭卷、开卷、实验操作等形式，或多种形式相结合，对学生的实验及学习情况做出全面科学的评价。成绩评定把学生的实际动手能力放在重要地位。根据平时实验完成情况、实验报告撰写情况等给予综合评定，实验课考核成绩按百分制计算。（1）学习与实验态度 （20%）（2）实验技能与操作 (35%)（3）解答问题 （10%） （4）实验报告 （35%）五、实验教材、参考书1、教材：王秀奇等.基础生物化学实验（第二版）.