细支气管肺泡癌EGFR和HER2基因和蛋白表达状态研究

1、细支气管肺泡癌EGFR和HER2基因和蛋白表达状态研究研究背景细支气管肺泡癌（BAC） 肺腺癌的一个亚型 具有单纯细支气管肺泡生长模式 没有基质、血管或胸膜侵犯的证据三种亚型 单纯BAC 腺癌伴BAC特征 BAC局灶浸润性腺癌 临床特征和预后相似，明显好于其他腺癌研究背景北京协和医院204例晚期NSCLC患者应用吉非替尼治疗总体3年生存率 16.2%（33/204）病理类型（P=0.011） BAC 27.6%（ 8/ 29） 腺癌 19.2%（24/125） 鳞癌 3.1%（ 1/ 32） 目的 探索BAC分子生物学特点，包括： EGFR-TK结构域的突变 EGFR和HER2的基因拷贝数 E

2、GFR和HER2的蛋白表达探讨它们与BAC的发生发展、治疗反应以及预后的关系 方法石蜡包埋组织标本 PCR和DNA测序法 EGFR基因突变 FISH EGFR和HER2基因拷贝数 IHC EGFR和HER2的蛋白表达外周血游离DNA PCR和突变检测试剂盒 EGFR基因突变一般情况 37例手术病理标本中位年龄 61岁（范围40-83岁）男/女 16/21临床分期I/II/III/IV 26/6/4/1单纯BAC/BAC伴局部浸润/腺癌伴BAC特征 9/10/18从未吸烟/目前或既往吸烟者 29/8全部接受过手术治疗 / 单纯手术5例 / 化疗30例 / 放疗5例 /靶向治疗7例 /介入1例患者

3、性别年龄吸烟病理分期FISHIHCEGFR突变EGFRHER2EGFRHER2病理组织外周血1女66否CILow trisomy-+-N2男68否CIIPolysomy+-N*NInsetion3男77否CIDisomy-+-N4男74否BILow polysomy-+-N5男44否CILow polysomy-del L747-A750,insTN6女44是AIDisomy-G719X7女66否CIILow polysomy-+-L858RN8女69是AILow polysomy-N9女68否BILow trisomy-+-N-10女42否BIHigh polysomy+-+-L858RN1

4、1女62否AIHigh polysomy+-+-del E746-A750N12女65否CIHigh polysomy+-del L747-P753, insSL858R13男69是CILow polysomy-NN-14男48否BIDisomy-N15男63否CIIHigh polysomy+-+-NN16男45否CIHigh polysomy+-+-del E746-A750N17男61否AIHigh polysomy+-+-del E746-S752N18女42否AIDisomy-+-N19男60是CILow polysomy-+-N患者性别年龄吸烟病理分期FISHIHCEGFR突变EG

5、FRHER2EGFRHER2病理组织外周血20男53是AIHigh polysomy+-+-N21女61否AIHigh trisomy-+-N22女56否AIN-+-N23女73否CIHigh polysomy+-+-L858RN24女61是BIILow polysomy-+-L858RN25男65是BILow polysomy-+-L858RT790M26男64否BIIILow trisomy-+-L858RN27女61否BILow polysomy-+-N28男72否BILow polysomy-T790M29女49否BILow polysomy-N30女51否CIVNNNNL858RN3

6、1女40否CIIHigh polysomy+-+-NN32女61否AIHigh polysomy+High polysomy+NN33女71否CIIHigh polysomy+-+-del L747-S752N34男83否CILow polysomy-+-N35女45否CIIIHigh polysomy+Gene amplification+L858RN36女73否CIIINNNNdel L747-P753, insSN37男54是CIIIHigh polysomy+-+-D807N-单纯BAC BAC伴局部浸润 具有BAC特征的腺癌 组织标本EGFR基因突变 检测可得结果 32例EGFR基因

7、突变 16例 50% 外显子19的缺失突变 7例 43.8% 外显子20的错义突变D807N 1例 6.2% 外显子21的错义突变L858R 8例 50% 性别 p=0.476 吸烟情况 p=0.414 病理亚型 p=0.151 A：正常 外显子19739KIPVAIKELREATSPKAN7562215AAAATTCCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCAAC2268B：外显子19del L747-P753 ins S739KIPVAIKE。S。KAN7562215AAAATTCCCGTCGCTATCAAGGAA.TCT.AAAGCCAAC2

8、268C：正常外显子21850HVKITDFGLAKLLG8632538CATGTCAAGATCACAGATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGT2589D：外显子21L858R850HVKITDFGRAKLLG8632538CATGTCAAGATCACAGATTTTGGGCGGGCCAAACTGCTGGGT25892573TG, L858REGFR的FISH检测 可得结果 34例EGFR 基因拷贝数增加 14例FISH阳性率 41.2%性别 p=0.681吸烟情况 p=0.288病理亚型 p=0.056EGFR Disomy（-） EGFR Low polysomy（-） EGFR

9、 High polysomy（+） HER2的FISH检测 可得结果 35例HER2基因拷贝数增加 1例HER2基因扩增 1例HER2 FISH阳性率 5.7%HER2 Disomy（-） HER2 Gene amplification（+） HER2 High polysomy（+） EGFR IHC检测 可得结果 34例- 8 23.5% + 5 14.7% + 6 17.6% + 15 44.1% 性别 p=0.702吸烟情况 p=0.724病理亚型 p=0.842 EGFR基因拷贝数 p=0.252 EGFR（-）EGFR（+）EGFR（+）EGFR（+） HER2 IHC检测可得结果

10、 33例- 31例 93.9%+ 2例 6.1%2例阳性者 EGFR FISH （+） HER2 FISH （+） EGFR IHC 1例（+） 1例（+）HER2（-）HER2（+）外周血EGFR基因突变检测可得结果 23例EGFR基因突变 18例（ 78.3 %） 外显子18的错义突变G719X 5例 外显子19的缺失突变 4例 外显子19的插入突变 1例 外显子20的错义突变T790M 4例 外显子21的错义突变L858R 4例9例正在进行吉非替尼维持治疗，3例出现了耐药突变，核对临床确认已出现疾病进展 G719XDeletionsT790M结论BAC具有较高的EGFR 基因突变率 19号外显子的缺失突变 21号外显子的错义突变L858R 均为EGFR-TKI敏感性突变BAC具有较高的EGFR 基因拷贝数增加 与蛋白表达阳性率没有显著相关性结论BAC的HER2基因拷贝数增加/基因扩增和蛋白表达阳性率均较低 可能存在EGFR和HER2共表达病理标本主要来自不适于EGFR-TKI治疗的早期BAC患者，故上述发现均可能在一定程度上间接解释了EGFR靶向药物在BAC患者中具有