四种枳壳三种成分的含量测定

1、四种枳壳三种成分的含量测定摘要：本文通过对江枳壳、绿衣枳壳、香圆枳壳、苏枳壳四种药材的醇溶性浸出物、挥发油、橙皮苷含量的测定及分析，得出四种中药材质量优劣顺序：江枳壳香圆枳壳绿衣枳壳苏枳壳。关键词：枳壳醇溶性浸出物挥发油橙皮苷含量测定枳壳为常用中药，中医理论认为枳壳性浮而立上，长于入脾肺经，以破气消积，行气除痞为主1。自古以来，中药材枳壳品种繁杂，古人皆以翻肚如盆口唇状2。中国药典（2000版）收载了酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种的干燥未成熟果实为药用枳壳来源标准3,但今人对各种来源不同的枳壳质量优劣还是争论不休，同时，由于各地用药习惯和历史原因，给临床用药也带来了极大的不

2、便,因而要建立统一的药源非常困难。为此,本实验选用江枳壳、绿衣枳壳、香圆枳壳、苏枳壳四种全国有代表性的原药材,拟用醇溶性浸出物、挥发油、橙皮苷等有生理活性的化学成分为指标,对四种枳壳进行研究比较。四种枳壳的鉴定药材名科别来源性状鉴定主产地江枳壳芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种的干燥未成熟果实。药材直径4.56.0cm,外表绿褐色或青绿色，顶端有明显的花柱基痕，基部有果柄良，呈典型“翻肚如盆口唇状”江西新干、清江绿衣枳壳芸香科植物枸橘Poncinustrifaliata（L.）Rafin干燥未成熟果实。药材直径较小，2.53.0cm,外表灰绿色，有细柔毛，“口面不反卷

3、，皮略薄”福建闽侯、闽清、古田三县香圆枳壳芸香科植物香圆CitruswilsoniiTanaKa干燥未成熟果实。药材直径4.07.0cm,外表灰绿色，常带有棕黄色斑块，表面粗糙，具有金线环，“口面反卷，皮厚，质较松泡”陕西汉中、安康地区苏枳壳芸香科植物代代花CitrusaurantiumL.amaraEngL.干燥未成熟果实。药材直径3.05.5cm,外皮绿褐色，基部常带有残存的宿萼和果柄残基。江苏、浙江仪器与试剂TN-100型托盘式扭力天秤（上海第二化仪器厂）800-2型水浴锅（宁夏自动化仪表厂）METTLERAnalybalanceAE240DualRageBalance（瑞士）挥发油提取

4、器索氏提取器橙皮苷（721-9202中国药品生物制品检定所）石油醚101-2型电热恒温箱（上海市实验仪器总厂）酒精计蒸馏水95%乙醇（分析纯上海振兴化工厂）甲醇（分析纯上海振兴化工厂）二、四种枳壳实验设计与含量测定（一）、样品醇溶性浸出物的测定取供试品约4g,精密称定重量（精确到O.Olg）,置250300ml锥形瓶中，精密加入70%乙醇100ml,塞紧，冷浸，前6小时内每半小时振摇十分钟，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，精密量取滤液20ml，置于干燥恒重蒸发皿中，水浴蒸干后，于105C干燥3小时，冷却30分钟，迅速精密称定重量，以干燥品计算供试品中醇溶浸出物百分数。（测定用的供试品须粉碎

5、通过二号筛，并混合均匀。）其结果见表1.表1.四种枳壳醇溶性浸出物的含量测定结果（）n=3）样品第一次第二次第三次平均江枳壳36.47436.86536.77836.706绿叶枳壳30.72329.96530.36530.351香圆枳壳34.42534.78134.75734.654苏枳壳28.96228.47828.26528.568（二）、样品挥发油的含量测定4取样品粉末适量，精密称定重量（精确至0.01g），置烧瓶中，加水300500ml至适量，加玻璃珠数粒，振摇，药材充分膨胀后，连接挥发油提取仪与回流冷凝装置。自冷凝管上端加水至充满挥发油的刻度线部分，使水溢入烧瓶为止，置电炉缓缓加热至

6、沸，并保持微沸23小时，至提取器中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测量下端活塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5ml处为止，静置1小时以上，再开启活塞使油层下降至上端恰好与0线齐平，读取挥发油量，并以干燥品计算供试品含挥发油数。其结果见表2.表2.四种枳壳挥发油量测定结果缸/g）（n=3）样品第一次第二次第三次平均江枳壳4.2164.1054.1734.165绿叶枳壳3.0242.9962.9722.997香圆枳壳3.4563.4023.5143.457苏枳壳3.1223.0883.1343.115（三）、四种枳壳橙皮苷的含量测定1色谱条件5仪器：Waters高效液相色谱仪VK

7、进样器Millenum2010色谱管理系统996检测器6柱：HynersilODSC200X4.6mm5Am218流动相：甲醇：水=40：60（醋酸调PH=3.0）检测波长：284nm2工作曲线67绘制取对照品橙皮苷约10mg精密称定（精确至O.Olmg）,置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并释稀至刻度，摇匀，以作标准曲线。在高效液相色谱仪上依次进入2、4、6、8、10、12匹标准溶液进行分析，以峰面积为纵坐标，标准品进样量为横坐标，用C-R3A微处理机绘制标准曲线，见图1、图2。Ifi-liv*i:令4igkA!l4il3AJJIbU.lMiJtik1914RI4I.M1W.图1.：对照品的H

8、PLC图谱#13样品橙皮苷的含量测定EruuppI仙祜MI崔晦ElM41M“JkKuntCiIlon_ploR-jiLJbiLoZ3U1H*ncaMT自活時3辭馳相关系数r=0：（2%。取样品粗粉约lg,精密称定（精确至O.Olg）,置索氏提取器中，加石油醚80ml,置水浴加热（6090C）,回流23小时，弃去石油醚，药渣挥尽石油醚后，加甲醇80ml，置于水浴加热回流3小时，提取至无色，放冷，过滤，滤液置100ml容量瓶中，用少量甲醇分次洗涤容器，洗液滤入容量瓶中，加甲醇至刻度线，摇匀，精密量取5ml，置于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度线，摇匀即得。测定结果见表3.、图谱见图36。表3.四种枳

9、壳橙皮昔的含量测定结果飯）（n=3）样品第一次第二次第三次平均江枳壳4.4354.3764.3664.392绿叶枳壳3.6613.7213.5993.660香圆枳壳3.9263.7723.8993.866苏枳壳3.2453.3042.9983.182Hlnutea0.0013app1cHTunrUanwR*tTime(lain)Are*(uvarcjIleiyht(UV)AjnountVolunLhylaheapT.648lf143?s680170.91510PackRouths图3江枳壳橙皮苷HLPC图谱图4绿叶枳壳橙皮苷HPLC图谱图5香圆枳壳橙皮苷HPLC图谱图6苏枳壳橙皮苷HLPC图谱三、讨论与小结枳壳的原植物来源广泛，历代本草记载的枳壳品种都经历了一番演变。本文优先选用江枳壳、绿叶枳壳、香圆枳壳、苏枳壳作醇溶性浸出物测定，从表1可知，四种枳壳醇溶性浸出物顺序：江枳壳香圆枳壳绿衣枳壳苏枳壳。实验表明，枳壳中的相关成分醇溶性较高，特别是江枳壳，超过了三分之一。挥发油是枳壳中药材的特定成分之一，存在于油室组织中，直接决定枳壳香气的浓郁。来源不同的枳壳挥发油的含量有很大的差异，从表2中可知，江枳壳含挥发油的量是非常大，为绿叶枳壳的近2倍，是香圆枳壳的120.5%，苏枳壳的133.7%。为江枳壳香气比其它枳壳浓烈提供了可靠的依据。黄酮类成分也是枳壳