支原体衣原体检测

1、支原体、衣原体检测第1页实验目掌握支原体、衣原体检测方法，结果判断、临床意义和注意事项。熟悉支原体、衣原概念分类及其对应检测原理了解衣原体、支原体检测临床意义，分泌物采集、培养方法。第2页支原体概念和分类支原体是一类无细胞壁，形态上呈多形性，可经过除菌器，能在无生命培养基生长繁殖最小原核细胞型微生物。 肺炎支原体 、生殖器支原体 、 穿通支原体 人型支原体（Mh）、溶脲脲原体（Uu）第3页衣原体概念和分类衣原体是一类能经过除菌器，专性细胞内寄生，有独特周期生活原核细胞微生物。 沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肺炎衣原体第4页支原体检测临床意义支原体临床意义： 能够引发呼吸道感染支原体肺炎，泌尿生殖道

2、非淋病性尿道炎，男性前列腺炎、附睾炎、不育，女性阴道炎、宫颈炎、盆腔炎、输卵管炎、流产等，还可造成新生儿感染如脑膜炎、脑脓肿、硬脑膜下脓肿。第5页衣原体临床意义 沙眼衣原体不但可致眼部感染，而且可引发生殖泌尿系统感染、性病淋巴肉芽肿以及其它器官疾病，为人类发病率最高性传输疾病；鹦鹉热衣原体可引发肺炎和毒血症；肺炎衣原体主要引发青少年急性呼吸道感染。衣原体检测临床意义第6页支原体、衣原体检测标本采集支原体标本 棉拭子样本尿道棉拭子 、宫颈管棉拭子、咽拭子 液体样本精液、羊水、前列腺液、血清标本衣原体标本 主要为无菌棉拭子采集宫颈分泌分或尿道分泌物 还可有咽拭子、眼结膜拭子、黏稠脓液、血液、痰液等

3、第7页支原体、衣原体检测原理支原体检测原理 Uu含有脲酶分解尿素产生NH3， Mh含有精氨酸脱羧酶分解精氨酸也产生NH3，使培养基PH值升高，培养基由黄色变为红色。药敏试验板上包被有抗生素，若所测支原体对包被抗生素敏感，其酶活性受到抑制，不引发颜色改变。衣原体检测原理 金标法：利用已知特异性鼠抗衣原体抗体来检测标本中衣原体抗原。第8页检测试剂和器材1、微生物试验常规工具2、支原体、衣原体棉拭子标本3、支原体、衣原体检测试剂盒4、一次性无菌吸管和试管5、汇报签第9页支原体试剂盒组成 培养基 判定药敏一体板 无菌吸管 无菌矿物油第10页衣原体试剂盒组成 第11页一、支原体试验步骤1、从冰箱中取出支

4、原体试剂盒恢复室温2、从试剂盒中取出UU-Mh培养瓶一瓶，反应板一条，在 反应板写上病人姓名。3、取一只一次性无菌塑料吸管，然后吸收100ul培养液加入反应板上左上第一孔 (作为空白对照)。4、将采集标本拭子插入培养瓶，在靠近液面上方瓶壁挤压旋转拭子数次，使拭子中样本渗透，然后将拭子取出；5、充分混匀接种了标本后培养基，然后分别吸收100ul加入反应板各孔。(空白孔除外) 6、各孔滴加2滴无菌液体石腊，盖上反应板盖，置35-37C孵箱，培养24-48小时。第12页临床实际操作过程示范 1、设阴性对照孔 2、样本处理3、加样本液 4、加矿物油第13页 5、加盖标识 6、恒温孵育 7、孵育后判定板

5、可出现现象第14页支原体检测操作简化示意图第15页判定药敏一体板模型图第16页支原体检测结果判断 依据临床和标准对照试验确定解脲脲原体（Uu）104ccu/ml、人型支原体（Mh） 104ccu/ml为Uu、 Mh非致病值，非Uu、 Mh感染正常人群定性试验阴性第17页支原体药敏结果分析第18页支原体检测结果汇报第19页二、衣原体操作步骤1、取裂解管一支，竖立滴入裂解液A6滴，放入患者棉拭在管内充分挤压，转动约15次，后放置2分钟。2、再滴加裂解液B至刻度（约6滴），然后一样操作上述挤压步骤。3、挤压棉签（尽可能挤干），弃去棉签，在反应板加样孔处滴加入3滴（约100ul）裂解后溶液。5-10分钟后观察结果。第20页衣原体操作一第21页衣原体操作二第22页衣原体检测结果判断1、阳性：有两条红色带出现。一条位于测试区（T），另一条位于质控区内（C）。 解释：标本中含有沙眼衣原体抗原。2、阴性：仅在质控区内（C）出现一条红色带。解释：标本中检测不出沙眼衣原体抗原。 （或是没有、或是含量低于可检测范围）3、无效：质控区内（C）未出现一条红色带 第23页结果现象第24页注意事项1、本试验注意无菌操作，防止污染杂菌，故操作时请点燃酒精灯