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文档简介
副溶血性弧菌的检验一、实验目的理解副溶血性弧菌实验室检验的意义。掌握副溶血性弧菌的分离培养及生化鉴定方法。试剂氯化钠琼脂平板、嗜盐性琼脂平板、三糖铁培养基、盐胨水培养基、各种生化试验管器具乳钵、剪刀、镊子、小铁锉、酒精灯等二、实验材料三、实验步骤分离培养
称取样品25g,加225mL3.5%灭菌盐水,用均质器打碎或用乳钵磨碎,接种氯化钠琼脂平板和嗜盐性琼脂平板各一个,同时取10mL加入100mL增菌液中,放37℃8~16h培养后,涂上述平板进行分离,37℃培养18~24h取出观察。挑取可疑菌落,转种3.5%氯化钠三糖铁斜面,37℃、24h观察结果。三、实验步骤涂片镜检将三糖铁培养基上反应可疑者即底层变黄(葡萄糖产酸不产气)、上层斜面不变(乳糖、蔗糖不分解)、有动力、不产生硫化氢,进行革兰氏染色镜检形态。三、实验步骤嗜盐性试验将上述可疑培养物分别接种不同含量的盐胨水(0%,3%,7%,10%)于37℃24h培养后观察生长情况,在无盐和10%盐的胨水中不生长,在3%和7%盐的胨水中生长良好者,继续进行下列有关试验。三、实验步骤生化试验分别接种下列各类生化培养基,葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甲基红、靛基质、V-P,赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、硫化氢及溶血性试验,放37℃培养,除V-P、靛基质和甲基红试验培养48h后加试剂观察外,其他均在24h观察结果。四、结果判定判定依据:
副溶血性弧菌的生长特性在无盐的条件下不生长,在含2%~3%氯化钠的培养基中生长最旺盛,氯化钠溶液浓度到达10%以上时不繁殖。
四、结果判定判定依据:染色镜检革兰氏阴性无芽胞杆菌,易呈多形态有动力;多数散在,偶而有成对排列运动活泼;两端浓染,在固体培养条件下能生长周鞭毛。四、结果判定判定依据:主要生化特性项目结果项目结果耐盐性0%-甲基红+
7%+靛基质+
10%-赖氨酸+葡萄糖产酸+鸟氨酸+/-葡萄糖产气-精氨酸-蔗糖-溶血性+/-甘露醇+
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