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实验二革兰氏染色及细菌特殊结构观察第1页/共17页实验二

革兰氏染色及细菌特殊结构观察

2006.03.08第2页/共17页一、实验目的学习细菌的革兰氏染色原理和方法

了解细菌的特殊形态结构：

芽孢、荚膜、鞭毛第3页/共17页二、实验原理单染色法：只能观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。

复染色法：用两种或两种以上染色液进行染色，有协助鉴别微生物的作用，故也称鉴别染色法。常用的有：

革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法等。第4页/共17页革兰氏染色丹麦C.Gram创立，用于细菌分类学研究细菌细胞壁的结构第5页/共17页G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多脂质，故用乙醇等有机溶剂脱色时融解了类脂质，增加了细胞的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，经沙黄复染呈红色。G＋细胞壁结构致密，用脱色剂处理后，肽聚糖层孔径缩小，通透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色。第6页/共17页细菌的特殊形态结构芽孢：休眠体，不利环境下产生，耐受各种极端环境。荚膜：多糖，包裹在菌体外围，保护菌体鞭毛：运动，菌落形态。第7页/共17页三、实验材料大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌（24h培养物）革兰氏染色液一套第8页/共17页四、实验步骤革兰氏染色枯草杆菌的芽孢观察观看鞭毛、荚膜的示范片绘图、写实验报告第9页/共17页革兰氏（Gram）染色法1.涂片2.初染：在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液，染1分钟，倾去染液，流水冲洗至无紫色。3.媒染：先用新配的路哥氏碘液冲去残水，而后用其覆盖涂面1分钟，后水洗。4.脱色：除去残水后，滴加95%酒精进行脱色约15－20秒，后立即用流水冲洗。5.复染：滴加番红染色液，染3－5分钟，水洗后用吸水纸吸干。6.

镜检：观察染色结果并绘图。第10页/共17页枯草杆菌芽孢的观察第11页/共17页细菌鞭毛的观察第12页/共17页细菌荚膜的观察荚膜第13页/共17页五、实验结果记录所观察到的三种菌革兰氏染色结果的差别记录枯草杆菌Gram染色结果，并判断是阳性还是阴性第14页/共17页六、问题与讨论要得到正确的革兰氏染色结果必须注意哪些操作？哪一步是关键？Why?第15页/共17页内容回顾原理

细菌革兰氏染色的原理方法

细菌革兰氏染色的方法

简

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