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液相免疫沉淀试验液相内免疫沉淀试验絮状免疫沉淀试验免疫比浊试验透射免疫比浊试验散射免疫比浊试验抗原稀释法抗体稀释法方阵滴定法环状免疫沉淀试验(已不用)液相内免疫沉淀试验类型抗原稀释法
抗原倍比稀释抗体稀释法
抗体倍比稀释
抗原倍比稀释抗体倍比稀释方阵滴定法免疫浊度测定的基本原理注意事项
抗原或抗体量如果大大过剩,可出现可溶性复合物,造成假阴性。
应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。
易受到脂血的影响。单色器透射比浊计透射比浊原理示意图透射光(一)透射免疫比浊法透射免疫比浊法的优点:操作简便结果准确性较好灵敏度比单向免疫扩散法高5~10倍重复性好能自动化检测成本低不适合半抗原比如小分子药物的检测。缺点:单色器透射比浊计散射比浊计散射比浊和透射比浊的区别示意图θ透射光散射光散射光预反应阶段5ul样本抗原过剩区阈值信号反应阶段45ul样本7.5秒2分钟终点散射比浊法原理示意图抗原不过量抗原过量反应时间抗原浓度递增散射光峰值峰值信号与抗原抗体反应之间的关系图ABCDFGHI速率散射免疫比浊法反应最快的速率峰值通常出现在25s时。Ag-Ab复合物形成的时间与速率关系累计时间(s)形成复合物的量(μg)形成速率(μg/s)58-1015515251220603525150903023080353007040360604541555504504555480306050020Ag-Ab复合物形成的时间与速率关系λ光波dd<λ当粒子直径小于入射波长时呈全透射,透射与散射相当当粒子直径大于入射光波的1/20时,形成不对称前向散射,在90o以前的角度测量散射光皆取得最佳效果,散射光的量代表复合
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