肿瘤转移-课件

肿瘤侵袭invasion：肿瘤侵袭是指恶性肿瘤细胞从原发生长部位突破基底膜和/或细胞外基质屏障，侵犯毗邻的正常组织

肿瘤转移metastasis：肿瘤细胞能脱离原发癌灶，通过淋巴管或血管迁移至其它部位，形成新的继发灶的生长过程。

1第一页，共91页。恶性细胞侵袭生长与转移可视为统一过程的两个阶段。侵袭生长是肿瘤转移的前提，但未必发生转移；而转移可能是在瘤体达到一定数量和体积后才会出现，但必定包含一个侵袭过程。2第二页，共91页。第一节肿瘤转移的基本过程3第三页，共91页。肿瘤细胞的侵袭和转移是多因素、多步骤的复杂过程。

肿瘤转移是一系列相互作用和相互依赖的多个事件的连续过程，中断任何一步都会使转移停止4第四页，共91页。

肿瘤细胞增殖是肿瘤侵袭、转移的前提。不断增殖→肿瘤组织内部压力增高例外：

乳腺硬癌：生长不快，但侵袭明显乳腺纤维瘤：生长快，但不发生侵袭1、原发瘤的增殖扩展5第五页，共91页。2.肿瘤的血管生成

肿瘤直径大于1～2mm时，开始有新生微血管生长,转移发生在血管生成之后肿瘤细胞和宿主细胞分泌释放血管形成刺激因子和抑制因子，调节肿瘤血管形成6第六页，共91页。3.肿瘤细胞的分离脱落和对基质侵袭

肿瘤细胞间粘附性下降：

肿瘤细胞粘附分子的表达下降(E-Cadherin)肿瘤细胞间连接装置不发达(桥粒)肿瘤细胞表面负电荷增多钙离子浓度下降7第七页，共91页。肿瘤细胞与细胞外基质粘附肿瘤细胞产生多种ECM水解蛋白酶溶解ECM肿瘤细胞的运动性和趋化性肿瘤细胞的运动方式:原位移动、位移各种刺激肿瘤细胞运动的因子和趋化因子8第八页，共91页。4.进入脉管系统肿瘤血管为侵入基质的游离肿瘤细胞进入循环系统提供条件肿瘤组织的血管与正常血管差异显著9第九页，共91页。5.肿瘤细胞在血管中运行和锚定粘附肿瘤细胞-肿瘤细胞、肿瘤细胞-血小板形成瘤栓牢固附着在脉管内皮层,脉管内皮的损伤和基底膜的暴露——基础内皮细胞表面的选择素、CD44v等粘附分子参与较大的瘤栓被微小的脉管直接截获10第十页，共91页。

肿瘤细胞在循环系统的存活机率低<1‰原因：肿瘤细胞本身:①缺乏变形能力而难以顺利通过循环系统；②细胞由于分子生物学特性而不能与血液成分形成癌栓；③肿瘤细胞表面缺乏粘附因子的表达而不能有效地与血管内皮粘附结合等机体因素:①ADCC,NK细胞，巨噬细胞,LAK细胞,TIL细胞②血液的湍流和毛细血管的垂直压力对肿瘤细胞的损伤③细胞素刺激内皮细胞产生的一氧化氮对循环癌细胞的非特异杀伤。11第十一页，共91页。6.肿瘤细胞逸出循环系统肿瘤分泌多种蛋白溶解酶→降解基底膜,穿透基底膜ECM的多肽→阻止血行性转移12第十二页，共91页。7.肿瘤细胞定位生长肿瘤细胞与继发脏器细胞接触→自分泌、旁分泌或内分泌信号因子→单独或联合调控肿瘤增殖正调节信号和负调节信号处于一种动态平衡状态13第十三页，共91页。转移的休眠(domancy)肿瘤细胞在机体内持续存在而又没有明显生长(>2年)的状态。(黑色素瘤、乳腺癌切除多年后复发）停留于Go期，逃避机体杀伤作用肿瘤细胞分裂和死亡处于动态平衡肿瘤血管生成缺如正常的机体免疫功能状态14第十四页，共91页。第二节肿瘤细胞侵袭和转移的分子机制

15第十五页，共91页。

粘附：肿瘤细胞通过细胞表面粘附分子与细胞外基质(ExtracellularMatrix,ECM)间的粘附

蛋白水解酶的释放：肿瘤细胞分泌各种水解酶分解和破坏所粘附的部位

移动：水解酶类破坏所粘附的部位，使肿瘤细胞向纵深侵袭和转移Liotta等侵袭转移“三步”假说16第十六页，共91页。一、

粘附分子与肿瘤的侵袭转移

粘附分子：一类存在于细胞表面及ECM中，介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质粘附作用的糖蛋白等大分子在肿瘤细胞转移的每一环节都包含粘附17第十七页，共91页。细胞与细胞间的粘附

同源细胞间：E-钙粘素；肿瘤细胞脱落异源细胞间：选择素；肿瘤细胞与血小板、内皮细胞与基质细胞的结合细胞与细胞外基质间的粘附

细胞外基质：基底膜、细胞外纤维和基质肿瘤细胞主要通过整合素（integrin)与细胞外基质结合18第十八页，共91页。

粘附分类粘附:同质粘附：同源细胞间（瘤细胞-瘤细胞）异质粘附：细胞与细胞外基质或异源细胞间粘附：同嗜粘附：相同分子介导的粘附异嗜粘附：不同分子介导的粘附19第十九页，共91页。CAMs分类钙粘附素家族整合素家族免疫球蛋白超家族选择素家族未分类CD44

20第二十页，共91页。

钙粘附素（跨膜糖蛋白家族）

E-钙粘附素（E-Cadherin，E-Cd）:，介导Ca2+依赖细胞-细胞之间的粘附。分布于各种上皮细胞。

E-Cd通过连环素（catenin）α、β、γ经羧基端与细胞骨架的微丝连接形成复合体（E-Cd/Cat复合体），维持细胞间的粘附21第二十一页，共91页。E-Cd被认为是一种侵袭抑制分子，其基因也可能为转移抑制基因

E-Cd的表达程度及功能活动状态直接影响着肿瘤细胞的脱离和再附着。肿瘤细胞表面E-Cd的下调使瘤细胞间的粘附丧失，有利于瘤细胞脱离瘤母体及侵袭22第二十二页，共91页。E-Cd反义mRNA↘瘤细胞粘附↓→侵袭转移↑Ecd-MAb↗E-CdcDNA→瘤细胞粘附↑→侵袭转移↓肿瘤组织：E-Cd基因的突变或失活与侵袭能力密切相关23第二十三页，共91页。整合素（Integrins）整合素:由α、β亚基组成的异二聚体跨膜糖蛋白受体介导细胞与细胞外基质、不同细胞间的粘附直接介导肿瘤细胞与基质的粘附；通过信号转导调控细胞增殖；骨架变形和能量代谢；诱导蛋白水解酶的活化；启动细胞逃逸机制；抑制细胞凋亡24第二十四页，共91页。

整合素（Integrins）β1、β3整合素,主要介导细胞与ECM的粘附，其配体是ECM中的胶原、FN、LM、VN、纤维蛋白原β1整合素识别:ECM大分子中的RGD（Arg-Gly-Asp）序列含RGD序列的多肽能竞争性抑制细胞表面整合素与细胞外基质的结合和粘附，有效抑制恶性肿瘤的转移25第二十五页，共91页。β2亚家族整合素包括αLβ2(LFA-1)、αMβ2、αXβ2等只分布于白细胞，故又称白细胞整合素其配体为内皮细胞及肿瘤细胞上的ICAM它们介导白细胞-血管内皮细胞、白细胞-肿瘤的相互作用和T细胞的杀伤作用26第二十六页，共91页。(3)免疫球蛋白超家族

（immunoglobulinsuperfamily,IgSF）为跨膜蛋白，其结构特征为细胞外区有一个至数个免疫球蛋白样功能区

成员众多，其中16个与粘附有关

包括细胞间粘附分子（ICAM-1、-2、-3）神经粘附分子（NCAM）血管细胞粘附分子（VCAM-1）癌细胞借助不同的粘附分子参与肿瘤的转移过程

27第二十七页，共91页。ICAM整合素β2亚家族LFA-1的配体。分布于内皮细胞、血液细胞、T细胞、肿瘤细胞表面。肿瘤细胞的ICAM-1，可与白细胞粘附，有利于调动瘤细胞在血管内聚集及穿出血管壁NCAM最初发现表达于神经组织，表达于多种实体瘤，特别是神经源性和神经内分泌肿瘤，大部分SCLC表达NCAM，少部分NSCLC表达NCAM。参与肿瘤细胞信号传导和调控细胞增殖

VCAM-1表达于血管内皮细胞，与α5、4β1整合素互为受体,介导白细胞与内皮细胞之间的粘附。协助肿瘤细胞逸出循环系统28第二十八页，共91页。选择素家族（selectin）是一类以糖基为识别配体的粘附分子E-selectin细胞结合：肿瘤细胞与内皮细胞的粘附（锚定）L-selectin:肿瘤细胞与白细胞的粘附P-selectin：肿瘤细胞与血小板的粘附与肿瘤细胞转移的靶器官选择性有关

与循环瘤栓形成和逃避吞噬细胞的清除有关选择素的配体分布：肿瘤细胞、白细胞、血小板、血管内皮细胞表面及血清中某些糖蛋白分子29第二十九页，共91页。选择素受体通类凝集素样的结构识别肿瘤细胞上相应的糖抗原（唾液酸化或岩藻糖化，lewis，mucin）而起作用30第三十页，共91页。

CD44

CD44:由单一基因编码、具有高度特异性的单链跨膜糖蛋白。多功能的透明质酸受体

↗标准CD44（CD44s）—不含可变区CD44↘CD44拼接变异体（CD44v）—含有不同可变区在淋巴细胞、成纤维细胞和上皮细胞表面均有表达参与细胞与细胞、细胞与细胞外基质相互作用。CD44的配体:细胞外基质(透明质酸、层粘连蛋白、纤粘连蛋白和胶原蛋白等)31第三十一页，共91页。CD44v是促进肿瘤侵袭转移的主要粘附分子

CD44V6与肿瘤转移相关性的假说：CD44V6高表达的癌细胞可能获得淋巴细胞“伪装”，逃避人体免疫系统的识别和杀伤，更易进入淋巴结，形成转移CD44v6的cDNA转染非转移性肿瘤细胞系并使其过度表达，足以使后者获得转移特性。32第三十二页，共91页。二、细胞外基质降解与侵袭和转移

细胞外基质种类：基底膜

基板：致密的胶原蛋白（IV）结构（extracellmatrix）网板：网状纤维及基质

细胞外的纤维和基质

成分①胶原蛋白（已知14型）：I、II、III型为间隙（collagen）基质,IV型为基底膜②糖蛋白：包括Laminin（LN，层连蛋白）（glycoprotein）Fibronectin（FN，纤维连接蛋白）

③蛋白多糖:透明质酸,硫酸软骨素,肝素(Proteoglycan)

④弹性蛋白（elastin）33第三十三页，共91页。ConnectiveTissue34第三十四页，共91页。ECM来源：

宿主基质：宿主间质细胞/上皮细胞产生

（肿瘤细胞产生细胞因子刺激宿主间质细胞产生）肿瘤基质：肿瘤细胞分泌；

35第三十五页，共91页。细胞外基质降解蛋白酶系统:丝氨酸蛋白酶（如纤溶酶、纤溶酶原激活因子、弹性蛋白酶）基质金属蛋白酶

（如IV型胶原酶）天门冬氨酸蛋白(糖苷酶):如透明质酸酶、肝素酶等降解ECM蛋白多糖中的糖胺聚糖半胱氨酸蛋白酶（如组织蛋白酶B,D,L）36第三十六页，共91页。1.纤溶酶及其调节因子

纤溶酶由纤溶酶原激活纤溶酶原激活因子

（PlasminogenActivitor,PA）及其抑制物（PAI）调节纤溶酶活性PA属丝氨酸蛋白酶类：尿激酶型（u-PA）组织型（t-PA）PA来源：肿瘤细胞或其它细胞分泌37第三十七页，共91页。纤溶酶原→纤溶酶→降解ECM中的非胶原成分↑↘激活Ⅳ型胶元酶活化的u-PA（t-PA）↑纤溶酶（血）或组织蛋白酶B、L无活性的u-PA（肿瘤细胞或其它细胞）+u-PA受体（肿瘤细胞表面）促进肿瘤侵袭和转移:ECM降解、血管形成、细胞迁移、组织重建、细胞分化38第三十八页，共91页。PAIPAI属于丝氨酸蛋白酶抑制剂家族，PAI有PAI-1、PAI-2和PN-1三种亚型，由不同的细胞产生。PA与PAI以非共价健结合，形成复合物，特异性抑制PA的活性。

PAI的基因转导肿瘤细胞，明显抑制肿瘤细胞转移能力。动物实验显示PAI具抗肿瘤血管生成、抑制肿瘤生长的作用。PA/PAI系统在肿瘤血管新生和肿瘤侵袭、转移过程中有重要的作用39第三十九页，共91页。2.基质金属蛋白酶及其抑制剂(MatrixMetalloproteinase,MMP)

特点

MMP:一类需锌、铜等金属离子作辅基的蛋白酶,降解除多糖以外的所有ECM成分来源：成纤维细胞或基质细胞、巨噬细胞、内皮细胞、肿瘤细胞MMP以无活性的酶原形式分泌，通过结构的变化或有限的蛋白分解激活可以被其天然的抑制剂TIMP所抑制。40第四十页，共91页。CategoriesofMMPsNameMMP#Substrate胶原酶CollagenasesMMP-1,8,13typeI,II,IIIfibrillacollagen明胶酶Gelatinases(A&B)MMP-2,9typeⅣ、Ⅴ、Ⅶ、Xcollagen,Gelatin,fibronectin,laminin基质溶解素-11StromelysinsMMP-3,10,11proteoglycansglycoproteins基质溶解素-2

Matrilysin

MMP-7MMP-12fibronectin,lamininelastin膜型Membrane-typeMMP-14-17(MT-MMP)ProgelatinaseAprocollagenase3

41第四十一页，共91页。MMP与肿瘤转移：①肿瘤浸润、降解ECM和基质；②降解内皮下的ECM，进入血管或淋巴管；③在远处部位降解毛细血管内皮下的ECM，进入转移部位；④在转移部位的浸润MMPs除了有降解ECM的作用外，还有调节细胞粘附、促进血管形成、增强细胞运动性的作用

42第四十二页，共91页。TIMP蛋白产物特异性地下调MMP的活性，对于维持ECM的稳态具有重要意义。TIMP以1:1的非共价键的方式结合MMP，抑制MMP的活性。至少发现四种TIMP家族成员，即TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4。TIMP43第四十三页，共91页。TIMP与肿瘤TIMP-1在肿瘤细胞表达；TIMP-2在间质表达。TIMP-1、TIMP-2的表达与肿瘤的侵袭和转移呈负相关。外源性重组的TIMP-1或TIMP-2均可以使肿瘤细胞株的侵袭能力显著下降。TIMP基因转染的B16-F10细胞，肺内的转移结节小于未转染对照组TIMP-1的反义寡核苷酸能增加转染鼠3T3细胞株的侵袭能力。44第四十四页，共91页。MMPs活性的调节

转录水平的调节：多数MMPs基因的转录“具有可诱生性”的特征。诱导(IL4,IL10,EGF)或抑制因素，细胞与细胞、细胞与ECM基质的相互作用MMPs的激活:MT-MMP,纤溶酶特异性:基质金属蛋白酶组织抑制剂（TissueInhibitorofMetalloproteinase,TIMP）：MMPs的天然抑制剂,调节MMPs活力的关键因素非特异性蛋白酶抑制剂---抗肿瘤转移药物

45第四十五页，共91页。三、

癌细胞运动性与侵袭和转移肿瘤细胞穿过基底膜和间质基质时需要有活跃的细胞运动和蛋白水解作用瘤细胞在进出血管时表现出定向运动的能力肿瘤细胞运动：原位运动：伸出伪足→附着、穿透、侵入移位运动：细胞发生移位运动——Migration46第四十六页，共91页。肿瘤移动刺激因子刺激肿瘤细胞移动和侵袭的因子移动刺激因子（MSF）、自分泌移动因子（AMF）刺激肿瘤细胞生长和移动的因子肝细胞生长因子（HGF）或分散因子（SF）上皮细胞生长因子（EGF）胰岛素样生长因子（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）成纤维细胞生长因子（FGF）肿瘤坏死因子（TNF）白介素IL-1,-3,-6刺激细胞移动但抑制生长

转化生长因子（TGF）和干扰素（INF）47第四十七页，共91页。四、肿瘤血管生成和调节因子

48第四十八页，共91页。49第四十九页，共91页。新血管生成除血管生成因子外还涉及基质金属蛋白酶家族成员（MMP-2、MMP-9）、Integrin等，直接或间接引起血管膨胀、内皮细胞变形、毛细胞血管芽生。50第五十页，共91页。血管生成刺激因子

（VEGF及其受体）

VEGFR配体主要分布主要作用VEGFR-1VEGF-A、B肿瘤血管内皮调节肿瘤血管生成，影响微血管的量VEGFR-2VEGF-A、D原发肿瘤细胞调节肿瘤血管生成肿瘤血管内皮表面VEGFR-3VEGF-C、D淋巴内皮表面调节肿瘤淋巴管的生成51第五十一页，共91页。血管生成抑制因子

（血管抑素Angiostatin）Angiostatin：肿瘤细胞源性血浆纤溶酶原内部片段纤溶酶原经基质金属蛋白酶转化水解产生Angiostatin抑制内皮细胞增殖Angiostatin具有强大的抑制血管生成的作用Angiostatin显著抑制原发瘤和转移瘤的生长52第五十二页，共91页。血管生成抑制因子

（内皮抑素Endostatin）是胶原蛋白XⅧ的C末端片段特异性地抑制内皮细胞的增殖和迁移。引起内皮细胞在G1期发生阻滞和凋亡Endostatin与金属蛋白酶-2前体蛋白形成稳定的复合物，阻止其激活，是Endostatin抗血管生成的另一种机制53第五十三页，共91页。转移是一个连续的过程，只有极少数的肿瘤细胞能在循环中存活并发生致死性转移。发生转移的肿瘤细胞与宿主体内各种平衡因素之间的相互作用决定了转移的最终结果。54第五十四页，共91页。五、肿瘤转移的基因调控肿瘤转移与促进基因和抑制基因之间表达失衡相关不是所有的肿瘤都有转移表型，同种肿瘤细胞不同个体转移能力也不一样55第五十五页，共91页。1.肿瘤转移相关的基因

癌基因：H-ras基因:H-ras基因在多个环节影响肿瘤侵袭和转移(细胞外基质降解、改变微环境等)myc基因：N-myc-神经母细胞瘤、SCLCC-myc-NSCLC、乳腺癌

fos基因：v-fos导入转化大鼠细胞中，增加自发性肺转移率c-met基因:胃癌转移编码基因：CD44v、MMP、u-PA其他：Rho家族Ezrin蛋白与肿瘤转移相关的基因很多，但还没有严格意义上的转移基因56第五十六页，共91页。2.肿瘤转移抑制相关基因

抑癌基因：p53、p16;DCC、PTEN编码基因：Ecd、TIMP、CD44转移抑制基因：能直接抑制肿瘤转移形成的基因。抑制参与细胞转移连锁反应中的蛋白质或直接作用于转移相关基因的DNA、RNA的基因。

nm23、KAI157第五十七页，共91页。nm23：1988年，NCI在鼠黑色素瘤中发现(non-metastasis)。产物与二磷酸核苷激酶(NDPK)高度同源。参与粘附和跨膜信号调节(G蛋白)参与调节细胞内微管的解聚和聚合状态(提供GTP)。与分化和抑制肿瘤转移有关在啮齿类动物转移模型、细胞转染实验中，证明了nm23的表达水平与肿瘤细胞转移呈负相关。nm23的表达可因丢失、突变而失活。58第五十八页，共91页。TIMP基因：适合转移抑制基因的定义。体外转染和肿瘤标本显示，TIMP水平与肿瘤侵袭和转移呈负相关。TIMP基因定位于17q25，很多肿瘤患者在此区域有染色体缺失。KAI1转移抑制基因的表达下调可促进人前列腺癌、肺癌和乳腺癌的浸润。59第五十九页，共91页。第四节关于肿瘤转移的理论60第六十页，共91页。一、肿瘤遗传不稳定性和转移性癌细胞的发生肿瘤的异质性肿瘤细胞亚群在形态、生长速度、分化状态、抗原表达、遗传特性和生物学行为等方面各不相同，其中包括各肿瘤亚群的转移能力不同的特点，称肿瘤的异质性。是肿瘤选择转移部位、产生多样性表型的根本原因。61第六十一页，共91页。转移克隆的形成

转移性癌细胞克隆是由非转移性肿瘤细胞逐渐演进而来肿瘤在演进过程中不断使其恶性程度增加，转移能力也不断增加

肿瘤细胞遗传不稳定性而不断产生新的变异克隆肿瘤所在的微环境不断对肿瘤细胞施加影响，使肿瘤细胞出现适应性变化不一定来源于肿瘤生长过程高转移克隆.肿瘤干细胞62第六十二页，共91页。肿瘤转移的器官选择性:不同来源的肿瘤细胞有其容易发生的特定脏器转移

“机械和解剖”学说:以器官的血流和淋巴的引流方向解释转移

“种子与土壤”学说:特殊的癌细胞(种子)在适宜的环境(土壤)生长发展

二、肿瘤转移的器官选择性63第六十三页，共91页。1.肿瘤转移器官选择性规律

肿瘤细胞的血行转移或淋巴道转移并不总是循着血流或淋巴液流动方向到达相应的脏器。

原发肿瘤常见的继发转移器官

乳腺癌骨、脑、肾上腺前列腺癌骨肺小细胞癌骨、脑、肝

皮肤黑色素瘤肺（95%）、脑眼脉络膜黑色素瘤肝（100%）甲状腺癌骨肾透明细胞癌骨、肝、甲状腺睾丸癌肝膀胱癌脑神经母细胞瘤肝、肾上腺64第六十四页，共91页。2.肿瘤转移器官选择性的影响因素

原发瘤细胞的生物学特性:分化程度、恶性程度、生长速度基因表达及各种调控信号分子的表达细胞表面结构、受体种类和分布：趋化因子受体:它及其配体在引导这些细胞向淋巴组织或器官归巢中起主导作用。CCR7，CXCR4

器官内皮细胞表达特异性粘附分子，而肿瘤细胞则产生这些粘附分子的特异性配体得以实现的65第六十五页，共91页。组织器官的微环境差异

微环境对转移肿瘤细胞具有特殊亲和力组织结构和功能细胞外基质微环境中的细胞因子、生长因子及激素刺激肿瘤表型发生改变，影响肿瘤细胞稳定性，促进或抑制转移性肿瘤的存活和生长化学趋化因子:微环境的酸碱度、氧供因素局部免疫免疫状态66第六十六页，共91页。趋化因子:CXCCCCCX3C趋化因子受体:CXCRCCRCRCX3CRInhumans

morethan:50chemokinesand18receptorsReceptoractivationinducesdirectionalmigrationtowardagradientofachemokineprotein[chemotaxis]

67第六十七页，共91页。趋化因子及其受体与肿瘤的侵袭转移

靶器官特异性表达的多种趋化因子与肿瘤细胞所表达的相应受体相互作用，在肿瘤细胞迁移、侵袭和转移过程中有着重要的作用CCR7和CXCR4：乳腺癌组织及乳腺癌的转移瘤CXCR5：在肺癌的转移CXCR9：前列腺癌的转移68第六十八页，共91页。四、干细胞学说与肿瘤转移“种子”—肿瘤干细胞—迁移的特性“土壤”—肿瘤干细胞niche—化学趋化因子预转移龛(pre-metastaticniche(转移前微环境)(Nature,2005,438:820):骨髓中表达VEGFR1的造血前体细胞(PHC)归巢(homing):趋化因子和趋化因子受体肿瘤转移的器官趋向性基因与肿瘤转移的标签基因不重叠69第六十九页，共91页。70第七十页，共91页。五、失巢凋亡抗性anoildsresistant

锚着依赖性(anchoragedependence)失巢凋亡（homelessness)：上皮细胞及内皮细胞一旦脱离了细胞外基质则会发生程序性死亡避免无赖细胞(roguecells)在正确解剖位置以外的地方建立克隆。转移细胞对失巢凋亡以及凋亡本身产生高度高度抗性71第七十一页，共91页。六、上皮间充质转化

(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)

EMT：肿瘤细胞通过去分化由多边形上皮样形态转变为梭形间叶性细胞形态，获得更具运动能力的表型形态扁平细胞粘附分子(如E-钙粘蛋白)表达减少角蛋白细胞骨架转化为波形蛋白肿瘤细胞间的同型粘附降低细胞骨架重排，细胞极性改变获得穿越基底膜游走至间质或远端其他组织的能力获得凋亡抗性72第七十二页，共91页。研究肿瘤转移的动物模型动物自发瘤、动物诱发瘤（少用）动物移植瘤免疫缺陷性动物模型:GFP标记转基因肿瘤转移动物模型原位移植瘤异位移植瘤73第七十三页，共91页。转基因(transgenic)肿瘤转移动物模型①基因定位转导诱发特定组织及器官的肿瘤，继而发生肿瘤远处转移②具有恒定性和可遗传性③诱发肿瘤宿主自身肿瘤，排除以往肿瘤动物转移模型的非规范因素，诸如组织不相容性导致的排斥反应④通过插入标记基因，使肿瘤除表达肿瘤本身应有的各类特异性或相关性标记外，还表达标记基因抗原74第七十四页，共91页。荧光标记的肿瘤移植瘤模型:

活体内可连续、重复、动态观察肿瘤细胞生长及转移过程的方法。75第七十五页，共91页。Externalwhole-bodyimagesoftheBxPC-3-GFPprimarytumorcomparedwithinternalimages.A,fluorescentimagesoftheprimarypancreatictumor(P),omental(O),bowel(B),andspleen(S)metastases.B,animageofthesamemouseafterlaparotomyinternallylocalizedtheexternalimagesofmetastatictumors.BxPC-3-GFPhumanpancreaticcarcinoma76第七十六页，共91页。