发酵罐的操作流程

一•目的：为了确保发酵产品安全正常生产，立一•目的：为了确保发酵产品安全正常生产，立50L发酵罐设备标准操作规文件名称50L发酵罐操作规程文件编号2014111102编制人张婉月徐洁严梦迎臧*陈孝颜编制日期2014/11/11页码/页数程。适用范围：50L发酵罐的操作责任人：1、实验员：负责生产现场水、电、气及生产设备的正常使用使用生产用原辅料及检测设施。2、指导老师：指导学生了解发酵设备结构，熟悉掌握发酵操作规程，安全使用发酵罐系统。3、操作者：遵守安全管理规定，严格按照标准操作规程操作。发酵罐内部构造示意图发酵罐内部构造示意图第一步、准备工作检查压力表是否为零，若不是则开对应的阀门调零。检查阀门是否为关闭状态，若不是则顺时针旋转关闭。检查蒸汽发生器上的压力表不得低于0.2MPa。检查空压机的压力表不得低于0.2MPa。校正温度和pH电极：温度用沸水或冰水校正，pH用标准溶液校正。检查发酵罐的密封性:关F21,F16,开Fll,F15,使发酵罐的压力表为O.IMPa,保持5min再关Fll，F15。第二步、空气管道的消毒打开F3,F14,微开F12,F13（转两圈），等到F4均匀的蒸汽时，关闭F13,F12，微开F14，调节F3,使空气管道的压力表维持在0.1MPa,30min关F14,F3。开F11,F14,使空气管道压力保持在0.1MPa,当有F14干燥冷空气排出时,微开F14,调节F11，使空气管道的压力保持在O.1MPa。第三步、空消开F4,F22,排冷凝水，当F22有均匀蒸汽排出时，关F22,开F21,F16,排空气，当F16有均匀蒸汽排出时，发酵罐的压力为O.IMPa。微开F16，调节F21（关F21或F4）,使发酵罐压力保持在O.1MPa。30min.关F21、F4,大开F16进行泄压，使发酵罐压力到微正压0.02〜O.O3MPa,再关F16.第四步投料第五步、实消开F2,F37(排污管)，F16，打开手动搅拌，当发酵罐内温度达到80—90度时，关F2,F37，手动搅拌。开F4,F22，排冷凝水，当F22有均匀蒸汽出现时，关F22,开F21。当F16有均匀蒸汽出现时，关F16，当发酵罐压力升到O.IMPa时，微开F16，调节F21，使发酵罐压力保持在O.1MPa,30min。关F21,F4。然后大开F16泄压到微正压(0.02-0.03MPa)。再关F16.

第七步、冷却开F33,F32（通夹套冷却水），在控制面板上开手动冷却，手动搅拌。当发酵罐压力降至0.05MPa时，微开F15,调节F11,空气管道压力回升到O.IMPa。

关F15，调节F11。罐内压力保持在微正压，当温度降到90度时，关手动搅拌，大开F15，同时调节F11，使空气管道压力保持在O.IMPa。•开F16，泄压到发酵罐的压力至微正压。当温度降至设定温度时，关F33,F32，关F16,,调节F11、F15，至F15完全关掉，使空气管道压力保持在0.1MPa，微开F16，泄压到微正压，关F16。第八步、接种用酒精棉球擦洗双手和种子罐（由上到下）在接种圈内滴加酒精并点燃，围在接种口处带上隔热手套，用扳手将螺帽拧下，过下火焰之后放在干净器皿中将接种瓶在火焰旁拔下棉塞，瓶口过下火焰，之后迅速悬空倒入发酵罐内,将接种瓶放一旁。用扳手夹住螺帽过下火焰，之后拧紧并用湿抹布熄灭接种圈内的火焰。第九步、保温•在控制面板上的加热打到自动上，开F32

第十步、取样准备好已消毒的空三角瓶将三角瓶上的报纸拆掉，用手压住纱布，然后开F21,F22,先流掉一部分,之后用三角瓶悬空接溶液，并迅速塞上纱布。关F21，再开F4进行消毒灭菌，之后关F4,F22。注意事项:最高工作压力不大于0.2Mpa，进罐空气压力应不大于0.2Mpa，最高消毒温度为126培养基装量：5L罐最高不超过4L,10L罐最高不超过8L，最少装量以所有的电极都没于液面以下为准。在过滤器消毒时，流经空气过滤器的蒸汽压力应在0.12〜0.14MPa之间，最高不得超过0.17MPa。压力过低将造成灭菌不彻底，压力过高则空气过滤器滤芯有可能被损坏而失去过滤能力。在实消结束后冷却时，发酵罐内严禁产生负压，以免损坏设备或造成污染。开始控温前把注水开关打开，确保夹套中有