高中生物-动物细胞融合和单克隆抗体教学课件设计

2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体高考链接考点内容能力要求高考实例预测热度动物细胞工程细胞融合和单克隆抗体Ⅱ2016年高考江苏单科（2分），2016课标全国卷（15分），2015年安徽理综(9分)三星级学习目标：举例说明动物细胞融合和单克隆抗体制备的原理和应用温故知新1970年，科学家利用红绿荧光素分别标记人鼠细胞，并加入细胞融合剂进行诱导，在荧光显微镜下观察，开始时细胞膜一半呈红色，一半绿色，40分钟后，两种颜色均匀分布。分析资料并回答以下问题1、人鼠细胞融合过程原理是什么？2、融合的结果是什么，其具有什么特点？3、归纳比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的原理、融合前的处理、诱导方法和意义细胞膜的流动性人鼠杂交细胞，其具有两个细胞的遗传信息，表现两细胞的遗传特性。打破了有性杂交的局限克服远缘杂交不亲和的障碍意义物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较融合前处理用纤维素酶、果胶酶去壁用胰蛋白酶使细胞分散4最大用途是制备单克隆抗体强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞抗体是由________分泌的而每一种B淋巴细胞只能分泌_______种特异性抗体，但该种细胞在体外________（能，不能）无限增殖。已知回顾效应B细胞(浆细胞）一不能一1、抗体的传统生产方法抗原反复注射动物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。如何解决这个问题呢？单克隆抗体！一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术单克隆抗体

既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念

人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。2、单克隆抗体的概念单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体阅读课本52-54页第一自然段，并结合图2-24，思考以下问题（4分钟）①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？②诱导融合时，会得到几种细胞（只考虑两两融合），几种两两融合细胞？③杂交瘤细胞是如何筛选出来的？其有何特点？④第一次筛选出的杂交瘤细胞是同种吗，如何进行第二次筛选？⑤如何扩大培养得到大量的单克隆抗体？多种细胞诱导小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞特定抗原小鼠脾脏杂交瘤细胞第一次筛选选择性培养基专一抗体检验阳性细胞产生特异性抗体的杂交瘤细胞体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体克隆化培养第二次筛选3、单克隆抗体制备流程腹水培养液3、两次筛选的目的各是什么？

第1次筛选得到杂交瘤细胞，第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。总结升华：1、本过程利用了哪些技术？

动物细胞融合和动物细胞培养技术2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？

这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体4、单克隆抗体的特点是什么？特异性强、灵敏度高，可大量制备二、单克隆抗体的应用1、诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。2、治疗疾病和运载药物主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。生物导弹=单克隆抗体＋药物生物导弹起导向作用，药物为弹头1、单克隆抗体中药物可选择性杀伤乳腺癌细胞吗？2、与放疗和化疗相比，利用单克隆抗体进行靶向治疗，有什么优点？B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC

下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。1、该实验方案的目的是__________3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______5、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以后的的细胞属于细胞系。B细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代50有梦想，才会有创造！

已成功的动物细胞融合实例有很多，如人—小鼠、人—兔、人—鸡、鼠—