《医学细胞生物学》实验教学大纲（供本科临床医学、麻醉学等专业使用）

PAGE《医学细胞生物学》实验教学大纲（供本科临床医学、麻醉学等专业使用）Ⅰ前言通过实验课的学习验证理论，从而使学生学到的知识更为巩固；通过亲自动手操作，得到比较全面的细胞生物学基本操作技术的训练；掌握基本操作规范，进行基本实验技能的训练；并熟悉基本的细胞生物学实验方法技术。本大纲适用于本科临床医学、麻醉学、法医学、医学影像学、口腔医学、医学检验技术专业使用。将大纲使用中有关问题说明如下：一为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解，教学内容与教学要求对应，并统一标示（核心内容及知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示），便于学生学习重点知识。二教师在保证教学大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，坚守重点内容和介绍一般内容。三总教学参考学时为24学时。四教材：《医学细胞生物学实验教程》，王乾兴、路健主编，人民卫生出版社，第一版，2016年。Ⅱ正文实验一：细胞内脂类的显示线粒体的活体染色一教学目的使学生了解细胞化学法的原理，并能灵活运用；掌握脂类、线粒体在细胞中的分布情况。二教学要求（一）掌握线粒体、脂类在细胞内的分布情况（二）熟悉细胞化学法的运用（三）了解线粒体的活体染色方法；了解苏丹Ⅲ进行脂肪细胞染色的方法三教学内容（一）细胞内脂类的显示实验原理实验步骤：1断头处死小白鼠，取材2固定3染色4观察（二）线粒体的活体染色与观察实验原理实验步骤：1滴染的规范操作2口腔黏膜上皮细胞活体取材方法3盖上盖玻片；4镜检实验二：细胞膜的通透性观察小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察一教学目的通过本次实验使学生掌握实验的基本技能。训练学生自己动手，观察血细胞在各种液体环境（各种等渗溶液）中是否发生融血现象，以此理解细胞膜对不同性质和不同大小分子量的物质的通透性；通过小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验，观察理解细胞的吞噬运动。二教学要求（一）掌握细胞膜对不同性质和不同分子量大小的物质的通透性（二）掌握小鼠腹腔剖开方法；腹腔液取材方法（三）熟悉细胞的吞噬运动过程三教学内容（一）细胞膜通透性的实验观察实验原理实验步骤：110％鸡红细胞悬液的制备方法2将兔红细胞分别放于不同等渗溶液中，观察溶血现象3总结兔红细胞对不同物质的通透性（二）小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察实验原理实验步骤：1巨噬细胞的诱生2腹腔注射鸡红细胞悬液3规范处死小鼠4取材：剖开小鼠腹腔5镜检：观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程实验三：动物细胞融合动物细胞微丝的观察一教学目的通过本次实验使学生掌握实验的基本技能。掌握细胞融合的概念、融合细胞的识别；了解聚乙二醇（PEG）诱导体外细胞融合的基本原理。观察微丝在细胞内的分布情况。二教学要求（一）掌握细胞融合的概念、融合细胞的识别；动物细胞微丝的染色方法（二）了解聚乙二醇（PEG）诱导体外细胞融合的基本原理；微丝在细胞内的分布情况三教学内容（一）细胞融合实验原理实验步骤：1制备鸡红细胞储备液210％鸡红细胞悬液的制备方法3红细胞的洗涤与沉淀4PEG诱导细胞融合的方法5终止PEG的作用6收集细胞7滴片、染色8镜检、计数（二）动物细胞微丝的观察实验原理实验步骤：1取材2抽提3洗涤4固定5洗涤6染色7镜检实验四：细胞核的分离与鉴定细胞内过氧化物酶的显示一教学目的使学生掌握细胞核的分离过程及鉴定方法；学会使用离心机和匀浆器；掌握细胞化学法在过氧化物酶显示中的应用二教学要求（一）掌握分离细胞核的原理；过氧化物酶原位显示的原理（二）熟悉细胞核的鉴定方法（三）了解过氧化物酶体的原位分布三教学内容（一）细胞核的分离与鉴定实验原理实验步骤：1处死动物2取肝脏组织、洗涤3匀浆的规范操作方法4离心5染色6洗涤（二）细胞内过氧化物酶的显示实验原理实验步骤：1制片：眼眶取血的规范操作2固定3显色4洗涤5复染；复染的意义实验五：设计性实验讨论课一教学目的通过讨论，使学生了解科研工作的基本程序，培养学生的综合能力。二教学要求（一）通过讨论，帮助学生解决实验设计过程中的疑惑（二）通过讨论，使学生明白科研实验的基本思维（三）通过讨论，使学生得到全方位的综合训练三教学内容（一）讲解设计性实验的概念、特点、教学目的与要求（二）观摩和讨论实验设计报告，使学生得到综合训练（三）课堂报告和讨论1学生汇报设计报告：根据各班情况分组，每组15min2讨论设计报告：每组10min（四）总结：进行综合训练内容的讲解1科学实验的基本思维2科学实验设计的原则3确定实验方案实验六：设计性实验操作课一教学目的使学生了解细胞凋亡的不同检测方法，并选择最常用的方法进行实验，以验证自己设计的实验是否正确、合理；通过实验，观察细胞凋亡现象。二教学要求（一）掌握TUNEL法检测细胞凋亡的基本原理和方法（二）了解细胞凋亡的检测方法及其在科研中的应用三教学内容根据学生讨论后确定的实验方案进行实验操作，注意在带教过程中进行规范性操作的指导，注意解答学生在实验操作过程中所出现的理论或实践问题。

四基本技能：1正确使用显微镜的方法2培养学生在光学显微镜下区分细胞与非细胞的能力，认识不同细胞种类的形态结构特征3要求学生明白什么情况下才能看到细胞和细胞结构4正确处死动物的方法5正确的取材方法，如眼眶取血、取股骨、取腹腔液等6正确的制片方法7线粒体活体染色的方法8规范的组织匀浆方法Ⅲ教学组织与方法一实施机构：由基础医学院细胞生物学教研室执行。二组织内容：组织进行教案讲义审核、听理论课、实验教学观摩、试讲、集体教学备课、教学方法研究、教学手段改进等。三教学方法：1实验教学：采用启发式、讨论式等教学方式，辅助传统教学手段。2教学地点：实验教学在形态实验室完成，实验教学的指导教师由细胞生物学教研室承担。3辅导形式：课堂提问、答疑、讨论、小结、批改试验报告、试验报告讲评等形式结合。四考核办法：实验成绩占总成绩的20％，其中课堂参与占40％，考勤纪律占30％，实验报告占30％。实验考核不合格者不能参加理论课考试Ⅳ