弧菌科常规检验课件

弧菌科常规检验弧菌科常规检验1弧菌科种类弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属发光菌属等弧菌科种类弧菌属弧菌科共同特征革兰阴性菌需氧兼性厌氧营养要求不高氧化酶＋发酵葡萄糖产酸不产气弧菌科共同特征革兰阴性菌弧菌科三个菌属的鉴别试验弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属甘露醇+/-+-鸟氨酸+/--+精氨酸+/-+/-+O/129敏感SRSTCBS生长+--嗜盐性+/---弧菌科三个菌属的鉴别试验弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属甘露醇+/霍乱弧菌是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体包括古典生物型和ElTor生物型O139是新的流行菌株霍乱弧菌是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体形态染色革兰阴性弧形或逗点状单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样”无芽孢，无荚膜在新鲜粪便中成“鱼群样”排列形态染色革兰阴性霍乱弧菌革兰染色鞭毛染色霍乱弧菌革兰染色鞭毛染色培养特性兼性厌氧营养要求不高耐碱不耐酸，常用pH8.4～9.2碱性培养基在液体培养基中形成菌膜菌落圆形、较大、扁平培养特性兼性厌氧霍乱弧菌常用培养基碱性蛋白胨水碱性琼脂平板硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾）霍乱弧菌常用培养基碱性蛋白胨水生化反应试验名称结果试验名称结果氧化酶+吲哚+硝酸盐还原+葡萄糖+赖氨酸+蔗糖+鸟氨酸+甘露醇+精氨酸双水解-0％、1％NaCl+V-Pd7％、10％NaCl-明胶液化+生化反应试验名称结果试验名称结果氧化酶+吲哚+硝酸盐还原+葡霍乱弧菌生物型O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生物型两种生物型具有相同的抗原结构两种生物型多数生物学性状相似霍乱弧菌生物型O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生物型霍乱弧菌两种生物型的鉴别鉴别试验古典生物型ElTor生物型V-P-+羊红细胞溶解-+50U多粘菌素SR鸡红细胞凝集-+Ⅳ组噬菌体裂解+-Ⅴ组噬菌体裂解-+霍乱弧菌两种生物型的鉴别鉴别试验古典生物型ElTor生物型V霍乱弧菌分群、型O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础根据O抗原不同分为139个血清群O1群包括古典生物型和ElTor生物型其他群称为非O1群（非凝集弧菌）O1群血清型（见下表）血清型A抗原B抗原C抗原小川型（AB）++-稻叶型（AC）+-+彦岛型（ABC）+++霍乱弧菌分群、型O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础血清型A抗原B抵抗力与变异ElTor型抵抗力较古典型强，在水中存活时间长对酸性物质敏感对庆大霉素耐受多次传代可失去典型形态而成为杆状抵抗力与变异ElTor型抵抗力较古典型强，临床意义致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮细胞分泌功能亢进，分泌大量肠液。所致疾病：经肠道传染，引起烈性肠道传染病－－霍乱，为甲类传染病。典型病人粪便呈“米泔水”样病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。临床意义致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮细胞分泌功能亢进，作用机制示意图作用机制示意图弧菌科常规检验课件微生物检验－－标本采集发病早期采集标本以“米泔水”样便为主，及时送检卡－布培养基保存严密包装，专人送检微生物检验－－标本采集发病早期采集标本检验程序标本增菌培养碱性蛋白胨水分离培养（TCBS、碱性平板）生化鉴定分型血清学鉴定确诊报告初步报告快速诊断直接涂片动力、制动试验检验程序标本增菌培养分离培养（TCBS、碱性检验方法－－显微镜检查涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注意形态、排列动力观察：压滴法或暗视野镜检，注意运动方式制动试验：O1诊断血清与菌体结合，动力消失检验方法－－显微镜检查涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注意形分离培养标本接种碱性蛋白胨水增菌6～8小时，转种TCBS或庆大霉素琼脂，TCBS：出现黄色菌落庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落分离培养标本接种碱性蛋白胨水增菌6～8小时，转种TCBS或庆鉴定生化反应：粘丝试验、霍乱红反应确定血清群：O1群诊断血清与可疑菌落作玻片凝集，以确定是否为O1群确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以确定血清型别确定生物型：第Ⅳ组噬菌体裂解试验多粘菌素B敏感试验鸡红细胞凝集试验溶血试验鉴定生化反应：粘丝试验、霍乱红反应副溶血性弧菌－－生物学性状革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽孢，无荚膜营养要求不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5％NaCl，无盐培养基不生长TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落神奈川现象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔红细胞，不溶解马红细胞副溶血性弧菌－－生物学性状革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无副溶血性弧菌－－临床意义致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和耐热相关溶血素）所致疾病：食入副溶血性弧菌污染的盐腌食品，引起食物中毒副溶血性弧菌－－临床意义致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和耐气单胞菌属形态染色：革兰阴性杆菌，或球杆状、丝状，极端鞭毛，无芽孢生长条件：兼性厌氧；营养要求不高生长温度较宽，0℃～45℃嗜冷菌37℃以下生长嗜温菌10～42℃生长气单胞菌属形态染色：气单胞菌属生长现象TCBS上不生长血平板：灰白、光滑、凸起菌落肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落生化反应氧化酶＋、触酶＋发酵葡萄糖产酸产气6.5％NaCl不生长O129不敏感多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药气单胞菌属生长现象气单胞菌属－－临床意义致病物质：溶血毒素、细胞毒素所致疾病：肠道感染：是夏季腹泻常见病原菌肠外感染：败血症、伤口感染等多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药气单胞菌属－－临床意义致病物质：溶血毒素、细胞毒素检验程序标本增菌分离培养（血平板、Mac）全面生化反应可疑菌落肠毒素测定初步生化反应涂片染色镜检血标本氧化酶TCBS生长O/129耐盐试验检验程序标本增菌分离培养全面生化反应可疑菌落鉴定试验与肠道杆菌、非发酵菌鉴别与邻单胞菌属和弧菌属鉴别气单胞菌属种间鉴别鉴定试验与肠道杆菌、非发酵菌鉴别肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/发酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛单、丛、周单、丛肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科鉴定依据革兰阴性杆菌，丛鞭毛肠道选择平板上无色透明菌落氧化酶＋、葡萄糖发酵＋O/129：RTCBS：－6.5％NaCl：－鉴定依据革兰阴性杆菌，丛鞭毛邻单胞菌属－－主要性状只有一个菌种：类志贺邻单胞菌革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽孢，无荚膜兼性厌氧，营养要求不高在SS平板形成不发酵乳糖菌落氧化酶＋，葡萄糖发酵＋O/129：STCBS：不生长6.5％NaCl：不生长赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均＋多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药邻单胞菌属－－主要性状只有一个菌种：类志贺邻单胞菌邻单胞菌属－－临床意义腹泻、食物中毒，多见于夏季败血症、脑膜炎等，多见于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高。邻单胞菌属－－临床意义腹泻、食物中毒，多见于夏季邻单胞菌属－－检验程序标本增菌分离培养（血平板、Mac）全面生化反应可疑菌落初步