红曲霉菌株发酵制备-氨基丁酸保健饮料的研究

红曲霉菌株发酵制备-氨基丁酸保健饮料的研究

氨基丙烯酸（gaba）广泛存在于自然界。这是一种由非蛋白质组成的天然氨基酸。在哺乳动物脑内的含量很高,尤其是高等动物的脑内,它是中枢神经系统的一种抑制性化学递质,具有抑制血管紧张素转化酶(angiotensin-convertingenzyme,ACE)的活性1材料和方法1.1实验田、培养基高产GABA红曲霉菌株吉林农业大学生物工程实验室;碧螺春绿茶、菊花茶长春市中东大市场;荷叶、山楂百草大药房;玉米须吉林农大玉米实验田;纯净水市购。发酵培养基:改良PDA液体培养基;展开剂:正丁醇-冰醋酸-水=4:1:3(V/V);洗脱剂:0.001g/mLCuSOγ-氨基丁酸上海KAYON试剂公司;葡萄糖、NaNO1.2天平-a-a全温摇瓶柜、水浴设备开发722E型可见分光光度计上海光谱仪器有限公司;立式压力蒸气灭菌器上海华线医用核子仪器有限公司;电子分析天平德国赛多利斯股份公司;HYG-A全温摇瓶柜江苏太仓试验设备厂;电热恒温鼓风干燥箱、DK-S28水浴上海新苗医疗器械制造有限公司;台式离心机上海安亭科学仪器厂;智能生化培养箱宁波海曙赛福实验仪器厂;无菌操作台苏净集团安泰公司。1.3方法1.3.1抗高血压功能：准备饮料的过程1.3.2gaba产量测定将高产GABA红曲霉菌株接入改良PDA固体平板培养基中,恒温箱30℃活化培养72h。制备改良PDA液体培养基1000mL,每250mL锥形瓶中装入50mL,分装20瓶灭菌,取上述活化的直径8mm红曲霉菌饼接入培养基,pH值自然,40℃条件下120r/min摇床发酵培养48h取发酵液分析检测GABA产量1.3.3测试GABA的含量测量采用改良纸层析法1.3.4饮料准备1.3.4.菊花玉米须的制备按绿茶与水的比例为1:50称取20g绿茶,用1L沸水煮沸5min后加入白砂糖80g,搅拌溶解后过滤,得茶汁备用。精确称取菊花6g,沸水煮沸5min后过滤,将滤液继续加热浓缩至300mL,备用。由于玉米须为野外采摘,所以应先用清水清洗,去除泥土、沙石及其他杂质,再用2%食盐水浸泡10~20min,用以清除上面的病菌、虫卵及残留的农药,然后再用清水漂洗,烘箱烘干。按比例称取一定量干荷叶、山楂、玉米须,水煎30min后过滤备用。1.3.4.2配置为使本发酵饮料中GABA的含量较高,调配采用L1.3.5菌种活化与培养将调配好的饮料基液加纯净水至100mL,密封后在0.1MPa压力下,121℃高压灭菌20min,而后待冷却至室温时在无菌操作台分别接入活化72h的直径为8mm的菌饼,然后在40℃条件下,120r/min摇床发酵培养48h。1.3.6测试将发酵培养48h的发酵液同样用改良后的纸层析法进行测定,选取GABA含量最高的组作为该发酵饮料的原料配比最佳方案。1.3.7味道很好为使配制的发酵饮料的色、香、味达到理想程度,口味的调配采用L1.3.8消毒将调配好的9组发酵饮料密封后,于0.1MPa、121℃高压灭菌4min,或者高温瞬时杀菌5s,冷却后即为成品。1.3.9评估标准对饮料进行感官评价评分,评分标准如表3所示。2结果与分析2.1不同浓度gaba含量的发酵饮料由表4可知,通过发酵饮料4种原料配比正交试验,测定各试验组GABA含量,发酵饮料中影响GABA产量的顺序为C>B>A,即荷叶-山楂-玉米须提取液>菊花>茶汁。根据单因素和极差分析统计结果确定最佳配比方案为A2.2饮料配方的确定由表5可知,通过对发酵饮料选定的白砂糖、香精、抗氧化剂、茶汁进行四因素三水平正交试验,确定影响该饮料口味的主要因素主次为A>D>B>C,即白砂糖>茶汁>香精>抗氧化剂。根据单因素和SPSS统计软件极差分析,确定最佳口味调配方案为A3gaba发酵饮料的制备工艺及配方优化本实验采用高产GABA红曲霉菌株进行发酵获得大量GABA发酵物,制备的发酵饮料主要降压物质为GABA,含量0.26g/L,制备的发酵饮料具有降压保健作用。据相关研究资料表明,连续服用GABA可有效抑制血压上升,长期饮用富含GABA的饮料,对平稳血压具有更明显的保健作用富含GABA发酵饮料的研制中,原料工艺优化通过正交试验确定最佳原料配比为绿茶汁50%、菊花提取液8%、荷叶-山楂-玉米须提取液14%。感官口味调配优化通过正交试验确定最佳配比为白砂糖7