牛磺酸对克氏原螯虾生长性能、非特异性免疫以及肝胰脏抗氧化能力的影响

牛磺酸对克氏原螯虾生长性能、非特异性免疫以及肝胰脏抗氧化能力的影响

0水生动物的种类牛磺酸是一种含有硫酸钠的小分子非物质。化学名称为-氨基乙磺酸（h）。牛磺酸作为一种优质的绿色饲料添加剂，在畜禽动物营养上得到了广泛应用，但有关牛磺酸在水生动物方面的研究相对比较少，特别是对甲壳类水生动物的研究。克氏原螯虾(Procambarusclarkii)，别称红螯虾、淡水小龙虾，隶属螯虾科。它是生长于淡水中的一种甲壳类动物，其原产于美国南部和墨西哥北部，20世纪30年代从日本传入中国，经过长时间的繁衍扩展，其种群数量开始大幅上升，生存空间也不断扩大，现已经成为中国重要的经济水产养殖对象。随着克氏原螯虾养殖密度和饲料投喂量的逐步增大，养殖水体环境和虾体体质开始出现各类问题，导致养殖病害频发，而化工环境型改良药物和各类抗生素的过度使用会造成化学有害残留和抗生素耐药性等一系列问题，所以相应的营养调控解决思路日益受到重视1材料和方法1.1等氮等能饲料根据克氏原螯虾的营养需求，按照表1的配方标准配制其全价配合饲料，各组饲料中牛磺酸的添加量分别为0、100、200、300、400mg/kg，制作5种不同牛磺酸含量的等氮等能饲料。实验所有饲料均由江苏牧羊公司的专业克氏原螯虾膨化饲料制粒机加工制成，满足克氏原螯虾的基本营养需求，同时饲料在网箱中的耐水时间达到4小时以上；养殖实验前期（克氏原螯虾的平均体重小于20g）选用颗粒直径为2.0mm的饲料，后期逐步改用颗粒直径为3.0mm的饲料。1.2生长性状实验所用的克氏原螯虾苗种均取自北京桑普生物化学技术有限公司小龙虾养殖实验基地，捕苗时间在4月13日，虾苗暂养驯化7天后，选用品质优良、规格基本一致的克氏原螯虾虾苗作为实验对象，平均体重为(4.5±0.5)g。实验设5组，每组设3个平行，共计15个网箱(规格为2m×2m×2m)，每个网箱中放养20只克氏原螯虾，网箱均匀放置于总面积约为6670m1.3样品的采集和检测1.3.1克氏原螯虾的数量和重量实验持续养殖4周，检测前一天停止投喂，分别统计各网箱中克氏原螯虾的数量和重量，记录每个网箱投喂饲料的总用量，计算成活率、增重率、出肉率以及饵料系数。各生长指标的计算分别见公式(1)～(5)。1.3.2血液生化指标采样时，从各网箱中随机挑选6只克氏原螯虾，用一次性医用注射器在头胸部的围心腔内采血，将采集好的血液存放于无菌离心管，在4℃冰箱中静置1～2h后，以4℃3000r/min离心10min制备血清，用于总蛋白(TP)、溶菌酶(LSZ)、谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)的测定。血浆TP浓度的测定运用考马斯亮蓝染色法，再使用南京建成生物工程研究所的试剂盒来检测其他指标。1.3.3液氮冻存和保存虾体采血后立即剖开头胸甲，剥离出肝胰脏，用生理盐水将肝胰脏组织冲洗干净，然后用滤纸吸去表面的水分，取适量的肝胰脏样品放入冻存管中置于液氮中速冻，然后保存于-20℃冰箱中。将肝胰脏样品进行解冻，然后冲洗干净称重，将肝胰脏与匀浆液按1:9(w:v)的比例进行冰浴匀浆，于4℃下以4000r/min离心10min，然后取上清液用于谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的测定，使用南京建成生物工程研究所的试剂盒来检测各项指标。1.4数据处理与分析实验数据均以“平均值±标准差”表示，采用SPSS22.0统计软件对实验数据进行单因素方差分析和Duncan氏多重比较，检验各组间的差异；当P<0.05时，统计结果具有统计学意义。2结果与分析2.1两组患者增重率、成活率以及出肉率比较由表2可知，饲料中添加不同水平的牛磺酸对克氏原螯虾的生长均有一定的影响，其中添加200、300mg/kg牛磺酸对克氏原螯虾有明显的促进生长的效果。300mg/kg组的增重率、成活率以及出肉率分别较对照组提高了31.85%、23.41%、26.35%，饵料系数较对照组降低了22.17%，具有统计学意义上的差异(P<0.05)。200mg/kg组的增重率和出肉率分别较对照组提高了17.18%和18.27%，具有统计学意义上的差异(P<0.05)。100、400mg/kg组的增重率、成活率、出肉率、饵料系数同对照组的差异不具有统计学意义。2.2蛋白浓度水平比较由表3可知，200、300mg/kg组克氏原螯虾的溶菌酶和蛋白浓度的水平均高于对照组，其中溶菌酶活性分别提高了47.17%、62.74%，蛋白浓度水平分别提高了14.33%、18.78%，具有统计学意义上的差异(P<0.05);200、300mg/kg组克氏原螯虾的血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性均低于对照组，其中谷丙转氨酶活性分别下降了39.62%、52.40%，谷草转氨酶活性分别下降了53.98%、59.93%，具有统计学意义上的差异(P<0.05)。2.3谷胱甘肽对大鼠歧化酶活性的影响由表4可知，200、300mg/kg组克氏原螯虾的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性均高于对照组，其中超氧化物歧化酶活性分别提高了6.61%、7.53%，过氧化氢酶的活性分别提高了79.87%、118.48%，具有统计学意义上的差异(P<0.05)；其中300mg/kg组谷胱甘肽的活性最强，相比对照组提高了37.51%，具有统计学意义上的差异(P<0.05);300mg/kg组丙二醛的含量最低，但丙二醛的含量在各组间差异不具有统计学意义。3讨论3.1牛磺酸含量对降低原头虾的生长性能有影响关于日粮中添加牛磺酸可以促进水产动物生长的研究已经报道了很多。赵小锋等3.2牛磺酸含量对降低原头虾的活性作用水产动物的血液是其机体组织最为关键的生理生化指标，主要运用血液成分相关参数的变化规律来评估水产动物的免疫健康状况3.3生物毒性物质动物在进行新陈代谢的过程中，活性氧自由基的生成和消除通常保持着动态平衡状态，这种状态一旦遭到破坏，机体内脂质会在过多自由基的作用下发生过氧化反应，其中具有较大生物毒性的MDA是此反应的主要生成物质，该毒性物质会对机体细胞造成伤害4未特异性免疫和肝胰腺肝脏抗氧化