17种杀菌剂对生姜茎腐病菌的室内毒力测定及田间防效

17种杀菌剂对生姜茎腐病菌的室内毒力测定及田间防效

姜干腐烂病通常被称为“姜干腐烂性肌腱病”。这是由大约25%的腐败引起的疾病。1907年，这一疾病首次报道在印度苏拉特。现在，它通常发生在印度、日本、印度尼西亚、柬埔寨、澳大利亚、夏威夷、澳大利亚、兰西斯、韩国、台湾和其他国家和地区。近年来,该病在山东省的莱芜、安丘等地危害逐年加重,田间发病率达5%～80%,减产20%～30%,重病田块甚至绝产,给姜农带来巨大损失。其危害已远远超过姜瘟病,成为制约当前生姜产业健康发展的主导因素之一。为了能够有效地防控该病的危害,笔者测定了17种杀菌剂对该病的防治效果,取得了较好的结果,现报道如下。1材料和方法1.1其他可湿性制剂供试病原菌:生姜茎腐病菌(PythiummyriotylumDrechsler),由莱芜市农科院分离鉴定。供试培养基:PDA培养基,按文献所述方法配制。供试杀菌剂:68%精甲霜·锰锌水分散粒剂(先正达作物保护有限公司);44%精甲·百菌清悬浮剂(先正达作物保护有限公司);50%乙铝·锰锌可湿性粉剂(威海韩孚生化药业有限公司);95%恶霉灵粉剂(威海韩孚生化药业有限公司);50%多菌灵可湿性粉剂(威海韩孚生化药业有限公司);53.8%氢氧化铜干悬浮剂(美国杜邦公司);68.75%氟菌·霜霉威悬浮剂(法国拜耳作物科学公司);80%代森锌可湿性粉剂(天津人农药业有限责任公司);70%甲基硫菌灵可湿性粉剂(美国丽波科学国际有限公司);72%锰锌·霜脲氰可湿性粉剂(济南浦田生物科技发展有限公司);50%烯酰吗啉水分散粒剂(美国迪克生物科技(青岛)发展有限公司);10%敌磺钠可湿性粉剂(山东神星药业有限公司);70%代森锰锌可湿性粉剂(河北张家口金赛制药有限公司);75%百菌清可湿性粉剂(山东大成农药股份有限公司);90%三乙膦酸铝可溶粉剂(上海华泰农药有限公司);20%异菌·多菌灵水悬浮剂(烟台绿云生物化学有限公司);10%三唑酮乳油(台湾独资(河南)力克化工有限公司)。药剂配制均用灭菌蒸馏水。1.2测试方法1.2.1相对抑制率测定采用菌落生长直径法测定。将各供试药剂用无菌蒸馏水配成所需浓度的10倍液,分别取1mL加入到培养皿中,然后再添加定量的事先溶化好的PDA培养基并混匀,使各药液在培养基中的浓度为其推荐使用浓度(表1)。在平板中央接种直径5mm的菌饼,每处理重复3次,以不加药剂的PDA培养基为对照,25℃下培养30h后测量菌落直径,计算各药剂对菌丝体生长的相对抑制率。菌落直径=测定菌落直径―菌饼直径(0.5);相对抑制率=对照菌落直径—处理菌落直径对照菌落直径×100%。相对抑制率=对照菌落直径—处理菌落直径对照菌落直径×100%。1.2.2测定菌力及确定添加量a选用由1.2.1筛选出的对生姜茎腐病菌相对抑制率达100%的杀菌剂为供试药剂,按梯度配制成不同浓度,按1.2.1所述方法进行试验,25℃下培养30h后测量菌落直径,计算各药剂对菌丝体生长的相对抑制率,以药剂浓度的对数值为自变量x,以菌丝体抑制百分率的几率值为因变量y,计算出毒力回归方程和相关系数R,根据回归方程计算出EC50。1.2.3田间发病情况调查根据1.2.1毒力测定结果,选用毒力较强的药剂进行田间小区防治试验。每种药剂设置3个浓度:1、2、3g/L,以不施用任何药剂为空白对照,每小区面积为15m2,重复4次。用药方法为药剂浸种和灌根相结合。①药剂浸种:姜种催芽前,分别用不同浓度的药液对姜种进行浸种30min,晾干后,催芽、播种。②药剂灌根:在生长期,从6月30日开始,每隔7d灌药一次,连续施药3次。分别于用药前和用药后7d调查田间发病情况,并计算各处理的病情指数和防效。病情严重度按0～4级标准分级。0级:整株姜苗不发病;1级:整株病苗率0～10.0%;2级:整株病苗率10.1%～30.0%;3级:整株病苗率30.1%～70.0%;4级:整株病苗率70.1%～100%。根据调查结果,按照下面公式计算病情指数及防治效果,统计分析不同药剂、不同浓度间防治效果差异。病情指数=∑[各级病株数×相对级数值]调查总数×4×100；防治效果=对照病情指数-处理病情指数对照病情指数×100%。1.2.4数据分析采用SPSSPASWStatisticsV18.0软件对数据进行统计分析。2结果与分析2.1种抗菌剂的抑制率按1.2.1所述方法,测定了参试药剂对生姜茎腐病菌菌丝体生长的抑制作用,结果见表1。统计分析表明,参试的17种杀菌剂中有8种对生姜茎腐病菌菌丝体表现出了较强的抑制作用,相对抑制率达到100%。这8种杀菌剂多为传统保护性杀菌剂和防治霜霉目真菌用的药剂,或是两者混配的药剂,而广谱性杀菌剂20%异菌·多菌灵在所设置的浓度下,对茎腐病菌菌丝体的生长无抑制作用,多菌灵的抑制作用也在10%以下。熏蒸性杀菌剂三乙膦酸铝和土壤消毒剂恶霉灵的抑制作用也很弱,其抑制率分别为19.19%和47.47%。其他杀菌剂对生姜茎腐病菌的生长虽表现出一定的抑制作用,但效果均低于精甲霜·锰锌等8种药剂。2.2各组药剂的毒力比较将上述试验筛选出的8种药剂,按梯度配制成不同浓度,测定其对生姜茎腐病菌的毒力,结果见表2。统计分析表明,所选8种杀菌剂对生姜茎腐病菌的毒力差异显著,其中毒力最强的为精甲霜·锰锌和锰锌·霜脲氰,其EC50分别为9.77μg/mL和14.95μg/mL,两者差异不显著,烯酰吗啉亦有较好的毒力,其EC50为38.61μg/mL。毒力最差的为乙铝·锰锌,其EC50高达370.34μg/mL。代森锌、甲基硫菌灵、敌磺钠和代森锰锌对病菌的毒力差异不显著,其EC50在46～59μg/mL之间。精甲霜·锰锌与锰锌·霜脲氰均为代森锰锌与防治霜霉目真菌药剂的混配制剂,烯酰吗啉为防治霜霉目真菌用的单剂,3种制剂均对生姜茎腐病菌具有较强的毒力。从测试结果还可以看出,各杀菌剂的毒力回归方程中,以精甲霜·锰锌和锰锌·霜脲氰的斜率值最大。这表明提高这两种药剂的单位浓度,药剂对病原菌的抑制作用增效明显,适宜用于生姜茎腐病的防治。而抑制作用较差的乙铝·锰锌,不仅EC50较高,而且斜率值较小,随药剂浓度的提高,对病原菌的抑制作用变化较小,因此,不适宜用于防治生姜茎腐病。2.3精甲霜锰锌霜脲氰水分散粒剂的防效根据上述试验结果,选用68%精甲霜·锰锌和72%锰锌·霜脲氰进行了田间药效测定。调查结果见表3。分析表明,68%精甲霜·锰锌水分散粒剂对生姜茎腐病防治效果较好,相同处理浓度下其防治效果均显著高于72%锰锌·霜脲氰可湿性粉剂。68%精甲霜·锰锌水分散粒剂第1次用药后7d,3g/L处理的防效达到50.36%,而72%锰锌·霜脲氰可湿性粉剂的防效仅为29.86%。随着用药次数的增加,两种药剂不同浓度下的防治效果均呈提高趋势,第3次用药后7d,68%锰锌·精甲霜水分散粒剂的防效为81.45%,可显著地抑制该病的发生,72%锰锌·霜脲氰可湿性粉剂的防效为47.09%,防效增强趋势不明显。可见,68%精甲霜·锰锌水分散粒剂是比较理想的防治生姜茎腐病的化学药剂,较适宜的浓度为3g/L,施药方法为在催芽前进行浸种30min,并在生长期连续进行至少3次的灌根处理,间隔时间为7～10d。3传统保护性药剂与传统保护性药剂混配对葡萄安全性的提高生姜茎腐病是近几年在我国生姜产区新发生的一种病害,目前尚不清楚各种杀菌剂对它的防治作用,在部分发病区,人们应用氯化苦熏蒸处理土壤,显示出了较好的防治效果,但该方法操作复杂,危险性大,成本昂贵,推广范围受限。本项研究发现,将传统保护性杀菌剂与防治霜霉目真菌的杀菌剂进行合理混配后,对该病具有显著的防治效果,如精甲霜·锰锌、锰锌·霜脲氰、烯酰吗啉对该病菌的抑制效