微生物学实验一

第第页微生物学实验一微生物学试验

试验室须知

1.应保持试验室宁静，切勿高声喧哗和任意走动。2.试验室内禁止饮食、吸烟、及用嘴潮湿铅笔和标签等物。3.运用显微镜和其它珍贵仪器时，应在老师同意后方可运用，切勿擅自拆卸，否那么因此而损坏仪器，应予以赔偿。4.遇意外发生，应马上报告老师，不可自己任意处理。

试验室考前须知：1.每次试验前需要仔细预习，课堂上留意倾听老师对试验内容的讲解，留意观测老师的示范操作。2.试验时应认真仔细，严格按操作规程进行，留意转变生活中的习惯动作，以掌控微生物学试验的科学操作方法。3.运用珍贵仪器应先事先熟知操作规程，遇仪器故障时请老师援助解决。4.试验中如遇菌液外溢、皮肤划伤或菌液吸入等意外，应马上报告老师实时进行处理，不得隐瞒，以免酿成后患。5.留意安全，易燃物品如二甲苯、吸水纸等应远离火源。打火机只能用于点燃酒精灯，酒精灯用完应实时盖上灯帽。6.试验完毕，需要将仪器放到指定地点，带菌工具应先进行消毒。

试验室考前须知：7.试验需进行培育的材料，要标明姓名、组别、日期后，放于老师指定的培育箱中进行培育。8.未经老师同意，试验室中的任何菌种和物品不得携带出室外。9.试验时应仔细进行观测和操作，做好试验记录；有疑难问题向老师求教。10.励行节省，对水、电、染色液、镜油、擦镜纸、吸水纸及其它药品等均应节省运用。11.试验后应对试验室整理清扫，洗手后方可离开试验室，关窗锁门。

微生物学试验室常用的器皿1.试管2.吸管3.培育皿4.三角烧瓶5.载玻片与凹玻片–一般载玻片用于微生物涂片、染色，作形态观察等–凹玻片是在一块厚玻片的当中有一圆形凹窝，作悬滴观测活细菌以及微室培育用。6.滴瓶：用来装各种染料、生理盐水等7.接种工具：接种环、接种针等

常用器材酒精灯接种环试管夹吸耳球计数器镊子香柏油擦镜纸1/人1/人1/人1/2人1/2人1/2人1/2人1/2人

试验报告格式基本信息的填写(不能留空)。题目目的原理材料和器皿试验报告需要以实事求是、严厉认真的科学立场，根据指导书的要求按时完成。试验报告应当言简意赅、表达精确、数据完整、绘图清楚且写实，应有争论、有分析，结论明确。

方法和步骤试验结果–画图–文字描述分析和争论思索题

清洁与卫生保持试验台的清洁与试剂架的整齐干净。废纸、培育基等废弃物一律丢入垃圾桶内，严禁放入水槽！培育皿、玻片、试管等玻璃仪

器清洗后一律搁置凉在不朽钢网框里。玻片上的染液需要彻底清洗洁净(用洗衣粉洗)。培育皿、试管等玻璃仪器上做的标记需要彻底洗净。最终垃圾由值日生倒入卫生间箩框里，湿拖把挂在水槽水龙头架上滴水凉干。每次值日生4人。

实

验

内

容

试验一显微镜油镜的运用及细菌的简约染色法试验二细菌的革兰氏染色及芽孢染色法试验三鞭毛染色法及活细菌运动性的观测试验四四大类微生物菌落及个体形态观测试验五微生物大小测定及血球计数板计数试验六培育基配制及灭菌试验七微生物的分别纯化与平板菌落计数试验八微生物的生理生化反应(一)试验九微生物的生理生化反应(二)

试验一显微镜油镜的运用及细菌的简约染色法教学目标或要求：※掌控显微镜油镜的工作原理及运用方法；※学习细菌制片和简约染色技术；※观测细菌的三种基本形态；※初步建立无菌操作的概念；

一般光学显微镜

一般光学显微镜依据物镜与被检物体之间的介质不同，可分为：①干燥系物镜。以空气为介质，包括低倍物镜(4*、10*)和高倍物镜(40*)。②油浸系物镜。常以香柏油为介质，此物镜又叫油镜头(100*),其上常刻有“HI”(homogeneousimmersion)或“OI”(oilimmersion)字样，有的还刻有一圈红线或黑线标记。

油镜运用的原理油镜的透镜很小，光线通过玻

片与油镜头之间的空气时，因介质密度不同，发生折射或全反射，使射入透镜的光线减削，

物象显现不清。假设在油镜与载玻片之间加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏油(n=1.515),那么使进入透镜的光线增多，视野亮度加强，使物象明朗清楚。

瞳距调整

粗调松紧调整旋钮

聚光镜中心调整②10*物镜①标本

④聚光镜升降旋钮

油镜观测操作方法在高倍镜或低倍镜下找到要观测的样品区域后，然后将油镜转到工作位置。在待观测的样品区域滴加香柏油，从侧面凝视，用粗调整器使油镜浸在镜油中并几乎与标本相接。然后用细调整器调整，在目镜下找到

最合适的观测点。油镜运用毕后：上升镜筒，取下载玻片，用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸蘸少许二甲苯(香柏

油溶于二甲苯)擦去镜头上残留的油迹，最末用洁净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。

一般光学显微镜考前须知1.观测标本时，两眼宜同时睁开。减削眼睛疲惫。最好用左眼观测，右眼协作绘图和记录。2.运用油镜需要按先用低倍镜和高倍镜观测，再用油镜观测。3.下降镜头时，肯定要从侧面凝视，切忌用眼睛对着目镜，边观测边下降镜头的错误操作，

以免压碎玻片而损坏镜头。4.运用二甲苯擦镜头时，留意二甲苯不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。5.留意保持显微镜的干净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头需要用擦镜纸，切勿用手或用一般布、纸等，以免损坏镜头。

显微结构图的绘制(1)绘图要用黑色硬铅笔，不要用软铅笔或有色铅笔，一般用2H铅笔为宜。(2)画图时先用轻淡小点或轻线条