HIV筛查实验室规章制度样本

HIV筛查实验室规章制度样本

一、实验室工作制度

1、热爱党，热爱社会主义，坚持四项基本原则，全心

全意为人民服务。

2、努力学习政治，刻苦钻研业务，发扬救死扶伤，实

行革命人道主义，对病人如亲人，态度和蔼，有问必答。

3、热爱本职工作，服从分配，遵守劳动纪律，做到不

迟到、不早退，不擅自离开工作岗位，不私自干私活。

4、严格执行规章制度，尽职尽责，及时做好各项检验

结果记录，自觉抵制不良之风。

5、识大体，顾大局，关心集体，团结友爱，不背后议

论，搬弄是非。

6、讲究文明礼貌、积极参加爱国卫生运动，美化环境,

保持医院科室整洁，安静、大方。

7、HIV筛查实验室应制定严格的管理制度和标准化操作

规程，工作人员必须充分了解各项规定并严格遵照执行。

二、岗位责任制

1、岗位责任制是保证工作质量和医疗安全，提高工作

效率的重要环节。建立岗位责任制，做到人人分工职责明确,

事事有人负责，立足本职，团结互助，相互协调，保证各项

任务的胜利完成。

2、HIV筛查实验室由有实践经验的技术人员负责。

3、牢固树立把质量放在第一位的思想，在工作中必须

加强检查和复查制度，以保证血液质量及医疗安全。

4、交接工作必须认真负责，须核对实物和记录，对工

作一般情况、存在问题和注意事项应进行具体交待，否则，

发生问题由交班人负责。

5、职工临时因故离开工作岗位，必须将工作委托给能

胜任该项工作的人员，否则，发生问题由原担任该项工作者

负责。

6、新参加工作的职工，在未熟悉和掌握工作前不能独

立工作不能顶岗位，在确能掌握经考核合格后方可。

7、建立HIV筛查实验室专用的精密仪器和重要设备专

责岗位制，其他人不得任意使用。严格按照仪器操作规程操

作，不可擅自乱改设置。

8、凡是一物多人使用的，除共司负责外，应指定一人

为该岗位责任制负责人，负责指导正确操纵，定期安全检查,

经常维护保养，保持正常运转，该负责人有权制止任何违章

操作和有害设备安全的行为。

9、人员职责分工：

每日正班人员负责样品的采集，接收，执行检验任务，

做好检验记录，填报检验数据，签发报告及实验室仪器设备

的日常维护和保养。

副班人员负责协助正班人员做好实验室的所有日常工

作，并负责对检验工作质量的监督，检验报告的复核、发放,

结果的解释，实验室室内消毒以及每日医疗废弃物的消毒处

理。

实验室负责人负责检验资料的归档保管（计算机）工作。

三、标本管理制度

（一）、样品的采集和处理

艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全

血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用的血液样品的

采集和处理方法如下：

1、血清样品采集和处理

（1）、用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静

脉血，室温下自然放置1〜2h,待血液凝固、血块收缩后再用

3000r/min离心15min,吸出血清备用。

（2）、如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规

进行消毒，在刺破皮肤后，迅速把滤纸片沾上，切勿让血液

滴落在其它物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包

装送检。

2、抗凝血样品采集和处理

（1）、用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽

取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管)，反复轻摇，分离血

浆和血细胞备用。

(2)、应根据实验要求选用适当的抗凝剂，如CD"CD8T

淋巴细胞测定可选用LEDTA或肝素或枸檬酸钠，HIV病毒分

离、核酸定性/定量检测灯选用LEDTA或枸檬酸钠。

(3)、用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在4~

8h内分离PBMC和血浆，否则应在24〜48h内分离血浆和血

细胞。

3、采集样品注意事项

(1)、采集样品原则上应按临床采血技术规范操作。

(2)、采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及

蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾

滋病(AIDS)病人血液/体液的操作，应戴双层手套。

(3)、所有的血液、血清、未固定的组织和组织液样品，

均应视为有潜在传染性，都应以安全的方式进行操作。

(4)、应象操作未知传染风险样品一样，小心存放、拿

取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。用后的

包裹应进行消毒。

(5)、采血时一定要注意安全，采血用一次性注射器，

谨慎操作，防止发生刺伤皮肤和造成外界污染。

(6)、离心机要使用密闭的罐和密封头，以防液体溢出

或在超/高速离心时形成气溶胶。

（二）样品的保存

1、用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以

下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8℃。

2、用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于

-20℃以卜，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上

应置于-80℃。

3、用于CD；/CD；T淋巴细胞测定的样品不能长期保存，

样品采集时间超过48h则不可检测。

（三）样品的运送

1、实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况

外一般不运送全血。

2、应采用阳0提出的三级包装系统：

第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的

试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者

姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,

以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。

第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一

层容器，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的

容器内，容器的材料要易于消毒处理。

第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。

在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。

3、血清和血浆样品应在2〜8℃条件下由专人运送。用

于CD"CDrT淋巴细胞测定的样品应在室温下18〜23c运送。

每一包装的体积以不超过50ml为宜。

4、运送感染性材料必须有记录。

5、如分离血浆仍有困难，可直接将抗凝血-20℃以下冻

存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。

6、特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快

专递形式投寄，但必须按三级包装系统将盛样品的试管包扎

好，避免使用玻璃容器，以保证不会破碎和溢漏。

（四）样品的接收

1、含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备

的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用

后的包裹应进行消毒。

2、核对样品与送检单，认真核对标本上病人姓名、年

龄、性别、病区、床号、住院号是否与申请单符合。检查样

品管有无破损和溢漏，如发现溢漏应立即将尚存留的样品移

出，对样品管和盛器消毒，同时报告有关领导和专家。

3、检查样品的状况，观察标本的量、标本类型、是否

抗凝或有小凝块样品，记录有无严重溶血、微生物污染、血

脂过多以及黄疸等情况，判断标本是否符合检验要求。如果

污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃。

并要将样品情况立即通知送样人。

4、打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。样品处

理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进

行。同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。

5、因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光

方法测试。

6、接收样品时应规范填写样品接收单。

7、不符要求的标本，必须及时填写退回理由单，及时

通知送样人，说明情况，重新留取。不符要求的标本与可疑

含有感染性样品用后的包裹同检验后的标本一样进行消毒

或无害化处理后废弃。

（五）标本检测

1、离心机要使用密闭的罐和密封头，以防液体溢出或

在超/高速离心时形成气溶胶。复核标本接收过程中的每一

步骤，在检测过程中，应严格按照标准化操作规程。

2、在标本足够的情况下，不能浪费、随意丢弃或损坏

标本。应象操作未知传染风险样品一样，小心存放、拿取和

使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。用后的包裹

应进行消毒

（六）、标木处理

检验标本先用含2-3g/L有效氯消毒剂浸泡半小时，再

用高压锅高压消毒。然后用双层专用黄色医用垃圾袋专人收

集所有废弃医用垃圾。送专门存放医用垃圾处统一焚化处

理。并做好登记。

四、试剂管理制度

（一）、采购与审批

科主任根据需要定期拟定采购计划，交由院领导审批，

批核后由科主任与供应商联系进货。

（二）、验收与登记

仓管负责人根据供应商提供的试剂及清单对数量、品

种、品牌、包装等进行验收，并将入库数据登记。

（三）、贮存

冷藏试剂统一存放在HIV实验室专用的冰箱内，冷箱保

管及温度控制由仓管负责人负责。HIV试剂一般应2〜8℃避

光保存，在有效期内使用。

（四）、出库管理

各室提出试剂申领，仓管人填写出库单据，认领人签名

后出库。

（五）、其它

1、试剂的保存应严格按照要求存放，以保证有效期内

能有效地使用，杜绝浪费现象。

2、仓管人应对试剂库存定期检查，不使用过期变质的

试剂。

3、易燃，易爆试剂应分开存放远离火源和电源。

4、剧毒试剂必须由科主任和负责科室保卫的同志负责

保存，放保险箱内，使用时应有两人在场，并做好登记。

五、环境消毒隔离制度

1、实验室应分为清洁区和操作区，清洁区要注意俣护

不受污染。操作有气溶胶可能的标本应配置生物安全柜及其

它防护设置，如紫外线灯，排气扇等操作区的工作台及地面

每日用消毒液擦拭一次，有污染时随时消毒，每周大扫除一

次。

2、采血室每日操作前用清水擦拭操作台一次，采血结

束用消毒液擦拭操作台、桌子和地面一次，紫外线每日照射

消毒二次，每月空气细菌培养一次，紫外线强度定期测定。

3、各种检验标本的收集，送检必须用相应指定的容器

留取，不得外溢污染。

4、静脉及末稍采血，应严格执行消毒隔离措施，静脉

抽血做到一人一针一筒一巾一带一消毒，所用止血带及纸垫

每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜绝交叉污染。

5、一次性医用器具包括采血针，注射器、尿杯、血红

蛋白微量吸血吸管，应严格做好领发登记，注射器先浸泡消

毒后由供应室一对一调换，统一处理，其余一次性器具浸泡

消毒后装入污物袋送焚烧炉焚烧。

6、检验人员在进行静脉抽血时应严格遵守无菌操作技

术，操作前必须洗手必须戴好帽子与口罩，操作台和手被污

染时应用肥皂和流水认真洗手，必要时用消毒液浸泡双手,

酒精、碘酒瓶每周更换消毒两次。

7、溢出试管外的血液，应立即用碘酒棉签擦拭干净，

注意防止玻璃碎片刺伤手，并注意试管有无破裂。

8、当针头和碎玻璃刺伤手时，用流水冲洗，挤出血水，应

立即用碘酒消毒局部。

9、实验室操作时应戴上手套。吸取标本，离心振荡等应

严格按操作规程，防止自身和实验室受污染。

10、已检查标本与容器分别浸泡于次氯酸钠(2000mg/L)

中两小时后，标本倾弃，一次性容器送焚烧，重复使用的经

清洗消毒和灭菌后再使用，均要有记录。有毒化学试剂和放

射性试剂使用后要经无害化处理，防止污染环境。

11、非科室工作人员不准进入实验室，外来人员参观需

经科主任同意方可进入。

六、实验台消毒措施

1、实验台消毒措施必须符合艾滋病实验室的通用生物

安全要求。由专人按特定程序和方法进行清洁和消毒。

2、台面的清洁消毒，保持清洁、湿式打扫。每天开始

工作前用湿布抹擦1次，地面用湿拖把擦1次，禁用干抹干

扫。抹布和拖把等清洁用具实验室专用，不得混用，用后洗

净晾干，下班前用含氯消毒剂(次氯酸钠，含有效氯

2000mg/L).0.2〜0.5%过氧乙酸或75%乙醇抹擦1次。也可

用便捷式高强度紫外线消毒器近距离照射消毒。

3、应象操作未知传染风险样品一样进行消毒与灭菌，

小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的血液、质量控制

和参考物质，若被上述物品明显污染，如具传染性的标本或

培养物外溢，溅泼或器皿打破，洒落于台面，应立即用消毒

液消毒，用5000mg/L有效氯消毒剂、过氧乙酸或乙醇洒于

污染的台面，并使消毒液浸过污染表面，保持30〜60min

后再擦，拖把用后浸于上述消毒液内lh以上。

4、各类在实验室实验台上操作后的废弃物品均应视作

物染物分类处理，所有废弃物应视为HIV污染物品，按照《传

染病防治法》处理。

七、废弃物处置和实验室消毒

1、废弃物处置

废弃物处置应符合《实验室生物安全通用要求》(GB

19489-2004)和《消毒技术规范(2002年版)沆

从艾滋病实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的样

品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专

用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，并在高压消毒后再

进行处理或废弃。

2、HIV常用的物理消毒方法

压力蒸汽消毒，毒1℃,保持15〜20min;

干燥空气烘箱消毒（干烤消毒），140C,保持2〜3h。

3、HIV常用的化学消毒方法

H1V最常用的化学消毒剂是含氯消毒剂（次氯酸钠，含

有效氯2000~5000mg/L）.75%乙醇和2%戊二醛，保持10~

30mino

4、废弃物缸：5000mg/L次氯酸钠。

5、生物安全柜工作台面和仪器表面：75%乙醇。

6、溢出物:5000mg/L次氯酸钠。

7、污染的台面和器具：2000mg/L次氯酸钠，也可以用

过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛浸泡消毒。

八、消毒液的配制及使用措施

1、HIV实验室最常用的化学消毒剂是含氯消毒剂（次氯

酸钠,含有效氯2000-5000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保

持10-30mino

2、含氯消毒剂的配制：次氯酸钠原液使用前进行1：20~

1：50稀释（2000-5000mg/L）或联昌84使用前进行1：10~

1：25（2000-5000mg/L）稀释后,用于实验室内的消毒。

3、乙醇，俗称“酒精”，能够杀灭多种细菌，对HIV病

毒有一定的杀灭作用，70〜75%的效果最好。因此，使用前

新鲜配置足量70〜75%的乙醇，用于生物安全柜、工作台面

和仪器表面的消毒，可以达到最佳的消毒效果。

4、过氧乙酸也是目前使用比较广泛的一种高效消毒剂,

新鲜配置1〜3%的过氧乙酸熏蒸，用于地面、墙壁、实验器

材及实验室内资料、文件、书本等物品的消毒。0.04%的过

氧乙酸用于实验室工作人员手浸泡1〜20分钟，再用肥皂洗

手。

5、2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒，医疗器械等。

6、HIV实验室常用化学消毒剂的配置，本着多用多配，

少用少配，现用现配的原则，保证消毒剂使用时的浓度，保

证消毒效果。

九、消防安全制度

1、根据“谁主管、谁负责”的原则，实行科室负责制。

2、主管领导和保卫科对全体职工经常进行消防安全教

育，提高思想认识，掌握消防知识和消防器材的使用。

3、严格执行《安全防火管理制度》各种火种与易燃易

爆物品，必须严格分区，保持一定的安全距离。实验室实施

单向流向制度，通道不得乱堆放易燃爆物品和杂物。

4、严禁在实验室内吸烟。

5、电器的安装与拆除，必须由电工进行，严禁乱接电

源，乱后电线。

6、各种机电设备、高温电器设备、耐高压容器和设施,

使用时必须有专人负责，随时检查，消除隐患，严防事故发

生。

7、各防火区域设置的消防器材和设备，应定期进行检

查，维修和更换，随时处于完好状态，并不得随便挪动。

8、任何人发现火、水灾等隐患者，必须及时向科领导

报告。科主任及时向院领导报告，及时做好善事处理工作。

十、生物安全防护制度

1、上岗工作人员应是经过岗前安全与技术培训I,取得

合格证，具有独立工作能力的人员。

2、进入实验室应穿隔离衣、戴手套，必要时（如对筛

查阳性标本进行复测或检测高危标本）要戴防护眼镜，防止

污染暴露的皮肤和衣物。

3、严格按照操作规程操作。操作过程中，不得用戴手

套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。

4、操作时可能发生的触电、失火、玻璃割伤、针头刺

伤、烧伤、不慎中毒、传染性标木的污染，有应急处理的方

法，有关工作人员均应熟悉。

5、操作中手套破损，应立即丢弃，洗手后戴上新手套

继续操作，不慎发生泻漏，应立即按照《发生职业暴露后的

处理措施》，进行处理。

6、防止腐蚀、灼伤、中毒、火灾和爆炸等事件发生。

7、实验操作完毕后，应按照实验室清理与消毒程序,

进行善后处理。同时记录相关资料与数据并存档。

8、工作结束后，应先洗戴手套的手，然后脱去手套丢

弃，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手后离开实验室。

9、注意安全，随手关门，做好水，电，门的安全保卫

工作，防火防盗防水。

十一、职业暴露的防护及处理措施

HIV检测实验室职业暴露是指检验工作人员在从事

检测工作过程中意外被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人

的血液、体液污染了皮肤或者粘膜，或者被含有艾滋病病毒

的血液、体液污染了的针头及其他利器刺破皮肤,有可能被

艾滋病病毒感染的情况。

（一）、防护措施：

1.医务人员进行有可能接触病人血液、体液的诊疗和

护理操作时必须戴手套，操作完毕，脱去手套后立即洗手，

必要时进行手消毒。

2.在诊疗、护理操作过程中，有可能发生血液、体液

飞溅到医务人员的面部时，医务人员应当戴手套、具有防渗

透性能的口罩、防护眼镜；有可能发生血液、体液大面积飞

溅或者有可能污染医务人员的身体时，还应当穿戴具有防渗

透性能的隔离衣或者围裙。

3.医务人员手部皮肤发生破损，在进行有可能接触病

人血液、体液的诊疗和护理操作时必须戴双层手套。

4.医务人员在进行侵袭性诊疗，护理操作过程中，要

保证充足的光线，并特别注意防止被针头、缝合针、刀片等

锐器刺伤或者划伤。

5.使用后的锐器应当直接放入耐刺、防渗漏的利器盒,

也可使用具有安全性能的注射器、输液器等医用锐器，以防

刺伤。

6.禁止将使用后的一次性针头重新套上针头套。禁止

用手直接接触使用后的针头、刀片等锐器。

（二）、处理措施：

1.用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲

洗粘膜。

2.如有伤口，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出

损伤处的血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗，禁止进行伤

口的局部挤压。

3.受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如75%的酒

精或者0.5%的碘伏等进行消毒，并包扎伤口；被暴露的粘膜,

应当反复用生理盐水冲洗干净。

4.在暴露后的0周、第四周、第八周、第十二周及六

个月时抽血进行检测艾滋病病毒抗体。

5.预防性用药应当在发生艾滋病病毒职业暴露后尽早

开始，最好在四小时内实施，最迟不得超过二十四小时；即

使超过24小时，也应当实施预防性用药，连续使用28天。

6.发生艾滋病病毒职业暴露后立即通知院感科备案、

评估。

十二、筛查检验程序

1、筛查试剂

必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合

格、在有效期内的试剂。推荐使用经临床质量评估敏感性和

特异性高的试剂。

2、筛查方法

(1)、常用的筛查方法是酶联免疫试验(ELISA)

目前国内外主要使用第三代(双抗原夹心法)试剂，少

数使用第二代试剂。血源筛查仍以第三代ELISA为主，国际

上有些国家和地区已将线性免疫酶测定(第四代ELISA试剂)

用于血源筛查。第四代ELISA试剂是最近发展起来的HIV抗

原抗体联合测定试剂，可同时检测P24抗原和抗HIV-1/2抗

体。与第三代抗HIV-1/2试剂相比，检出时间提前了4〜9d。

其优点在于能同时检测抗原抗体，降低血源筛查的残余危险

度。

(2)、快速检测(RT)及其它检测

随着对HIV感染者和AIDS病人抗逆转录病毒治疗的进展,

及对无症状HIV感染者提供自愿咨询检测（VCT）的迫切需

求，简便、快速的HIV检测方法被广泛应用。常用的主要有

以下几种：

①、明胶颗粒凝集试验（PA）：PA是111V血清抗体检测

的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与

待检样品作用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含

有HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗

体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。PA试剂

有两种,HIVT和HIV-2抗原共同致敏的PA试剂（AFDHIVT/2

PA）,已经我国食品药品监督管理局（SFDA）注册批准；HIV-K

HIV-2抗原分别致敏的PA试剂（SER0DIA-HIV-1/2）可初步

区分HIVT型和HIV-2型，目前我国尚未引进。

②、斑点EIA或称斑点ELISA（dot-EIA）：以硝酸纤维

膜为载体，将HIV抗原滴在膜上成点状，即为固相抗原。加

血清样品作用，以后步骤同ELISA。阳性结果在膜上抗原部

位显示出有色斑点。反应时间在10min以内，使用抗原量

少。

③、斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验：与斑点E1A

相似，也是以硝酸纤维膜为载体。区别在于不用酶标记抗体,

而代之以红色的胶体金（或胶体硒）A蛋白，用渗滤法作为

洗涤方法。试剂稳定，可室温长期保存。试验时不需任何设

备，迅速、简便、特异性较好，敏感性约相当于中度敏感的

ELISA,适用于应急检测、门诊急诊个体检测。目前已有在

国内被SFDA批准注册的国外进口试剂和国内产品。一般可

在10~30min内判读结果。

④、艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成

的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的

HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶免疫间接法。主要检测唾液中

的HIVIgA与IgG抗体，敏感性特异性与ELISA相近，可避

免静脉穿刺。但样品预处理时间长且售价较高。以唾液为样

品测定HIV抗体的ELISA、免疫印迹法(WB)试剂已经美国

FDA批准。

⑤、其它快速筛查试验方法：家庭H1V检测(HomeAccess

System)等。

3、尿液HIV抗体检测

1996年美国FDA首次批准HIV-1尿液ELISA试剂，我国

也正在研制尿液HIV抗体检测试剂。主要适用于静脉注射毒

品(IDUs)人群和其它高危人群的大面积流行病学调查、监

测。筛查阳性者仍需采血做确认试验才能确定。

4、筛查试验

根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对样品进行初

筛和重复检测(复检)。

5、初筛试验：以第三代ELISA(双抗原夹心法)为例。

(1)实验准备：试验开始前将试剂和样品放置在室温

(18〜23℃),按实验室SOP做好试剂准备。

磷酸盐缓冲液：若液体内有结晶，应放置在37℃直至溶

解，用蒸僧水1：25稀释浓缩液，4℃保存2周。

TMB底物液：使用前配制，TMB液和过氧化月尿液等量混

匀。

1M硫酸终止液：85ml蒸播水中加入5ml浓硫酸。

备好试剂盒、待检样品和外部对照质控血清后，按试剂

盒说明书以及质控和安全防护要求进行筛查检测。

(2)实验操作

①、装好所需使用数目的孔条，每孔均加入100口1样品

稀释液。设3个阴性对照孔，1个HIV-1阳性对照孔，若需

要可再设1个HIV-2阳性对照孔。

②、每孔加入50U1待检样品及对照(对照要后加)，

未用孔用样品稀释液加满以溶解结合物球，以免堵塞洗板机

孔。可震摇15S,37±2℃孵育60±5min。

③、置洗板机上洗涤6遍(用洗液将反应孔完全加满,

静置30〜60S,共洗涤6遍，洗完后孔上方及底部不应残存液

体,禁止在滤纸上拍干)。

④、每孔加入100口1底物液，勿搅动，室温避光孵育

30±2mino

⑤、每孔加入100口11M硫酸终止反应，充分混匀。

⑥、在2h内置于酶标仪读数，单波长450nm,或双波长

450/630nm测0D值。

（3）实验结果

①、阴性对照（NC）,HIVT阳性对照（PCI）,IIIV-2阳

性对照（PC2）O

NC必须V0.25方可用，排除NC20.25的值，计算

NC平均值。

NC界限范围：0.6倍NC均值VNCVL4倍NC均值。

②、符合以下条件的实验成立：

两个以上的NC可用。

PC1-NC均值20.4,PC2-NC均值20.4。

③、Cutoff值二阴性对照均值+0.100o

小于Cutoff为阴性，大于或等于Cutoff为阳性。

（4）报告：对呈阴性反应的样品，可由实施检测的实

验室出具HIV抗体阴性报告；对呈阳性反应的样品，须进行

复检，不能出阳性报告。

6、复检试验：

对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同

原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。如两种试剂复测均呈

阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴

一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认（见图1）。

样品

筛查试剂

原有试剂加另外一种筛查试剂

均阴性反应

重复检测

均阳性反应一阴一阵

送确认实验室确认

报告阴性

图1HIV抗体筛查检测流程

7、初筛试验结果的报告

对HIV抗体筛查试验，呈阴性反应者可出具“HIV抗体

阴性”报告（可月附表1）；对初筛试验呈阳性反应者不能出

阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告(附表1)。

8、初筛试验呈阳性反应样品的转送

如需送上级实验室进行复测或确认，需要填写“HIV抗

体复测送检单”(附表2),经1名检验人员和1名具有中级

以上技术职称的人员审核签字。送当地艾滋病筛查中心实验

室，再转送艾滋病确认实验室，或在本实验室复检后直接送

确认实验室。

9、对筛查阴性和阳性者，均需做好检测后咨询。

十三、检测结果的判定方法

1、HIV测定(胶体金法)结果的判定方法

(1)、阳性：出现两条或三条红线均为阳性反应。

(2)、阴性：仅出现质控一条红线，则实验结果为阴性。

(3)、无效：如无红线(或只有反应线)出现，表明实

验无效，须重新检测。

2、HIV测定(ELISA法)结果的判定方法

⑴、计算临界值CO(cut-off)值。

(2)、临界值=阴性对照A均值+0.12

(3)、正常情况下，阴性对照孔的0D值W0.10(若1

孔阴性对照的0D值＞0.1应舍弃，若有2孔或2孔以上阴性

对照的0D值＞0,1,应重复实验。)。样品0D值〈临界值者

为HIV抗体阴性。

(4)、正常情况下,阳性对照孔的0D值20.80(若1

孔阳性对照的0D值V0.8应舍弃，若有2孔或2孔以上阳性

对照的0D值V0.8,应重复实验。样品0D值2临界值者为

HIV抗体阳性。

3、HIV测定(蛋白印迹法)结果的判定方法

根据卫生部1990(2)号文件的规定，蛋白印迹法的判断

标准为：

⑴、阳性：至少有一条env(gpl60,gpl20,gp41)带

和一条pol(p65,p51,p32)带或至少有一条env带和一条

gag(p55,p24,pl8)带或至少有一条env带和一条gag带,

一条pol带或至少2条env带。

(2)、阴性：无病毒特异带。

(3)、可疑：一条gag带和一条pol带或只有gag带或

只有pol带。

十四、检测结果报告规程

1、从事HIV检测工作的技术人员必须接受过上岗前的

培训和定期复训。

2、HIV检测工作必须在独立的实验空内进行。

3、初筛检测试剂必须是经国家食品药品监督管理局注

册批准、中国药品生物制品检定所批批检合格且在有效期内

的试剂。

4、按照《全国艾滋病检测技术规范》的要求建立健全

质量管理制度、实验室安全标准操作规程、安全防护工作等。

5、检测结果报告前应填写好原始实验记录资料，包括

试验日期，试验操作记录，检测样品及空白、阴、阳对照结

果，S/CO值、临界值、试剂厂家、批号、效期，检测人、复

核人签名等。

6、将试验结果存档保存，处理试验废物，擦净实验台,

做好实验室消毒卫生。

7、结果报告：对呈阴性反应的样品，可出具“HIV抗体

筛查报告”（见附表1）阴性报告；对呈阳性反应的样品，须

进行复检，不能出阳性报告。

8、复检试验：对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和

另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。如两种

试剂复测均呈阴性反应，则报告“HIV抗体筛查报告”（见附

表1）阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，则应按照《全

国HIV检测管理规范》的要求送艾滋病确认实验室进行确证

试验。

十五、检验结果的解释

HIV抗体检测的结果有三种，分别是阳性、阴性和不

确定，绝大多数情况下都是阳性或阴性，出现不确定结果

的情况很少。

（一）、阳性结果的解释

1、表明一个人感染了HIV,具有传播性当一个人HIV

抗体检测结果为阳性，表明这个人已经感染了HIV,具有

把HIV传播给别人的可能。

2、不能判断发病与否，不能判断疾病的进展。HIV抗

体检测结果只能说明一个人是否感染了H1V,阳性结果并

非就意味着一个人已经得了艾滋病，也不能说明患者处于

疾病发展的哪个阶段。若要判断疾病的进展，则要做另外

的实验检测CD4细胞记数和HIV病毒载量检查。

3、对于刚出生的婴儿，情况则不一样刚出生的婴儿，

不能根据其HIV抗体检测呈阳性反应而判断该婴儿感染了

IlIVo因为出生半年以内的婴儿，其抗体主要是由该婴儿从

其母体获得，不管他（她）感染HIV与否，只要其母亲感染

了HIV,母体内存在HIV抗体，婴儿出生后HIV抗体检测-

般都是阳性。如果要判断一个婴儿是否感染HIV,则应该

等到一岁半（18个月）以后再做检测，检测结果阳性时才

能说明该婴儿感染了HIV。

（二）、阴性结果的解释

1、检测者处于窗口期

HIV从感染到能够检测出来有一段时期，这段时期称

为窗口期，窗口期一般是2周到2个月。拿到一个阴性结

果，首先要确定窗口期是否已过，如果确定最后一次危险行

为距抽血作检测时已过窗口期，这时基本可以确定检测者

未感染HIV。如果窗口期末过或者抽血化验之后又发生了

危险行为（如乂共用针具或未采取保护措施的性行为），同

样也不能确定抽血者没有感染HIVo

2、检测者未感染HIV

如果检测结果阴性，最后一次危险行为又过了窗口期，

那可以判定检测未感染HIVo

（三）、不确定结果

结果不能确定是指住进行HIV抗体检测的确认试验时，

检测结果不是阴性，又够阳性标准，界乎于阳性与阴性之间

的一种结果。出现不确定结果一般建议过三个月后再复查，

出现不确定结果一般有以下几种原因：

1、感染处于窗口期，从HIV进入体内到检测这段时间

还不够长，因此血清还没有形成典型的抗体反应。

2、艾滋病进展到终末期，抗体水平下降。

3、有其它原因：如某些恶性疾病，怀孕，输血或器官

移植等情况，身体会产生一些抗体，其反应与HIV的某些蛋

白抗体所引起的反应相似。

十六、检测数据的记录与保存

1、实验原始记录表

应按实验要求，设计操作的原始记录表，标明空白对照、

阳性对照、阴性对照、外部对照以及待检样品的位置，便于

指导实验人员加样。要注明试剂盒厂家、测定方法、批号、

效期、操作人员和复核人员姓名及检测日期。

2、标本的登记

收到标本后，及时登记有关参数，包括受检者姓名或代

号、试管编号、性别、年龄、职业、送检单位、人群类别、

检验结果、送检日期、报告日期、备注（必要时记录通信

地址）等。

3、HIV阳性标本的保存记录

包括HIV阳性标本的类型、贮存量、贮存温度、贮存起

始时间以及标本保管人姓名。

4、文件存档

实验原始记录表、打印数据、检测记录表、标本登无、

标本保存记录以及仪器设备维修和校准记录等都应该妥善

存档保存15年以上。并同时使用计算机保存各种文件和记

录。

十七、呈阳性反应标本的处理程序

1、对HIV抗体初筛试验，呈阴性反应的样品可出具“HIV

抗体阴性”报告（可用附表1）；对初筛呈阳性反应的样品用

原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复

检测。如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告“HIV抗体筛

查报告”（见附表1）阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，

则应按照《全国HIV检测管理规范》的要求送艾滋病确认实

验室进行确证试验。对初筛试验呈阳性反应者不能出阳性报

告,可出具“HIV抗体待复查”报告（附表1）。

2、初筛试验呈阳性反应样品，需送上级实验室进行复

测或确认，需要填写“HIV抗体复测送检单”（附表2）,经

实验室负责人和1名专业检验人员审核签字。送县疾病控制

中心艾滋病筛查中心实验室，或在本实验室复检后直接送安

阳市艾滋病确认实验室。

3、初筛试验呈阳性反应样品，进一步送检、本室冰冻

保存后不在需要的样品的处置应符合《实验室生物安全通用

要求》（GB19489-2004）和《消毒技术规范（2002年版）》。

4、从HIV实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的

样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于

专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，并在高压消毒后

再进行处理或废弃。

5、所有废弃物应按照HIV污染物品处理。由专人按木

实验室制定的程序和方法进行清洁和消毒。

6、严格IIIV实验室的废弃物的消毒处理制度，做好登

记。

7、检验科主任定期负责检查，操作处理不当的按照科

室有关规定处罚。

十八、检测数据季报方案和程序

1、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点应于每季度首月5

日前填写-H1V抗体检测数季报表"（附表6）,向艾滋病筛

查中心实验室报告上季度检测情况。没有艾滋病筛查中心实

验室的地区可直接向艾滋病确认中心实验室报告。

未设置

艾滋病

筛查中

心实验

室的地

区

中国CDC性艾中心省卫生行政部门同级卫生行政部门

艾滋病参比实验室

图2HIV抗体检测情况季报流程

2、艾滋病解查中心实验室应于每季度首月10日前将本

实验室和本辖区内各筛查实验室上季度报告的检测情况（附

表6）汇总，报告艾滋病确认中心实验室。

3、艾滋病确认实验室应于每季度首月10日前将上季度

检测情况汇总后（附表6）,报告当地艾滋病确认中心实验室

和同级卫生行政部门。

4、艾滋病确认中心实验室应及时收集、整理和分析辖

区内HIV抗体检测情况，于每季首月15日前向省级卫生行

政部门和中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心

（简称中国疾控中心性艾中心）参比实验室报告。同时，按

艾滋病疫情报告的有关规定上报疫情。

5、在非送检样品中（如专项调查与研究等）发现的艾

滋病病毒抗体阳性者，应向所在地的省疾病预防控制中心报

告，并填写"HIV抗体确认检测报告单”（附表3）,报中国

疾控中心性艾中心参比实验室。

6、实验室上报检测结果的同时，应随时报同级监测人

员，以便及时随访调查。

十九、感染追踪处理方案

（一）、追踪人群

1、有明确受血或血液制品史，并排除性传播、母婴传

播、经国家确证实验室确认的艾滋病病毒抗体阳性者；

2、无偿献血工作中发现的艾滋病病毒抗体阳性献血人

员。

（二）、工作步骤

1、对供血或受血的追访，须以健康跟踪服务或科研的

名义进行，系统体检并采血预备有关的检验。

2、对发现的受血艾滋病病毒感染者制定详细的个人追

踪方案，确定追踪人员，应有一名近期参与治疗的医生参加。

3、对供血者追踪，由卫生防疫机构会同采供血机构的

专业技术人员进行。

（三）、善后处理：

对受血的艾滋病病毒感染者由县卫生防疫机构制定专

人建立健康档案，实施预防监护、医疗照顾和管理。并定期

进行随访和医疗保健咨询服务。特别必要时应告知受血感染

者有关真实情况°

（四）、对HIV抗体阴性者，如近期有高危行为如性乱

史、吸毒史、受血史、献血浆史，或有急性流感症状等情况,

为排除窗口期的可能，建议每3个月复查一次，连续2次。

二十、保密程序制度

1、HIV检测实验室的所有工作人员要具有高度的保密

意识。不得对无关人员透漏任何实验室内部的信息。

2、HIV检测实验室要有专人负责妥善保存与HIV/AIDS

相关检测项目的所有资料（包括送检单、各种实验记录、感

染者档案、报告单的发放），不得擅自修改和销毁。未经省

级卫生行政部门许可，不得向无关人员或单位提供任何情

况。严格遵守保密制度，杜绝泄密事件的发生。

2、我院HIV实验室属于筛查实验室，检测的结果也不

是最终结果，检测到阳性结果应及时启动应急预案，根据

WHO提出的三级包装系统送到上级实验室作进一步确认。此

时，不能出具HIV抗体阳性的结果报告，更不能告知受检者

本人。

3、确认实验室确认阳性结果，以机密级向送检单位出

具阳性报告；送检单位接到报告后，由专人负责接收，并应

及时会同医院感染科上报县卫生防疫站和卫生局。在对阳性

者告知检测结果时要先做好法律、医学、生活等方面的咨询。

4、经确认的阳性标木，包括在实验室留存的标木，应

送省级H1V抗体确认中心或省级卫生行政部门指定的单位

保存，不得擅自处理。标本保存时间至少5年。

5、当发生职业暴露事故后，无论职业暴露事故级别的

大小，对涉及的职业暴露者，均应注意做好保密工作。任何

一个得到信息的人都要做好保密工作。

保密守则：1、不该说的机密绝对不说；

2、不该问的机密绝对不问；

3、不该看的机密绝对不看；

4、不该记录的机密绝对不记录；

5、不在非保密本上记录机密；

6、不在私人通信中涉及机密；

7、不在公共场所和家属、子女、亲友面前谈

论机密；

8、不在不利于保密的地方存放机密文件资

料；

9、不在普通电话、明码电话、普通邮件传达

机密事项；

10、不携带机密材料游览、参观、探亲、访

友和出入公共场所。

二十一、质量管理制度

1、根据省临检中心的有关规定，开展实验室室内的质

量控制，绘制HIV实验室室内质量控制图，包括20次0D值、

S、靶值、CV%值°对室内质控应每日有记录，有每月的S、

靶值、CV%值。对失控情况有纠正方法，有预防性措施。

2、积极参加省临检中心组织的室间质控活动，对每次

质控评价应有记录。

3、计量仪器应定期校正，每年一次。

4、精密分析仪器由专人负责，有使用记录和维修记录。

5、商品化的试剂盒的申购由专业组长负责申报，每月

一次报科主任审批，不得使用过期，无批准文号的劣质试剂,

进货统一由科室管理，自配试剂须严格校正后方可使用。

6、建立完整的HIV筛查实验室标准化操作程序，并应

严格按程序执行。

7、当日发出的全部检验报告单须经当日科室总值班人

员严格审核后方可发出。

8、科室在完成严格的室内、室间质量控制体系的同时,

应逐步建立全面质量控制体系，对标本的采集，运送，俣存

等纳入严格的管理之中。

二十二、室内质控失控分析管理制度

室内质控出现失控时，应填写失控报告单，并上交专业主

管，由专业主管做出是否发出与测定质控品相关的那批患者

标木检验报告并分析及登记失控原因。

失控信号的出现受多种因素的影响，这些因素包括操作上

的失误、试剂、校准物、质控品的失效，仪器维护不良以及

采用的质控规则、质控限范围、一次测定的质控标本数等等。

失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的那批患者

标本报告可能作废。

此时，首先要尽量查明导致的原因，然后再随机挑选出一

定比例（例如5-10%）的患者标本进行重新测定，最后根据既

定标准判断先前测定结果是否可接受，对失控做出恰当的判

断。对判断为真失控的情况，应该在重做质控结果在控以后,

对相应的所有失控患者标本进行重新测定。如失控信号被判

断为假失控时，常规测定报告可以按原先测定结果发出，不

必重做。当得到失控信号时，可以采用如下步骤去寻找原因:

一、立即重测定同一质控品。此步是主要是用以查明人

为误差，每一步都认真仔细操作，以查明质控的原因；另外,

这一步还可以