DB51∕T 3285-2025 染色体畸变和微核检测质量控制规范

ICS11.100

CCSC57

DB51

四川省地方标准

DB51/T3285—2025

染色体畸变和微核检测质量控制规范

2025-09-15发布2025-10-15实施

四川省市场监督管理局发布

DB51/T3285—2025

目次

前言.................................................................................II

1范围................................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3术语和定义..........................................................................1

4基本要求............................................................................2

5仪器设备要求........................................................................3

6试剂要求............................................................................3

7人员要求............................................................................3

8染色体畸变检测质量控制..............................................................4

9微核检测质量控制....................................................................5

10归档要求...........................................................................6

附录A（规范性）仪器设备及技术指标要求...............................................7

参考文献..............................................................................8

I

DB51/T3285—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由四川省卫生健康委员会提出、归口、解释并组织实施。

本文件起草单位：四川省疾病预防控制中心、四川大学华西第四医院、核工业四一六医院、四川省

科学城医院、德阳市人民医院。

本文件主要起草人：凌攀、何玲、赵芹弘、陈剑宇、高艺莹、张钊、刘德明、方堃、张静、徐志红、

吴苹、陈曦阳、曾珍、王晓凤、赵仪、杨柳莹、葛芾显、孙国康。

II

DB51/T3285—2025

染色体畸变和微核检测质量控制规范

1范围

本文件规定了电离辐射致人体外周血淋巴细胞染色体畸变和微核检测中应具备的基本要求，仪器设

备、试剂、人员要求及检测和归档的质量控制。

本文件适用于接触物理、化学、生物等因素人群中外周血淋巴细胞染色体畸变和微核检测时的质量

控制。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GBZ/T2482014放射工作人员职业健康检查外周血淋巴细胞染色体畸变检测与评价

GBZ/T3282023放射工作人员职业健康检查外周血淋巴细胞微核检测方法与受照剂量估算标准

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T42060医学实验室样品采集、运送、接收和处理的要求

WS/T442临床实验室生物安全指南

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

染色体畸变chromosomalaberration

正常染色体在受到物理（如电离辐射）、化学或生物因素作用下发生的数目和结构上的异常。染色

体畸变是电离辐射作用的敏感指标之一。

[来源：GBZ/T2482014,3.5]

3.2

微核micronucleus

由于基因组DNA损伤导致细胞分裂后期滞后的染色体断片、一个或多个染色体不能随有丝分裂进入

子细胞，而在细胞质中形成直径小于主核的三分之一且完全与主核分开的圆形或椭圆形小核。

[来源：GBZ/T3282023,3.2]

3.3

微核细胞micronucleuscell

如采用常规培养微核法，指胞质中含有微核的转化淋巴细胞；如采用CB微核法，指胞质中含有微

核的双核淋巴细胞。

[来源：GBZ/T3282023,3.5]

3.4

核型分析karyotypeanalysis

1

DB51/T3285—2025

一个体细胞中的全部染色体按其大小、形态特征顺序排列所构成的图像就称为核型(karyotype)。将

待测细胞的核型进行染色体数目、形态特征的分析，确定其是否与正常核型完全一致，称为核型分析。

[来源：GBZ/T2482014,6.2，有修改]

3.5

常规培养微核法routinemicronucleusmethod

采用微量全血培养法培养淋巴细胞，培养体系中无需加入松胞素-B，培养结束后经低渗、固定、制

片和染色进行观察和分析微核的方法。

[来源：GBZ/T3282023,3.3，有修改]

3.6

CB微核法cytokinesis-blockmicronucleusmethod

在培养的淋巴细胞完成第一次有丝分裂前，向培养体系中加入松胞素-B，阻滞胞质分裂，培养结束

后经低渗、固定、制片和染色，只计数和分析双核淋巴细胞中微核的方法。

[来源：GBZ/T3282023,3.4]

3.7

放射工作人员radiationworker

受聘用全日、兼职或临时从事放射工作的任何人员。

[来源：GBZ982020,3.1]

3.8

核与放射卫生应急nuclearandradiologicalhealthemergency

由于核链式反应或链式反应产物的衰变产生的能量或辐射照射已造成或预计将造成危害的应急。

[来源：WS/T8272023,3.3，有修改]

3.9

质量控制qualitycontrol

为达到质量要求所采取的作业技术和活动。

[来源：GB/T190002016,3.3.7，有修改]

4基本要求

4.1设施要求

4.1.1实验室应有足够的空间及明确的功能分区，包括但不限于试剂储存与配制室、细胞接种培养室、

制片室、观察分析室。

4.1.2制片室保证通风，应配备通风装置、防护眼镜、面屏、温湿度仪、洗眼装置等。

4.1.3试剂储存室应配备消防设备和报警装置，配备独立存放易腐蚀、易燃、易制爆化学品的试剂柜，

并连接通风装置，双人双锁保管，台账登记。

4.2安全与环境要求

4.2.1实验室生物安全防护应满足GB19489和WS/T442要求，并制定应急预案。

4.2.2实验中产生的针头、玻片和生物样本等医疗废物处理应符合《医疗废物管理条例》、《医疗卫

生机构医疗废物管理办法》及《危险化学品安全管理条例》的规定。

4.2.3实验室应制定环境条件（含温、湿度）控制规定并做好记录，需有环境条件失控时的处置措施

和记录。

4.3外部质控要求

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DB51/T3285—2025

实验室应定期参加职业健康检查质量控制管理机构组织的考核；考核不合格应整改并采取必要的纠

正措施，相关文件记录需留档保存。

5仪器设备要求

5.1仪器设备及技术

具体要求应符合附录A.1。

5.2仪器设备管理要求

5.2.1离心机、电子天平、移液器按规定进行检定或校准、期间核查。

5.2.2显微镜、离心机、电子天平建立使用、维护保养及维修记录。

5.2.3冰箱每日进行温度监测和记录，保证在温控范围内。

6试剂要求

6.1试剂应有验收记录，重新配置或更换批号、生产商时，应在使用前做试剂验证。

6.2淋巴细胞培养基不宜反复冻融。

6.30.075mol/L的氯化钾低渗液宜按计划定量配制。

6.4固定液应按需求临时配制。

6.5使用秋水仙素和松胞素-B时应避免直接接触。

6.6试剂应在有效期内使用。

7人员要求

7.1上岗和培训要求

实验室应有2名及以上相关专业技术人员，具备卫生与健康行政管理部门认可颁发的培训证明。

7.2专业知识和检验技术能力要求

7.2.1技术人员应掌握以下专业知识：

a)实验室基本管理条例、生物安全知识、危险化学品管理办法；

b)电离辐射生物效应的基础知识。

7.2.2技术人员应具备以下技术能力：

a)样本接收、储藏、登记程序；

b)外周血淋巴细胞染色体畸变及微核实验的基本原理及标准操作程序，常用试剂的配制；

c)外周血样本的染色体畸变和微核分析，显微镜观察摄影、坐标记录及使用规范符号记录染色体

畸变类型和微核情况，并能准确、及时完成报告。

7.3技术人员的考核

7.3.1实验室内部应每年组织技术人员能力抽查，染色体、微核制片和阅片合格。

7.3.2实验室技术人员应按规定参加职业健康检查质量控制管理机构组织的实验室间比对。

7.3.3离岗6个月以上再上岗时，或程序、技术有变更时，应对技术人员进行再培训，经考核合格后

方可上岗。

3

DB51/T3285—2025

8染色体畸变检测质量控制

8.1实验标准操作流程

染色体畸变检测实验标准操作流程见GBZ/T248和GB/T28236的规定。

8.2样本的采集、运输和保存

8.2.1血液采集应在所有放射性检查之前，质量保证遵循GB/T42060的要求。

8.2.2血液运输和保存的最佳温度应控制在4℃～24℃，存放时间不超过72h。

8.2.3可在含植物血凝素培养基中4℃～20℃保存，尽快培养。

8.2.4所有样本应有接收、储藏和登记程序，每份样本应有唯一编号，编号规则由各实验室制定。

8.3检测片制作

8.3.1疑似受到意外照射和/或淋巴细胞低于正常值人员的血液标本宜多份平行培养或适当延长培养

时间。

8.3.2在37℃水浴箱（锅）中低渗时间应控制在20min～30min。

8.3.3冰醋酸保存温度不低于16℃。

8.3.4二次固定后，若上清液颜色较深或仍有浑浊，应增加固定次数。

8.3.5收获的细胞悬液若不立即制片，应保存在温度设置为-20℃冰箱；制片前需复融后再离心，去

上清液，加入现配固定液。

8.3.6滴片后宜立即过火固定，若着火，应立即吹灭。

8.3.7染色过浅可复染，复染时应先加缓冲液，再加染液；染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲

醇或乙醇适当脱色。

8.3.8检测中应同步完善仪器设备使用、维护、保养等记录。

8.4检测片分析

8.4.1人工显微镜阅片时，应在低倍镜下墙垛式扫描全片，合格中期细胞应符合以下条件：

a)染色体分散良好；

b)染色体形态舒展，长短适中，无过度细长或短粗；

c)染色深浅适中。

8.4.2出现以下情况的中期细胞不宜做核型分析：

a)着丝粒数目少于45个或多于47个；

b)在同一细胞内染色体过于分散，不能在一个油镜视野内观察到；

c)染色体重叠太多，轮廓不清楚；

d)染色体未处于有丝分裂中期，即染色质没有螺旋化；

e)同一条染色体的两条染色单体间距离过大。

8.4.3染色体片中期细胞应满足GBZ/T248—2014中6.1.2的分析数，评级要求：

a)优秀：每张玻片中能检出不少于200个合格中期细胞；

b)合格：每张玻片中能检出100～200个合格中期细胞；

c)不合格：每张玻片中少于100个合格中期分裂细胞，应重新制片。

8.4.4自动分析系统采集和分析染色体分裂相质量评估与人工分析要求一致。

8.4.5染色体畸变类型及表示符号应符合以下要求：

a)畸变类型及表示应符合GBZ/T248，主要观察染色体型畸变，分析计数无着丝粒体（ace）、

双着丝粒体（dic）、着丝粒环（r）和多着丝粒体（pic）等非稳定性染色体畸变（Cu），以

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DB51/T3285—2025

及明显的非对称性的相互易位（t）和臂间倒位（inv）等稳定性染色体畸变（Cs）；

b)伴随dic和r的断片（f），需分别记录为dic(1)和r(1)；伴随pic的断片，则记录为n-1

个dic，并伴有n-1个f，n为着丝粒数目；非伴随的f，则另计为一个畸变（+f）；

c)如无f伴随的dic，r或pic记录为dic(0)，r(0)或(n-1)dic(0)；

d)染色单体型畸变如染色单体断裂(ctb)、裂隙(g)，染色单体互换（cte），如三射体（tr）和

四射体(qr）等超过5%需报告。

8.4.6原始记录要求应符合：

a)人工或仪器拍摄的图片能展现一个完整的分裂相；

b)原始记录内容应包括样本编号、细胞坐标、畸变类型等，保证信息完整，清晰准确，修改规范；

c)自动扫描分析系统拍摄的异常分裂相需在显微镜下定位，并记录坐标；

d)原始记录的格式见GBZ/T248。

8.4.7分析要求应符合：

a)分析100个中期细胞,发现1个dic、r、Cs，若被检者接触过电离辐射因素，可直接计算此100

个中期细胞的畸变率；若被检者没有接触过电离辐射因素，需增加分析100个中期细胞，计

算此200个中期细胞的染色体畸变率，并按GBZ/T248要求进行结果评价。

b)分析100个中期细胞,发现1个以上dic、r、pic、Cs，或3个以上ace，按GBZ/T248要求进

行结果评价。

8.4.8复核应满足以下要求：

a)自动分析系统识别到染色体畸变的中期细胞时，技术人员需在光学显微镜下对畸变类型辨认判

定；

b)分析结果应由至少两名技术人员核查确认。

8.5报告质量评估

8.5.1报告的格式见GBZ/T248，包括但不限于以下信息：标题、检验检测机构公章或检验检测专用

章、检测报告唯一标识、患者名称、检测方法、检测样品描述、状态和标识、样品接收时间、检测和报

告发布日期、检测结果（必要时应注明单位）、报告签发人。

8.5.2报告采取检测者、复核者双人签字。

8.6样本保存

实验后血液样本应冷藏保存两周；分析结果正常样本玻片应保存至下次检查后，异常样本玻片应长

期保存，注意防潮。

9微核检测质量控制

9.1实验标准操作流程

微核检测实验标准操作流程见GBZ/T328，实验室视情况选择常规培养法或CB微核法。

9.2样本的采集、运输和保存

血液的采集、运输和保存应符合8.2.1和8.2.2要求。

9.3检测片制作

9.3.1低渗吹打力度适中，混匀后应立即加入固定液，防止淋巴细胞膜破裂。

9.3.2固定后，若上清液浑浊或颜色较深，应增加固定次数。

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DB51/T3285—2025

9.3.3制片时，应根据细胞团块大小预留0.2mL～0.4mL固定液制片，从适当高度滴片,细胞悬液均

匀布满洁净干燥载玻片。

9.4检测片分析

9.4.1人工阅片时，应在低倍镜下按顺序扫描全片，寻找转化的单核淋巴细胞（常规培养微核法）或

双核淋巴细胞（CB微核法）。

9.4.2判定为可分析淋巴细胞应符合以下要求：

a)可分析的转化单核淋巴细胞的细胞核有完整核膜；

b)细胞质边界或细胞膜应完整，并与相邻细胞的细胞质边界有明显区分；

c)双核淋巴细胞判定应符合GBZ/T3282023中6.2的要求。

9.4.3微核片的评级要求：

a)合格：每张玻片能检出不少于1000个转化淋巴细胞；

b)不合格：每张玻片少于1000个转化淋巴细胞，应重新制片。

9.4.4如使用自动分析系统，其采集和分析微核片质量评估与人工分析要求一致。

9.4.5高倍镜下微核判定，应符合GBZ/T328—2023中6.3的要求。

9.4.6人工或仪器拍摄微核细胞后，应在原始记录上记录样本编号、微核细胞显微镜坐标。原始记录

格式参见GBZ/T3282023附录B.1。

9.4.7复核应满足以下要求：

a)自动分析系统识别的微核，需要技术人员在电脑端或显微镜下确认后方可出具报告；

b)分析结果应由至少两名技术人员核查确认。

9.5报告质量评估

9.5.1报告的格式参见GBZ/T328，报告内容见8.5.1。

9.5.2报告采取检测者、复核者双人签字。

9.6样本保存

实验后血液样本应冷藏保存两周；样本玻片应防潮保存，存放期为两年。

10归档要求

10.1应有专门存放样本玻片、原始记录、报告等标本资料记录的储存柜和存放点，且专人管理。

10.2所有的档案柜应按序号摆放，档案应按档号排放于档案柜，应对库房温湿度进行监控并做好登记，

需做好防盗、防火、防水、防潮、防尘、防虫、防霉工作，定期查阅，以防毁损丢失。

10.3原始记录和图片等资料应长期保存，并建立电子档案。

10.4实验室应保证样本资料的完整性，并为送检单位及受检者保密。

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A

A

附录A

（规范性）

仪器设备及技术指标要求

A.1仪器设备及技术指标要求

仪器设备及技术指标要求见表A.1。

表A.1仪器设备及技术指标要求表

仪器设备技术指标要求必备/选配

生物安全柜或超净工作台双人、垂直送风必备

恒温培养箱37℃恒温培养箱，温度控制范围37℃±0.5℃必备

离心机可放置15mL离心管、水平式普通离心机，转速1000r/min～1500r/min必备

配备油镜（100倍），自带坐标，可与染色体和/或微核自动扫描分析系统的

光学显微镜必备

坐标关联

冰箱4℃普通冰箱和-20℃低温冰箱必备

电子天平万分级选配

移液器单道（0～1000）μL、（0～200）μL、（0～100）μL选配

水浴箱（锅）温度控制范围37℃±0.5℃选配

纯水仪一级或二级纯水选配

振荡器漩涡振荡器选配

保温箱便携式保温箱，温度可控制在4℃～20℃选配

吹风机热风选配

负压移液装置或真空吸液