2025年大学生物学（基因工程基础）试题及答案

2025年大学生物学（基因工程基础）试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题，共40分）答题要求：每题只有一个正确答案，请将正确答案的序号填在括号内。(总共20题，每题2分，每题只有一个正确答案，请将正确答案的序号填在括号内)w1.基因工程诞生的理论基础不包括以下哪项？（）A.DNA是遗传物质的证明B.DNA双螺旋结构和中心法则的确立C.遗传密码的破译D.蛋白质工程的发展w2.限制性核酸内切酶切割DNA后产生的末端不包括（）A.黏性末端B.平末端C.5’突出末端D.3’突出末端w3.以下哪种载体常用于大肠杆菌基因克隆？（）A.质粒载体B.噬菌体载体C.人工染色体载体D.病毒载体w4.基因工程中常用的DNA连接酶是（）A.T4DNA连接酶B.TaqDNA连接酶C.EcoliDNA连接酶D.以上都不是w5.感受态细胞制备的常用方法不包括（）A.CaCl2法B.电击法C.热激法D.酶解法w6.以下关于PCR技术的说法错误的是（）A.需要模板DNAB.需要引物C.需要dNTPD.不需要DNA聚合酶w7.核酸分子杂交技术不包括（）A.Southern杂交B.Northern杂交C.Western杂交D.原位杂交w8.基因文库构建过程中，以下哪种方法用于将外源DNA片段导入宿主细胞？（）A.转化B.转导C.转染D.以上都是w9.用于筛选重组子的方法不包括（）A.抗生素抗性筛选B.蓝白斑筛选C.核酸杂交筛选D.蛋白质电泳筛选w10.基因表达载体不包含以下哪个元件？（）A.启动子B.终止子C.增强子D.核糖体结合位点w11.以下哪种蛋白质表达系统常用于真核生物蛋白表达？（）A.大肠杆菌表达系统B.酵母表达系统C.昆虫细胞表达系统D.哺乳动物细胞表达系统w12.蛋白质纯化过程中，常用的层析方法不包括（）A.离子交换层析B.凝胶过滤层析C.亲和层析D.纸层析w13.基因治疗的策略不包括（）A.基因置换B.基因修复C.基因沉默D.基因突变w14.以下关于基因工程安全性的说法错误的是（）A.重组DNA技术可能导致基因扩散B.转基因生物可能对生态环境造成影响C.基因治疗不会有任何风险D.应加强基因工程的安全性评估w15.基因工程在农业领域的应用不包括（）A.培育转基因作物B.提高农作物抗虫性C.改良农作物品质D.改变农作物的光合作用机制w16.以下哪种工具酶可用于合成cDNA？（）A.逆转录酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.限制性核酸内切酶w17.基因工程中常用的宿主细胞不包括（）A.大肠杆菌B.酵母C.植物细胞D.病毒w18.以下关于基因克隆的说法正确的是（）A.只能克隆原核生物基因不能克隆真核生物基因B.基因克隆就是将基因导入宿主细胞C.基因克隆是指对特定基因进行分离、扩增和表达的过程D.基因克隆不需要载体w19.用于检测基因表达水平的方法不包括（）A.RT-PCRB.Northern杂交C.WesternblotD.基因芯片w20.基因工程中常用的标记基因不包括（）A.抗生素抗性基因B.荧光蛋白基因C.绿色荧光蛋白基因D.血红蛋白基因第II卷（非选择题，共60分）w21.（10分）简述基因工程的基本操作流程。w答案：基因工程基本操作流程包括：获取目的基因，可通过从生物基因组中分离、PCR扩增、化学合成等方法；构建基因表达载体，将目的基因与载体连接；将重组载体导入宿主细胞，常用方法有转化、转导、转染等；筛选重组子，利用抗生素抗性、蓝白斑等筛选方法；对筛选出的阳性克隆进行鉴定和分析，如测序、酶切分析等；最后进行目的基因的表达和功能研究，可在不同表达系统中表达并纯化蛋白进行功能验证。w22.（10分）比较质粒载体、噬菌体载体和人工染色体载体的特点及应用。w答案：质粒载体是最常用的载体，具有较小的分子量，易于操作和改造，常用于大肠杆菌基因克隆和表达，可携带较小的外源基因片段。噬菌体载体能容纳较大的外源DNA片段，常用于构建基因文库等，如λ噬菌体载体。人工染色体载体可容纳非常大的DNA片段，适用于大片段基因的克隆和分析，如酵母人工染色体（YAC）、细菌人工染色体（BAC）等，在基因组研究等方面有重要应用。w23.（10分）材料：研究人员欲将某植物的抗虫基因导入另一植物中，以提高其抗虫能力。简述其可能采用的基因工程方法及步骤。w答案：首先获取抗虫基因，可从植物基因组中分离或通过PCR扩增。然后构建基因表达载体，将抗虫基因与合适的载体连接，载体上要有启动子、终止子等元件。接着通过农杆菌介导法或基因枪法等将重组载体导入受体植物细胞。之后筛选含有抗虫基因的转化细胞，可利用抗生素抗性筛选等方法。最后对转化植株进行鉴定和检测，如通过PCR检测抗虫基因是否整合，通过抗虫实验检测其抗虫能力。w24.（15分）材料：某实验室构建了一个基因文库，包含了某生物的全部基因。现要从中筛选出目的基因。请设计筛选方案并说明原理。w答案：筛选方案：首先利用核酸杂交技术，如Southern杂交。将构建基因文库时提取的基因组DNA进行酶切后电泳分离，转移到膜上。然后制备目的基因的探针，用探针与膜上的DNA片段进行杂交。原理：核酸分子杂交的原理是碱基互补配对原则。目的基因的探针与含有目的基因的DNA片段能特异性结合，通过检测杂交信号，就可以找到含有目的基因的克隆，从而筛选出目的基因。w25.（15分）材料：在基因工程药物研发中，需要表达和纯化一种药用蛋白。简述表达该蛋白的过程及纯化策略。w答案：表达过程：首先构建含有该药用蛋白基因的表达载体，载体上要有合适的启动子、终止子等元件。将表达载体导入合适的宿主细胞，如大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞等。根据宿主细胞