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文档简介
2025年细胞周期概念试题及答案一、单项选择题(每题2分,共30分)1.细胞周期中,DNA损伤修复主要发生在以下哪个阶段?A.G1期早期B.S期晚期C.G2期D.M期前中期2.下列关于细胞周期蛋白(Cyclin)的描述,错误的是?A.不同Cyclin在细胞周期特定阶段表达B.CyclinD主要在G1期与CDK4/6结合C.CyclinB的降解发生在M期中期D.CyclinE的积累是G1/S期转换的关键标志3.若用流式细胞术检测同步化培养的HeLa细胞,发现70%细胞DNA含量为2n,25%为4n,5%介于2n-4n之间,推测细胞群体最可能处于?A.G1期为主,部分进入G2期B.S期为主,部分完成复制C.G2期为主,部分进入M期D.M期为主,部分完成分裂4.视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)的主要功能是?A.直接磷酸化CDK抑制因子B.与E2F转录因子结合并抑制其活性C.促进CyclinB的泛素化降解D.激活p53介导的DNA损伤应答5.以下哪种实验方法可用于检测细胞周期中DNA合成的起始?A.免疫荧光检测CyclinA的表达B.流式细胞术分析DNA含量C.BrdU(溴脱氧尿苷)脉冲标记D.电镜观察染色体形态6.细胞周期G2/M检查点的主要监测对象是?A.中心体复制是否完成B.DNA复制是否完整C.纺锤体组装是否正确D.细胞体积是否达标7.当细胞发生严重DNA损伤且无法修复时,p53主要通过以下哪条途径诱导细胞死亡?A.激活CyclinD-CDK4/6复合物B.上调p21基因抑制CDK活性C.促进Bax表达并启动线粒体凋亡通路D.抑制Rb蛋白的磷酸化8.下列哪项不是M期的典型特征?A.核膜破裂B.组蛋白H1高度磷酸化C.中心体迁移至细胞两极D.核糖体RNA大量合成9.细胞周期同步化实验中,使用胸苷(TdR)阻断法主要抑制的酶是?A.DNA聚合酶αB.拓扑异构酶ⅡC.核苷酸还原酶D.胸苷激酶10.关于细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的描述,正确的是?A.CDK单独存在时具有激酶活性B.CDK的活性仅受Cyclin结合调控C.CDK抑制剂(CKI)通过磷酸化抑制其活性D.CDK7参与CDK1的激活磷酸化11.若某细胞系持续高表达非降解型CyclinB,最可能出现的表型是?A.细胞停滞在G2期B.细胞无法进入有丝分裂C.染色体分离异常D.细胞周期加速12.植物细胞与动物细胞在M期的主要差异是?A.纺锤体形成机制B.染色体浓缩时间C.胞质分裂方式D.中心体复制时期13.以下哪种分子属于G1期限制点(RestrictionPoint)的关键调控因子?A.CyclinA-CDK2B.p16INK4aC.APC/C(后期促进复合物)D.Wee1激酶14.检测细胞周期蛋白B的降解可通过追踪其哪个结构域的变化?A.细胞周期蛋白框(Cyclinbox)B.破坏框(Destructionbox)C.PEST序列D.核定位信号(NLS)15.细胞周期中,组蛋白H3的磷酸化主要发生在?A.G1期B.S期C.G2期D.M期二、填空题(每空1分,共20分)1.细胞周期的四个主要阶段为______、______、______和______。2.调控G1/S期转换的核心复合物是______和______,其活性被______(如p16)和______(如p21)两类CDK抑制剂调控。3.DNA损伤时,ATM/ATR激酶通过磷酸化______激活p53,后者诱导______基因表达,从而抑制CDK活性,使细胞停滞于______期。4.M期可分为______、______、______、______和______五个亚阶段。5.中心体复制起始于______期,完成于______期;纺锤体组装检查点(SAC)通过监测______与______的连接情况,确保染色体正确分离。三、简答题(每题8分,共40分)1.简述细胞周期同步化的常用方法及其原理。2.说明G1期限制点(RestrictionPoint)的生物学意义及其调控机制。3.比较Cyclin-CDK复合物在G1期与S期的功能差异。4.解释纺锤体组装检查点(SAC)的作用机制及异常后果。5.举例说明细胞周期调控异常与疾病的关联。四、论述题(每题15分,共30分)1.详述p53在细胞周期检查点中的调控网络及其在肿瘤发生中的作用。2.结合实验技术(如流式细胞术、免疫印迹、基因敲除),设计实验验证“CyclinE过表达可促进细胞从G1期进入S期”的假设,并预期结果。答案一、单项选择题1.C2.C3.A4.B5.C6.B7.C8.D9.C10.D11.C12.C13.B14.B15.D二、填空题1.G1期、S期、G2期、M期2.CyclinD-CDK4/6、CyclinE-CDK2、INK4家族、CIP/KIP家族3.p53、p21、G14.前期、前中期、中期、后期、末期5.G1、S、动粒、纺锤体微管三、简答题1.常用同步化方法包括:①药物阻断法(如胸苷双阻断):通过抑制核苷酸还原酶(如羟基脲)或DNA聚合酶(如阿糖胞苷),将细胞阻滞于S期;②有丝分裂摇落法:利用M期细胞贴壁能力弱的特点,震荡培养瓶收集M期细胞;③血清饥饿法:降低培养基血清浓度,使细胞停滞于G0/G1期;④流式细胞术分选:根据DNA含量或标记蛋白(如BrdU)分选特定周期时相的细胞。原理均为通过物理、化学或生物手段使群体细胞停滞于同一时相,去除阻断后同步进入下一时相。2.限制点是G1期中对生长因子依赖的关键调控点,决定细胞是否进入S期或退出周期进入G0期。调控机制:生长因子通过RTK-Ras-MAPK通路激活CyclinD表达,CyclinD与CDK4/6结合磷酸化Rb蛋白;低磷酸化Rb与E2F结合抑制其活性,高磷酸化Rb释放E2F,激活S期相关基因(如CyclinE、DNA聚合酶),推动细胞通过限制点。3.G1期Cyclin-CDK复合物(CyclinD-CDK4/6、CyclinE-CDK2)主要功能是磷酸化Rb蛋白,解除其对E2F的抑制,启动S期基因转录;S期Cyclin-CDK复合物(CyclinA-CDK2)则参与DNA复制的起始与延伸:磷酸化DNA复制起始复合物(如ORC),防止复制原点重复激活,同时促进组蛋白合成与染色体组装。4.纺锤体组装检查点(SAC)通过监测动粒是否正确连接纺锤体微管调控M期进程。未连接的动粒招募Mad/Bub蛋白,形成有丝分裂停滞复合物(MCC),抑制APC/C(后期促进复合物)活性;当所有染色体正确排列于赤道板(动粒-微管连接完成),MCC解离,APC/C被激活,泛素化降解Securin(释放分离酶)和CyclinB(CDK1失活),触发染色体分离与胞质分裂。异常时(如检查点缺陷),可能导致染色体不分离,引发非整倍体,与肿瘤发生密切相关。5.例:CyclinD1过表达常见于乳腺癌、套细胞淋巴瘤。CyclinD1与CDK4结合持续磷酸化Rb,使细胞绕过G1期限制点,无限制进入S期,导致细胞增殖失控;另如p53突变(约50%人类肿瘤),失去激活p21抑制CDK的能力,DNA损伤细胞无法停滞修复,积累突变,最终癌变。四、论述题1.p53是细胞周期检查点的核心调控因子,其调控网络包括:①DNA损伤应答:ATM/ATR激酶磷酸化p53(Ser15),使其稳定并激活;②转录激活功能:p53诱导p21(CDK抑制剂)表达,抑制CyclinD-CDK4/6和CyclinE-CDK2活性,阻滞细胞于G1期;同时激活Gadd45(参与DNA修复)和14-3-3σ(结合CDK1,阻滞G2期);③凋亡调控:若损伤无法修复,p53上调Bax、PUMA等促凋亡基因,激活线粒体凋亡通路。在肿瘤中,p53突变(如DNA结合域点突变)导致其失去转录激活能力,无法启动细胞周期阻滞或凋亡,损伤细胞持续增殖,促进肿瘤发生;此外,MDM2过表达(负调控p53)或p14ARF失活(抑制MDM2)也会导致p53功能丧失,同样引发细胞周期失控。2.实验设计:①细胞模型:选择人成纤维细胞(如IMR90)或肿瘤细胞系(如HeLa),构建稳定过表达CyclinE的细胞株(实验组)及空载体对照组;②流式细胞术检测周期分布:收集两组细胞,PI染色后流式分析DNA含量,比较G1期细胞比例(实验组应低于对照组);③BrdU掺入实验:脉冲标记BrdU2小时,免疫荧
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