2025年食品检测微生物检验认证考试试卷及答案

2025年食品检测微生物检验认证考试试卷及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.依据GB4789.22022，测定乳粉中菌落总数时，若检样初始稀释度为1:10，取1mL接种于平板后计数结果为320CFU，则样品中菌落总数报告值为（）A.3.2×10³CFU/gB.3.2×10⁴CFU/gC.3.2×10⁵CFU/gD.3.2×10⁶CFU/g答案：B2.在GB4789.382012中，阪崎克罗诺杆菌选择性分离培养基ESIA的指示系统为（）A.5溴4氯3吲哚αD葡萄糖苷B.5溴4氯3吲哚βD葡萄糖醛酸苷C.5溴4氯3吲哚αD半乳糖苷D.5溴4氯3吲哚βD半乳糖苷答案：A3.采用MPN法检测即食海产品中副溶血性弧菌，若接种3管3×1g、3×0.1g、3×0.01g，阳性管数分别为320，查2022版MPN表得MPN值为（）A.93MPN/gB.150MPN/gC.240MPN/gD.460MPN/g答案：A4.关于嗜热脂肪芽孢杆菌抑制法测定牛乳中抗生素残留，下列哪项操作会导致假阴性（）A.培养基pH调至7.2±0.1B.灭菌后培养基冷却至55℃加入菌悬液C.待检乳样经134℃4s超高温处理D.对照管加入0.008IU青霉素G答案：C5.在GB4789.152016霉菌酵母计数中，加入氯霉素的作用是（）A.抑制革兰氏阴性菌B.抑制革兰氏阳性菌C.抑制放线菌D.抑制所有细菌答案：D6.采用实时荧光PCR检测沙门氏菌invA基因，下列哪种荧光探针类型属于TaqMan水解探针（）A.FRET探针B.MolecularBeaconC.Scorpion探针D.双标记TaqManMGB探针答案：D7.依据ISO16654:2001，检测大肠杆菌O157:H7的免疫磁珠分离（IMS）步骤中，磁珠与目标菌最佳结合温度为（）A.4℃B.25℃C.37℃D.42℃答案：B8.在GB4789.42024沙门氏菌检验中，TTB增菌液需加入碘液，碘液的主要作用是（）A.提供氧化还原电位B.抑制变形杆菌C.抑制粪链球菌D.提供碳源答案：B9.采用Petrifilm™快速霉菌酵母测试片，培养48h后观察到蓝绿色菌落，其最可能为（）A.青霉B.曲霉C.酵母D.毛霉答案：A10.关于李斯特菌溶血素O（LLO）的描述，错误的是（）A.属于巯基激活的穿孔毒素B.可在血琼脂上产生β溶血C.其编码基因hly位于LIPI1毒力岛D.对红细胞无溶解活性答案：D11.在GB4789.302020单核细胞增生李斯特菌检验中，PALCAM琼脂中氯化锂的最终浓度为（）A.5g/LB.10g/LC.15g/LD.20g/L答案：C12.采用VITEK®2Compact鉴定革兰氏阴性菌，若系统提示“低分辨率”，实验室下一步应（）A.直接报告结果B.补充API20E手工鉴定C.重复上机一次D.改用MALDITOFMS答案：B13.关于β葡萄糖醛酸酶（GUS）试验，下列哪种细菌通常为阳性（）A.大肠埃希氏菌B.肺炎克雷伯菌C.沙门氏菌D.志贺氏菌答案：A14.在GB4789.102020金黄色葡萄球菌检验中，BairdParker琼脂中卵黄亚碲酸钾的作用为（）A.抑制革兰氏阴性菌并指示卵磷脂酶B.促进葡萄球菌生长C.抑制霉菌D.指示凝固酶答案：A15.采用MALDITOFMS鉴定微生物，下列哪项属于样品前处理“直接涂布法”的适用范围（）A.血培养阳性瓶B.含荚膜的酵母C.丝状真菌D.非选择性平板单个菌落答案：D16.关于副溶血性弧菌神奈川现象，下列描述正确的是（）A.在Wagatsuma血琼脂上出现β溶血B.与tdh基因无关C.所有环境株均阳性D.与trh基因无关答案：A17.在GB4789.392013克罗诺杆菌检验中，mLSTVm肉汤中万古霉素浓度为（）A.5mg/LB.10mg/LC.20mg/LD.30mg/L答案：B18.采用环介导等温扩增（LAMP）检测志贺氏菌，其引物设计靶基因通常为（）A.ipaHB.invAC.hlyD.nuc答案：A19.关于微生物检验室生物安全等级，下列操作应在BSL3实验室进行的是（）A.活菌计数沙门氏菌B.质谱鉴定布鲁氏菌C.核酸提取O157:H7D.噬菌体分型金黄色葡萄球菌答案：B20.在GB4789.62016致泻大肠埃希氏菌检验中，用于检测STh肠毒素的基因探针为（）A.dnaKB.ltC.stx1D.estA答案：D21.采用微量肉汤稀释法测定MIC，若质控菌株大肠杆菌ATCC25922对氨苄西林MIC为2mg/L，而本次测定为8mg/L，应首先（）A.重复试验B.更换药敏板C.检查菌株纯度D.报告结果答案：C22.关于微生物检验用培养基性能验证，下列哪项属于“生长率”指标可接受范围（）A.≥10%B.≥30%C.≥50%D.≥70%答案：C23.在GB4789.142014蜡样芽孢杆菌检验中，MYP琼脂中甘露醇的作用为（）A.可发酵产酸指示剂变色B.抑制革兰氏阴性菌C.提供氮源D.促进芽孢形成答案：A24.采用全自动螺旋接种仪，若设定接种量为50μL，则其对应稀释度为（）A.10⁻¹B.10⁻²C.10⁻³D.10⁻⁴答案：B25.关于微生物检验用标准菌株，下列哪项为冻干株复溶后第一代（）A.F1B.F2C.F0D.F3答案：C26.在GB4789.352020乳酸菌计数中，MRS琼脂培养基pH应调节至（）A.5.4±0.2B.6.2±0.2C.7.0±0.2D.7.4±0.2答案：B27.采用流式细胞术检测果汁中酵母活菌数，其荧光染料CFDAAM的作用机制为（）A.标记细胞膜破损B.标记酯酶活性C.标记线粒体膜电位D.标记DNA答案：B28.关于微生物检验用三级水，电导率（25℃）应≤（）A.1μS/cmB.5μS/cmC.10μS/cmD.15μS/cm答案：B29.在GB4789.82024小肠结肠炎耶尔森氏菌检验中，CIN琼脂中头孢磺啶的最终浓度为（）A.2mg/LB.4mg/LC.8mg/LD.16mg/L答案：B30.采用ATP生物荧光法检测餐饮具表面清洁度，其RLU与微生物数量的相关系数r通常要求（）A.≥0.3B.≥0.5C.≥0.7D.≥0.9答案：C二、多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，多选、少选、错选均不得分）31.下列哪些属于GB4789系列规定的“指示菌”（）A.菌落总数B.大肠菌群C.霉菌D.酵母E.肠杆菌科答案：ABE32.关于副溶血性弧菌tdh基因检测，以下哪些方法可用于确证（）A.普通PCRB.实时荧光PCRC.基因芯片D.LAMPE.血清凝集答案：ABCD33.在GB4789.42024沙门氏菌血清分型中，下列哪些属于H抗原（）A.iB.dC.rD.1,2E.1,5答案：ACDE34.下列哪些因素可导致VITEK®2鉴定结果“低置信度”（）A.菌悬液浊度超标B.培养基含血C.卡片过期D.选用错误数据库E.培养温度28℃答案：ABCD35.关于克罗诺杆菌的生化特征，下列哪些为阳性（）A.氧化酶B.赖氨酸脱羧酶C.精氨酸双水解酶D.柠檬酸利用E.蔗糖发酵答案：CDE36.在GB4789.152016霉菌酵母计数中，下列哪些培养基可用于确证（）A.PDAB.DRBCC.DG18D.MEAE.NA答案：ABCD37.下列哪些属于金黄色葡萄球菌肠毒素分型（）A.SEAB.SEBC.SECD.SEDE.SEE答案：ABCDE38.关于微生物检验用质控图，下列哪些属于“警告限”（）A.均值±1sB.均值±2sC.均值±3sD.10点连续上升E.22点交替上下答案：BD39.下列哪些属于GB4789.302020李斯特菌检验选择性增菌液（）A.LB1B.LB2C.FraserD.HalfFraserE.BLEB答案：ABE40.关于微生物检验用标准物质，下列哪些属于有证标准物质（CRM）（）A.NISTSRM1547B.GBW(E)100518C.ATCC25922D.CIP53.126E.BCRCRM528答案：ABE三、判断题（每题1分，共10分。正确打“√”，错误打“×”）41.GB4789.22022规定，若所有稀释度平板菌落数均>300CFU，则以最高稀释度平板计数结果乘以稀释倍数报告。（）答案：×42.实时荧光PCR检测stx2基因时，引物stx2F/R序列在基因保守区，故可检测所有产志贺毒素大肠埃希氏菌。（）答案：√43.在PALCAM琼脂上，单核细胞增生李斯特菌因产生卵磷脂酶可形成白色沉淀晕圈。（）答案：×44.采用微量肉汤稀释法，若质控菌株MIC超出CLSI规定范围，则当日所有结果无效。（）答案：√45.霉菌酵母计数时，若平板出现蔓延性霉菌覆盖>50%面积，则该平板可记录为“过多不可计”。（）答案：√46.MALDITOFMS鉴定真菌时，直接使用甲酸提取法可提高孢子检出率。（）答案：√47.在GB4789.392013中，克罗诺杆菌确证试验包括氧化酶、蔗糖、赖氨酸脱羧酶三项。（）答案：×48.采用ATP生物荧光法，RLU值与微生物数量呈线性关系，可替代传统平板计数。（）答案：×49.在BSL2实验室操作布鲁氏菌时，必须在Ⅱ级生物安全柜内进行。（）答案：√50.根据GB4789.142014，蜡样芽孢杆菌计数结果需报告“CFU/g（mL）”，并保留两位有效数字。（）答案：√四、填空题（每空1分，共20分）51.GB4789.42024沙门氏菌血清分型中，O抗原多价A包含O2、O4、O7，其中O4对应的单因子血清为________。答案：O452.在GB4789.302020中，单核细胞增生李斯特菌确证试验包括________酶、________发酵、________水解三项。答案：β溶血、鼠李糖、木糖53.实时荧光PCR反应体系通常包含模板DNA、引物、探针、dNTP、________酶、________离子及缓冲液。答案：Taq、Mg²⁺54.依据CLSIM100Ed33，大肠杆菌ATCC25922对环丙沙星MIC质控范围为________mg/L。答案：0.004–0.01655.在GB4789.152016中，霉菌酵母计数培养温度为________℃，培养时间为________d。答案：28±1、556.采用MPN法检测大肠菌群，若接种量1mL、0.1mL、0.01mL，阳性管数310，查表得MPN值为________MPN/mL。答案：4357.在PALCAM琼脂中，氯化锂与________共同作为选择性抑制剂。答案：多粘菌素B58.依据ISO7218:2021，微生物检验用培养基性能验证包括________、________、________、________四项指标。答案：生长率、选择性、特异性、生化反应59.采用VITEK®2鉴定革兰氏阳性球菌，若结果提示“低分辨率”，应补充________手工鉴定系统。答案：APIStaph60.在GB4789.352020乳酸菌计数中，若样品含双歧杆菌，需使用________琼脂并做________环境培养。答案：TPY、厌氧五、简答题（每题5分，共30分）61.简述GB4789.22022中菌落总数计数“可接受范围”平板的选择原则。答案：选取菌落数在30–300CFU之间的平板；若仅一个稀释度符合则取该平板；若两个稀释度均符合且比值<2则取平均；若>2则取较低稀释度；若所有平板均<30CFU则取最低稀释度；若均>300CFU则取最高稀释度；若均无合适平板则按“过多不可计”处理并调整稀释度重做。62.说明实时荧光PCR检测沙门氏菌invA基因时，内标系统的作用及常见内标基因。答案：内标系统用于监控提取及扩增过程是否受抑制，避免假阴性；常见内标为外源质粒或宿主通用基因如18SrRNA、βactin，也可使用invA基因人工合成片段作为竞争性内标，通过不同荧光通道检测，确保Ct值差异在±1.5以内。63.列举GB4789.302020中单核细胞增生李斯特菌确证试验的三种生化反应及阳性判定标准。答案：①β溶血试验：在5%羊血琼脂上穿刺接种，35℃24h后出现狭窄透明β溶血环；②鼠李糖发酵：接种于含0.5%鼠李糖的发酵管，35℃24h变黄为阳性；③木糖发酵：同上，变黄为阳性；单增李斯特菌为β溶血+、鼠李糖+、木糖−。64.简述MALDITOFMS鉴定丝状真菌的前处理步骤。答案：取新鲜菌落置于靶板，加入70%甲酸1μL裂解30s，再加入等量乙腈混匀，室温干燥后覆盖α氰基4羟基肉桂酸基质，干燥后立即检测；若孢子壁厚可预先用玻璃珠震荡破壁，或采用提取法：用乙醇甲酸乙腈三步提取，离心后取上清点靶。65.说明GB4789.152016中霉菌酵母计数“蔓延性霉菌”记录方式及对结果的影响。答案：若蔓延覆盖<1/4面积，可计数未受影响区域并估算全板；若>1/4但<1/2，记录“蔓延（P）”并选取另一稀释度；若>1/2，记录“过多不可计（TNTC）”并采用更高稀释度重做；蔓延导致无法准确计数时需重新检验，并在报告注明“蔓延”。66.简述微量肉汤稀释法测定MIC时，如何设置质控及判定标准。答案：每批次需加入质控菌株如大肠杆菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC29213，按CLSI规定浓度范围判定；若MIC超出允许范围，则当日结果无效；同时设阳性生长对照（无抗生素）和阴性对照（仅肉汤）；质控图采用Westgard多规则，12s、13s、22s、R4s、10x规则联合判断。六、案例分析题（每题10分，共40分）67.某品牌婴幼儿配方奶粉检出疑似克罗诺杆菌，初筛ESIA平板出现典型蓝绿色菌落，革兰氏阴性杆菌，氧化酶阴性，蔗糖阳性，赖氨酸脱羧酶阴性。请写出后续确证流程及报告方式。答案：①取可疑菌落接种于TSA25℃48h，观察黄色素；②做vp试验（VP+）、吲哚（−）、柠檬酸（+）、山梨醇（−）、肌醇（+）、精氨酸（+）；③实时荧光PCR检测16SrRNA特异性片段；④若以上均符合，则报告“检出克罗诺杆菌（Cronobacterspp.）”，并依据GB4789.392013计算MPN，报告值为>100MPN/100g。68.某即食鸡胸肉样品，客户要求检测金黄色葡萄球菌肠毒素SET。实验室采用ELISA试剂盒检测，结果A450值为0.42，阴