CN110283048B 大麻二酚晶体的制备方法 （云南翰谷生物科技有限公司）

(10)授权公告号CN110283048B(21)申请号20191057711(65)同一申请的已公布的文献号(43)申请公布日2019.09.27审查员富佳玉(73)专利权人云南翰谷生物科技有限公司地址655700云南省曲靖市师宗县大同工业园区凤翔轻工业园区(72)发明人李琳婧肖丰坤雷鹏陈黎飞施豪(74)专利代理机构北京东方亿思知识产权代理有限责任公司11258代理人张兵兵(54)发明名称大麻二酚晶体的制备方法(57)摘要本发明涉及大麻二酚晶体的制备方法。本发明的方法包括以下步骤：(1)将工业大麻的花叶经脱羧的提取物与第一溶剂混合，在低温下静置沉淀，分离去除沉淀物，并将含大麻二酚的溶剂浓缩，得到浓缩的提取物；(3)将浓缩的提取物与第二溶剂混合并过滤，将滤液进行高压制备液相色谱，收集含大麻二酚的馏分，然后去除馏分中的溶剂，得到大麻二酚粗品；(4)将大麻二酚粗品与结晶溶剂混合，在低温下进行结晶，得到大麻二酚晶体。本发明的方法能够以高的总提取率获21.大麻二酚晶体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)将工业大麻的花叶粉进行脱羧和提取，获得经脱羧的提取物，其中脱羧步骤在80至130℃的温度下进行；(2)将经脱羧的提取物与第一溶剂混合，在低于20℃的温度下静置沉淀，分离去除沉淀(3)将浓缩的提取物与第二溶剂混合并过滤，将滤液进行高压制备液相色谱，收集含大麻二酚的馏分，然后去除馏分中的溶剂，得到大(4)将大麻二酚粗品与结晶溶剂混合，在低于室温的温度下进行结晶，得到大麻二酚晶其中在步骤(1)中，用于提取的溶剂是正己烷、石油醚、丙酮或其任意组合；在步骤(2)且石油醚与丙酮的体积比在15:1至10:1的范围内；并且其中在高压制备液相色谱中，采用的制备柱直径在200mm至1500mm范围内；采用石油醚和丙酮作为流动相进行梯度洗脱；在初始的洗脱阶段中，采用体积比12:1的石油醚和丙酮作为洗脱溶剂；在中间的洗脱阶段中，采用体积比6:1的石油醚和丙酮作为洗脱溶剂；在最后的洗脱阶段中，采用体积比1:1的石油醚和丙酮作为洗脱溶剂。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述提取步骤在40至65℃的温度下进行。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在高压制备液相色谱中采用的制备柱直径为200mm,并且流动相的流速在200至350ml/min范围内；或者在高压制备液相色谱中采用的制备柱直径为1200mm,并且流动相的流速在15至25L/min范围内。5.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(4)中，采用活性炭、硅胶、氧化铝中的一种或几种作为脱色剂进行脱色。6.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(4)中获得的大麻二酚晶体含至少99.3%的大麻二酚。3技术领域[0001]本发明涉及大麻素类晶体的工业制备领域，具体地涉及高纯度大麻二酚晶体的制备方法。背景技术[0002]大麻(CannabissativaL.)是一种具有重要经济价值和药用价值的一年生草本化合物，其主要包括四氢大麻酚(THC)、大麻二酚(CBD)、大麻酚(CBN)及其羧基化合物等。[0003]在大麻素类化合物中，CBD是大麻中非成瘾性成分，能抑制某些多酚对人体神经系统的不利影响，并且具有阻断乳腺癌转移、治疗癫痫、抗类风湿关节炎等一系列生理活性功[0004]目前，工业上通常采用以下方法来生产大麻二酚晶体：柱层析、超临界流体或亚临境污染较大，而且采用的大孔吸附树脂与聚酰胺层析柱使用寿命较短。更重要的是，柱层析的效果严重依赖于每次操作的条件、操作人员的熟练程度，使得所得产品的品质(纯度、杂[0006]超临界流体或亚临界流体萃取技术具有设备要求高、生产成本高、操作复杂等问题，而且，其获得的大麻二酚纯度仍然较低，不适宜用于医药领域。现有的溶剂萃取通常需要对原料进行酶解预处理，溶剂消耗量巨大，提取率非常低，且后续分离过程复杂繁琐。[0007]生物合成和化学合成目前的生产效率都很低。而且，由于CBD存在多个手性中心和顺反异构的双键，因此分离提纯步骤复杂，成本较高。因此，生物合成和化学合成仅仅适于合成少量样品，目前不适宜进行工业大规模应用。[0008]此外，现有的方法均难以有效且稳定地控制致幻成瘾的THC的含量<0.3%,难以满足安全监管部门的要求，不利于大麻二酚产品的运输、[0010]本发明的目的在于提供一种大麻二酚晶体的制备方法，其不仅能够极大地提高工业大麻中大麻二酚的提取率和提取纯度，而且能够有效地降低产品中THC的含量，以满足安全性要求。[0011]为了实现上述目的，本发明提供大麻二酚晶体的制备方法，该方法包括以下步骤：[0012](1)将工业大麻的花叶粉进行脱羧和提取，获得经脱羧的提取物；[0013](2)将经脱羧的提取物与第一溶剂混合，在低温下静置沉淀，分离去除沉淀物，并将含大麻二酚的溶剂浓缩，得到浓缩的提取物；[0014](3)将浓缩的提取物与第二溶剂混合并过滤，将滤液进行高压制备液相色谱，收集4含大麻二酚的馏分，然后去除馏分中的溶剂，得到大麻二酚粗品；[0016]发明人发现，巧妙地将脱羧、提取、沉淀、高压制备液相和合，能够以高提取率获得高纯度的大麻二酚晶体。尤其是，通过采用特定的提取溶剂、沉淀溶剂、高压制备液相和/或特定的工艺参数，能够进一步提高提取率和产品纯度。采用本发明的方法，能够获得80%以上、甚至高达92%以上的总提取率，同时获得99%以上、甚至高达99.8%的纯度。[0017]通过本发明的方法获得的晶体几乎不含THC,例如包含小于0.3%、优选含小于0.1%、更优选小于0.05%的THC、最优选地小于0.01%的THC。[0018]更重要的是，本发明的方法尤其适合用于工业大规模生产。即便在大规模生产中，本发明的方法仍然能够保持较高的纯度。而且，本发明的方法还可以具有操作相对简单、成附图说明[0019]图1是大麻二酚(CBD)和四氢大麻酚(THC)标准品的液相色谱图。[0020]图2是实施例3中由高压制备液相色谱获得的CBD粗品的液相色谱图。[0021]图3是实施例3制备的CBD纯品晶体的液相色谱图。具体实施方式[0024]“四氢大麻酚”(tetrahy人产生幻觉、上瘾，是目前已知的决定大麻毒品性质的物质，所以联合国公约和许多国家的植的大麻基本上都属于工业大麻。异构体。这也使得采用常规的方法难以将THC与CBD完全区分开，很难完全去除CBD产品中的程中花叶粉原料的量在1吨以上，更优选地至少1.5吨。相比之下，一般来说，小规模生产主要采用500kg以下或50kg以上的投料量，实验室主要采用10kg以下的投料量。然而，在相同或其他情况下，其他实施方案也可能是优选的。另外，一个或多个优选的实施方案的叙述不意味着其他实施方案是不可用的，并且不旨在将其他实施方案排除在本发明[0028]在下文中，通过一些实施方式来具体地说明本发明的技术方案，但这些实施方式仅仅是说明性的，不应理解为对本发明的限制。5[0029]具体来说，本发明提供一种大麻二酚晶体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：[0030](1)将工业大麻的花叶粉进行脱羧和提取，获得经脱羧的提取物；[0031](2)将经脱羧的提取物与第一溶剂混合，在低于20℃的温度下静置沉淀，分离去除沉淀物，并将含大麻二酚的溶剂浓缩，得到浓缩的提取物；[0032](3)将浓缩的提取物与第二溶剂混合并过滤，将滤液进行高压制备液相色谱，收集含大麻二酚的馏分，然后去除馏分中的溶剂，得到大麻二酚粗品；[0033](4)将大麻二酚粗品与结晶溶剂混合，在低于室温的温度下进行结晶，得到大麻二酚晶体。[0034]在本发明的方法中，采用工业大麻的花叶粉作为原料。该原料可以直接商业购得，也可以从工业大麻的植物经干燥、研磨、筛分等步骤来获得。在一些实施方式中，工业大麻花叶粉的平均粒径为50-100目。优选地，工业大麻花叶粉的粒径为60-80目。过大的粉末颗粒需要较长的时间进行处理；而过小的粉末颗粒则容易吸湿、粘结，漂浮到环境中，且表面能过高，安全性风险较高。[0035]在步骤(1)中，脱羧步骤可以将花叶粉中的大部分酸性物质转化成中性物质。需要选择脱羧的时间和温度，以获得适于后续处理的物质。过高的温度会使某些活性物质分解、蒸发、甚至碳化；而过低的温度难以使酸性物质脱羧，或者脱羧不完全，延长脱羧所花费的时间。优选地，进行脱羧步骤，以使至少97%的酸性大麻类物质转化成其中性形式同时确保小于5%的活性物质分解或蒸发。在一些实施方式中，脱羧步骤可以在80至130℃的温度下进行。优选地，脱羧步骤在90至120℃的温度下进行。在一些实施方式中，脱羧步骤进行1.5至4h,优选地进行2至3h。[0036]在步骤(1)中，通过提取步骤，将花叶粉中的大麻二酚等活性物质提取到有机溶剂中，然后将含大麻二酚的有机溶剂浓缩，得到提取物(浸膏)。可以通过常规的方法对有机溶剂进行浓缩，例如常压蒸发、减压蒸发、旋转蒸发等。可以进行至少一次提取，优选地进行至少两次提取。进行多次提取时，将每次提取获得的含大麻二酚的有机溶剂合并进行浓缩。通常，为了操作简便并提高安全性，在常压下进行提取步骤。[0037]用于提取的溶剂是能够较好地溶解大麻二酚的有机溶剂，同时其能够容易地蒸发浓缩，以获得含大麻二酚的提取物浸膏。在一些优选的实施方式中，用于提取的溶剂是正己烷、石油醚、丙酮或其任意组合。更优选地，采用正己烷作为用于提取的溶剂。[0038]根据原料的量或原料中大麻二酚的含量，可以选择合适的用于提取的溶剂的量。优选地，花叶粉的重量与每次用于提取的溶剂的量的重量比在1:4至1:10的范围内。更优选地，花叶粉的重量与每次用于提取的溶剂的量的重量比在1:5至1:8的范围内。[0039]可以根据大麻二酚的溶解速率和在溶剂中的溶解度以及用于提取的溶剂等因素，来选择合适的提取的温度和时间。而且，在提取温度下，溶剂和活性物质不会大量蒸发。优选地，提取步骤在高于室温的温度下进行，以使大麻二酚表现出较高的溶解速率和在溶剂中的溶解度。在一些实施方式中，提取步骤在40至65℃的温度下进行。优选地，可以在45至60℃下进行提取。在一些的实施方式中，每次提取进行1至3小时。优选地，每次提取进行1.5至2.5小时。[0040]在步骤(1)中，可以在脱羧步骤之前或者之后，进行提取步骤。6[0041]在一些实施方式中，在步骤(1)中，在脱羧之后进行提取。先对工业大麻的花叶粉进行脱羧，再将经脱羧的花叶粉进行提取，获得经脱羧的提取物。[0042]在另一些实施方式中，在步骤(1)中，在脱羧之前进行提取。先对工业大麻的花叶粉进行提取，获得含大麻二酚的提取物，再将含大麻二酚的提取物进行脱羧，获得经脱羧的提取物。[0043]发明人发现，在相同的条件(包括相同量的提取溶剂)下，采用不同的脱羧步骤和提取步骤的顺序，获得了基本上相同的总提取率；但是，在采用先提取后脱羧的方法时，脱羧步骤的原料明显比采用先脱羧后提取的方法时少，这大大降低了脱羧步骤的能量消耗和处理时间。因此，在一些实施方式中，先提取后脱羧的方法是非常有利的，尤其对工业规模应用来说。[0044]在步骤(2)中，将经脱羧的提取物与第一溶剂混合，在低温下静置沉淀，分离去除[0045]在沉淀法精制工艺中，所采用的第一溶剂(也称为“沉淀精制溶剂”)可以是无水乙醇、丙酮、二氯甲烷或其任意组合。优选地，采用无水乙醇、丙酮或及任意组合作为第一溶[0046]发明人发现，通过特定地采用丙酮作为沉淀精制溶剂，获得了比其他有机溶剂明应用中，仍然能够保持较高的总提取率，同时纯度不显著降低。[0047]这是非常出人预料的，因为本领域技术人员在将生产规模进行放大(例如扩大100倍、200倍或500倍)时，总提取率、纯度、生产效率等通常会受到不同总提取率明显降低。而且，本领域中已知的溶剂种类繁多、性质多样，各溶剂的组合数量更加庞大。[0048]在静置沉淀过程中，第一溶剂的量为提取物浸膏重量的5至15倍，优选地8至12倍。更优选地，第一溶剂的量为提取物浸膏重量的10倍。[0049]静置沉淀过程优选地在低于20℃的温度下进行，更优选地在-20℃至15℃的温度下进行，甚至更优选地在-10℃至10℃的温度下进行。最优选地在4℃±1℃下进行。[0050]静置沉淀过程优选地进行2至8h,更优选地3-5h。在一些优选的实施方式中，静置沉淀过程进行4h。[0051]发明人发现，采用上述优选方案进行静置沉淀，能够很好地使其他活性物质在第一溶剂中沉淀，同时绝大部分的大麻二酚保持在第一溶剂中。知的离心机来进行离心，例如由上海始恒仪器设备有限公司生产的DL-6000B型低速冷冻离心机和张家港市超群离心机有限公司生产型号为LLW450卧式螺旋离心机。[0053]在步骤(3)中，将浓缩的提取物与第二溶剂混合。优选地，浓缩的提取物与第二溶剂的重量比在1:2至1:6范围内，更优选地在1:3至1:5范围内。[0054]在一些优选的实施方式中，第二溶剂是石油醚和丙酮的混合溶液。更优选地，石油醚与丙酮的体积比在15:1至10:1的范围内。在一些实施方式中，石油醚与丙酮的体积比为7[0055]浓缩的提取物溶解在第二溶剂中后，可以进行过滤。在一些实施方式中，采用0.45微米的尼龙滤膜来进行过滤，去除固体不溶物。[0056]在步骤(3)中，将滤液进行高压制备液相色谱。收集含大麻二酚的馏分，然后去除[0057]采用高压制备液相色谱，可以大大提高纯化效率，同时获得稳定的纯化效果，明显减小人为操作造成的偏差和引入的额外杂质。获得的含大麻二酚的馏分以及随后的大麻二酚粗品均具有较高的可重复性，满足质量管理体系的要求，因此尤其适合用于工业生产。而常规的柱层析工艺等其他色谱分离方法无法满足大规模应用的要求。[0058]在高压制备液相色谱中，可以采用直径在200mm至1500mm范围内的制备柱。例如，的提取物的上样量分别在180g-220g、200g-1200g、1.0kg-3.0kg、2.0kg-8.0kg、6kg-20kg或12kg-30kg的范围内。优选地，相应地，浓缩的提取物的上样量分别在180g-220g、300g-[0060]在高压制备液相色谱中，制备柱的长度不受特别限制。本领域技术人员能够合理地确定合适的制备柱长度。例如，制备柱的长度可以是20cm至100cm范围内。在一个示例性[0061]在高压制备液相色谱中，优选地，采用石油醚和丙酮作为流动相。在用体积比12:1的石油醚和丙酮作为洗脱溶剂；在中间的洗脱阶段中，采用体积比6:1的石油醚和丙酮作为洗脱溶剂；在最后的洗脱阶段中，采用体积比1:1的石油醚和丙酮作为洗脱溶[0062]根据不同的制备直径，选择合适的流动相的流速。优选地，采用直径为200mm的制备柱时，流速200-350ml/min;采用直径为500mm的制备柱时，流速800-1000ml/min;采用直径为1000mm的制备柱时，流速15-20L/min;或者，采用直径为1200mm的制备柱时，流速16-的制备柱时，流速850-950ml/min;采用直径为1000mm的制备柱时，流速16-17L/min;或者，采用直径为1200mm的制备柱时，流速18-22L/min。发明柱直径参数时，不仅尽可能提高了纯化的效率，明显缩短总提取时长，而且获得了较高的提[0063]在一些实施方式中，在制备柱中，色谱填料为SephadexLH-20羟丙基葡萄糖凝胶，平均粒径20微米，孔径100Å至150Å。[0064]在高压制备液相色谱中，可以采用紫外检测器来检测馏分。在一些优选的实施方[0065]在分析检测部分，也可以采用高效液相色谱法检测馏分。在一些优选的实施方式中，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱。柱长可以为25cm,内径为4.6mm,粒径为5.0μm。在用于检测的色谱中，采用乙腈作为流动相A,磷酸盐缓冲液(pH=4)作为流动相B。优选地，可以按照A:B=85:15的体积比进行洗脱。在一些优选的实施方式中，洗脱液的流速可以是1ml/min。8[0066]除另有说明外，在本发明的方法中，在高压制备液相色谱中，将不符合纯度要求的馏分合并，以回收样品和溶剂。将回收的样品和溶剂加入到浓缩的提取物，混合均匀，然后再进行高压制备液相色谱。[0067]在步骤(4)中，将大麻二酚粗品与结晶溶剂混合溶解。将溶液在低温下进行结晶，得到大麻二酚晶体。在步骤(4)的结晶中，结晶完成后使用结晶溶剂进行反复淋洗，得到高纯度且不含有致幻或成瘾成分THC的大麻二酚晶体。[0068]优选地，结晶在低于20℃的温度下进行，更优选地在-20℃至15℃的温度下进行，甚至更优选地在-10℃至10℃的温度下进行。最优选地在4℃±1℃下进行。[0069]结晶溶剂可以是石油醚、正己烷、乙醇中的一种或几粗品重量的5至15倍，优选地8至12倍。更优选地，结晶溶剂的量为大麻二酚粗品重量的10[0070]结晶过程优选地进行8至24h,更优选地10-20h。在一些优选的实施方式中，结晶过程进行12-15h。[0071]发明人发现，采用上述优选的范围时，获得了明显更优的结晶效果。获得的大麻二酚晶体不仅具有较完整的形貌，而且晶体尺寸分布较窄，密度较高，颗粒流动性好，有利于长期贮存和运输。以采用活性炭、硅胶、氧化铝中的一种或几种作为脱色剂。脱色剂的用量为大麻二酚粗品重量的5%-20%,优选地10%-15%。脱色时间不受特别的限制。本领域技术人员根据实际需要和样品状态，能够合理地确定脱色的时间。在一些实施方式中，脱色进行10-30min。优选[0073]步骤(4)中获得的大麻二酚晶体包含至少99.3%的大麻二酚。在进一步优选的实施方式中，步骤(4)中获得的大麻二酚晶体包含至少99.5%、甚至高达99.8%的的大麻二[0074]在本发明的方法中，除另有说明外，步骤(1)-(4)中所用到的有机溶剂均可以回能够提高产品的总提取率和纯度。[0075]发明人发现，本发明的方法能够以80%以上的总提取率，从花叶粉中获得高纯度大麻二酚晶体。在一些优选的实施方式中，总提取率能够达到85%以上，甚至达到90%以上。这在工业规模应用中是极其有利。发明人调研并尝试了多种现有技术的方案，总提取率均不太满意，通常在70%左右、低于80%,无法满足大规模工业生产的需求。[0076]此外，通过本发明的方法，能够采用工业级的溶剂进行大麻二酚晶体的制备，而无需采用纯度更高的溶剂(例如，色谱纯等级)。这进一步大大降低了本发明方法的成本，降低了对操作人员、设备的严格要求，简化了操作步骤，同时仍然能够获得较高的提取率和高纯度的大麻二酚晶体。[0078]通过以下非限制性实施例和对比实验进一步说明本发明。除非另有声明，以下实施例中所报道的所有份、百分比、倍数和比值都是基于重量计。而且，实施例中使用的所有试剂都可商购并且可直接使用而无需进一步处理。9[0079]材料和仪器[0080]供应商工业大麻花叶粉云南牧亚农业科技有限公司正己烷，工业级昆明权铭经贸有限公司无水乙醇，工业级昆明权铭经贸有限公司石油醚，工业级昆明权铭经贸有限公司丙酮，工业级昆明权铭经贸有限公司CBD和THC标准品北京芬格尔安科技有限责任公司由张家港市超群离心机有限公司生产的LLW450型卧式螺旋离心机。[0082]工业级高压制备液相色谱系统：由江苏汉邦科技有限公司生产，型号分别为温设定为30℃。[0083]制备色谱柱填料为SephadexLH-20羟丙基葡萄糖凝胶，粒径20μm,孔径[0084]分析色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，柱长为25cm,内径为4.6mm,粒径为5.0μm。采用乙腈作为流动相A,采用磷酸盐[0086]称取10kg粒径60目的CBD含量为0.94%的工业大麻花叶粉，在100℃下高温脱羧[0087]然后，在加热以保持在60℃温度下，将脱羧的粉末与正己烷以1:6的重量比混合，在搅拌下进行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重复2次提取步骤。将回收的正己烷合并、蒸发浓缩，得到690g提取物浸膏，CBD含量为13.4%。[0088]将提取物浸膏与无水乙醇以1:10的重量比混合，并在4℃下静置沉淀4h,然后DL-6000B型低速冷冻离心机在1000rpm转速下离心分离去除沉降物。将含CBD的无水乙醇浓缩，得到580g处理后的浸膏，CBD含量为15.3%。[0089]称取200g处理后的浸膏，并以1:3的重量比与石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的体积比为12:1)的混合溶剂混合。将混合物在0.45微米的尼龙滤膜上过滤。将滤液进样到型号为DAC200的高压制备液相色谱系统中，采用石油醚和丙酮为洗脱溶剂梯度洗脱(第0-2小时的初始洗脱过程中，采用12:1的的体积比；第3-4小时采用6:1的体积比；第5-6小时采用1:1的量为95.4%。[0090]将CBD粗品与正己烷以1:10的重量比混合。在搅拌下向混合物中加入CBD粗品重量的10%的活性炭，脱色20min后过滤。将滤液在4℃下放置结晶12h。然后进行过滤，得到高纯度白色CBD晶体27.3g,CBD含量为99.5%。[0091]经计算，CBD总提取率为83[0093]称取10kg粒径60目的CBD含量为0.94%的工业大麻花叶粉，在100℃下高温脱羧[0094]然后，在加热以保持在60℃温度下，将脱羧的粉末与95%乙醇以1:6的重量比混浓缩，得到1780g提取物浸膏，CBD含量为5.1[0095]将提取物浸膏与无水乙醇以1:10的重量比混合，并在4℃下静置沉淀4h,然后低速冷冻离心机在1000rpm转速下离心分离去除沉降物。将含CBD的无水乙醇浓缩，得到760g处理后的浸膏，CBD含量为11.6%。[0096]称取200g处理后的浸膏，并以1:3的重量比与石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的体积比为12:1)的混合溶剂混合。将混合物在0.45微米的尼龙滤膜上过滤。将滤液进样到型号为DAC200的高压制备液相色谱系统中，采用石油醚和丙酮为洗脱溶剂梯度洗脱，流速300ml/[0097]将CBD粗品与正己烷以1:10的重量比混合。在搅拌下向混合物中加入活性炭，脱色20min后过滤。将滤液在4℃下放置结晶12h。然后进行过滤，得到高纯度白色CBD晶体19.8g,CBD含量为99.2%。[0098]经计算，CBD总提取率为7[0099]实施例3[0100]称取10kg粒径60目的CBD含量为0.94%的工业大麻花叶粉，在100℃下高温脱羧[0101]然后，在加热以保持在60℃温度下，将脱羧的粉末与正己烷以1:6的重量比混合，在搅拌下进行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重复2次提取步骤。将回收的正己烷合并、蒸发浓缩，得到690g提取物浸膏，CBD[0102]将提取物浸膏与丙酮以1:10的重量比混合，并在4℃下静置沉淀4h,然后低速冷冻离心机在1000rpm转速下离心分离去除沉降物。将含CBD的丙酮浓缩，得到405g处理后的浸膏，CBD含量为22.8%。[0103]称取200g处理后的浸膏，并以1:3的重量比与石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的体积比为12:1)的混合溶剂混合。将混合物在0.45微米的尼龙滤膜上过滤。将滤液进样到型号为DAC200的高压制备液相色谱系统中，采用石油醚和丙酮为洗脱溶剂梯度洗脱，流速300ml/min。合并含CBD的溶剂，并蒸发去除溶剂，得到45.4gCBD粗品。通过HPLC对CBD粗品进行分[0104]将CBD粗品与正己烷以1:10的重量比混合。在搅拌下向混合物中加入活性炭，脱色20min后过滤。将滤液在4℃下放置结晶12h。然[0105]经计算，CBD总提取率[0106]实施例4[0107]称取10kg粒径60目的CBD含量为0.94%的工业大麻花叶粉，在100℃下高温脱羧[0108]然后，在加热以保持在60℃温度下，将脱羧的粉末与正己烷以1:6的重量比混合，在搅拌下进行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重复2次提取步骤。将回收的正己烷合并、蒸11发浓缩，得到690g提取物浸膏，CBD[0109]将提取物浸膏与丙酮以1:10的重量比混合，并在4℃下静置沉淀4h,然后低速冷冻离心机在1000rpm转速下离心分离去除沉降物。将含CBD的丙酮浓缩，得到405g处理后的浸[0110]称取250g处理后的浸膏，并以1:3的重量比与石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的体积比为12:1)的混合溶剂混合。将混合物在0.45微米的尼龙滤膜上过滤。将滤液进样到型号为DAC200的高压制备液相色谱系统中，采用石油醚和丙酮为洗脱溶剂梯度洗脱，流速300ml/[0111]将CBD粗品与正己烷以1:10的重量比混合。在搅拌下向混合物中加入活性炭，脱色20min后过滤。将滤液在4℃下放置结晶12h。然后进行过滤，得到高纯度白色CBD晶体45.1g,CBD含量为99.1%。[0112]经计算，CBD总提取率为77.03%。[0114]称取10kg粒径60目的CBD含量为0.94%的工业大麻花叶粉，在100℃下高温脱羧[0115]然后，在加热以保持在60℃温度下，将脱羧的粉末与正己烷以1:6的重量比混合，在搅拌下进行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重复2次提取步骤。将回收的正己烷合并、蒸发浓缩，得到690g提取物浸膏，CBD[0116]将提取物浸膏与丙酮以1:10的重量比混合，并在4℃下静置沉淀4h,然后低速冷冻离心机在1000rpm转速下离心分离去除沉降物。将含CBD的丙酮浓缩，得到405g处理后的浸膏，CBD含量为22.8%。[0117]称取200g处理后的浸膏，并以1:3的重量比与石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的体积比为12:1)的混合溶剂混合。将混合物在0.45微米的尼龙滤膜上过滤。将滤液进样到型号为DAC200的高压制备液相色谱系统中，采用石油醚和丙酮为洗脱溶剂梯度洗脱，流速400ml/[0118]将CBD粗品与正己烷以1:10的重量比混合。在搅拌下向混合物中加入活性炭，脱色20min后过滤。将滤液在4℃下放置结晶12h。然后进行过滤，得到高纯度白色CBD晶体37.1g,CBD含量为98.9%。[0119]经计算，CBD总提取率为79.04%。[0121]称取10kg粒径60目的CBD含量为0.94%的工业大麻花叶粉，在100℃下高温脱羧[0122]然后，在加热以保持在60℃温度下，将脱羧的粉末与正己烷以1:6的重量比混合，在搅拌下进行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重复2次提取步骤。将回收的正己烷合并、蒸发浓缩，得到690g提取物浸膏，CBD含量为13.4%。[0123]将提取物浸膏与二氯甲烷以1:10的重量比混合，并在4℃下静置沉淀4h,然后低速冷冻离心机在1000rpm转速下离心分离去除沉降物。将含CBD的无水乙醇浓缩，得到672g处理后的浸膏，CBD含量为13.5%。[0124]称取200g处理后的浸膏，并以1:3的重量比与石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的体积比为12:1)的混合溶剂混合。将混合物在0.45微米的尼龙滤膜上过滤。将滤液进样到型号为DAC200的高压制备液相色谱系统中，采用石油醚和丙酮为洗脱溶剂梯度洗脱，流速300ml/[0125]将CBD粗品与正己烷以1:10的重量比混合。在搅拌下向混合物中加入活性炭，脱色20min后过滤。将滤液在4℃下放置结晶12h。然后进行过滤，得到高纯度白色CBD晶体23.2g,CBD含量为95.8%。[0127]实施例7-参考实施例1的工业级规模应用[0128]称取1.5吨粒径60目的CBD含量为0.94%的工业大麻花叶粉，在100℃下高温脱羧2h。然后，在加热以保持在60℃温度下，将脱羧的粉末下进行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重复2得到99.3g提取物浸膏，CBD含量为13.3%。[0129]将提取物浸膏与无水乙醇以1:10的重量比混合，并在4℃下静置沉淀4h,然后LLW450型卧式螺旋离心机在1000rpm转速下离心分离去除沉降物。将含CBD的无水乙醇浓[0130]称取15kg处理后的浸膏，并以1:3的重量比与石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的体积比为12:1)的混合溶剂混合。将混合物在0.45微米的尼龙滤膜上过滤。将滤液进样到型号为DAC1200的高压制备液相色谱系统中，采用石油醚和丙酮为洗脱溶剂梯度洗脱，流速20L/[0131]将CBD粗品与正己烷以1:10的重量比混合。在搅拌下向混合物中加入活性炭，脱色20min后过滤。将滤液在4℃下放置结晶12h。然后进行过滤，得到高纯度白色CBD晶体1.95kg,CBD含量为99.3%。[0132]经计算，CBD总提取率为75[0133]实施例8-参考实施例3的工业级规模应用[0134]称取1.5吨粒径60目的CBD含量为0.94%的工业大麻花叶粉，在100℃下高温脱羧[0135]然后，在加热以保持在60℃温度下，将脱羧的粉末与正己烷以1:6的重量比混合，在搅拌下进行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重复2次提取步骤。将回收的正己烷合并、蒸[0136]将提取物浸膏与丙酮以1:10的重量比混合，并在4℃下静置沉淀4h,然后LLW450型卧式螺旋离心机在1000rpm转速下离心分离去除沉降物。将含CBD的丙酮浓缩，得到58.2kg处理后的浸膏，CBD含量为22.8%。[0137]称取15kg处理后的浸膏，并以1:3的重量比与石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的体积比为12:1)的混合溶剂混合。将混合物在0.45微米的尼龙滤膜上过滤。将滤液进样到型号为DAC1200的高压制备液相色谱系统中，采用石油醚和丙酮为洗脱溶剂梯度洗脱，流速20L/[0138]将CBD粗品与正己烷以1:10的重量比混合。在搅拌下向混合物中加入活性炭，脱色20min后过滤。将滤液在4℃下放置结晶12h。然后进行过滤，得到高纯度白色CBD晶体3.2kg,CBD含量为99.6%。[0139]经计算，CBD总提取率为87.7[0140]实施例9-在脱羧之前进行提取[0141]在工艺条件和物料用量不变的情况下，将实施例3中提取步骤