2025 年大学生命科学（分子生物综合实训）单元考核试卷

2025年大学生命科学（分子生物综合实训）单元考核试卷

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______一、选择题（总共10题，每题3分，每题只有一个正确答案，请将正确答案填入括号内）1.以下哪种技术常用于DNA的定量分析？（）A.PCR技术B.凝胶电泳技术C.分光光度法D.蛋白质印迹技术2.在分子克隆中，常用的载体不包括以下哪种？（）A.质粒B.噬菌体C.病毒D.核糖体3.以下关于限制性内切酶的说法，错误的是（）A.能识别特定的DNA序列B.切割DNA产生粘性末端或平末端C.常用于DNA的体外重组D.只存在于原核生物中4.基因表达载体通常不包含以下哪个元件？（）A.启动子B.终止子C.增强子D.核糖体结合位点5.蛋白质印迹技术中，用于检测蛋白质的试剂是（）A.核酸探针B.抗体C.限制性内切酶D.Taq酶6.以下哪种方法可用于检测基因的转录水平？（）A.RT-PCRB.SouthernblotC.WesternblotD.基因芯片技术7.分子克隆中，连接目的基因和载体的酶是（）A.DNA聚合酶B.逆转录酶C.限制性内切酶D.DNA连接酶8.以下关于质粒的描述，正确的是（）A.是染色体外的双链环状DNA分子B.不能在宿主细胞中自主复制C.只存在于细菌中D.不含有抗生素抗性基因9.基因芯片技术的原理是（）A.核酸分子杂交B.蛋白质与抗体结合C.酶促反应D.细胞融合10.在PCR反应中，引物的作用是（）A.提供模板B.催化DNA合成C.与模板结合，引导DNA合成D.降解模板DNA二、多项选择题（总共5题，每题4分，每题有两个或两个以上正确答案，请将正确答案填入括号内，多选、少选、错选均不得分）1.以下哪些属于分子生物学常用的实验技术？（）A.基因克隆技术B.蛋白质表达技术C.细胞培养技术D.组织切片技术2.基因表达载体的组成元件包括（）A.启动子B.终止子C.多克隆位点D.增强子3.蛋白质印迹技术的步骤包括（）A.蛋白质样品的制备B.凝胶电泳分离蛋白质C.蛋白质转移到膜上D.膜上蛋白质的检测4.以下哪些因素会影响PCR反应的结果？（）A.引物的质量B.Taq酶的活性C.dNTP的浓度D.模板DNA的纯度5.分子克隆中，筛选阳性克隆的方法有（）A.抗生素抗性筛选B.蓝白斑筛选C.酶切鉴定D.测序鉴定三、判断题（总共10题，每题2分，请判断下列说法的对错，对的打“√”，错的打“×”）1.限制性内切酶只能切割双链DNA。（）2.基因表达载体中的启动子决定了基因转录的起始位置。（）3.蛋白质印迹技术只能检测蛋白质的分子量，不能检测其表达量。（）4.PCR反应中，退火温度越高，引物与模板的结合越紧密。（）5.质粒是一种天然的基因表达载体，不需要进行人工改造。（）6.基因芯片技术可以同时检测大量基因的表达情况。（）7.分子克隆中，目的基因和载体的连接是随机的，不需要特定的酶。（）8.蛋白质印迹技术中，使用的膜只能是硝酸纤维素膜。（）9.RT-PCR技术可以用于检测RNA病毒的核酸。（）---10.基因表达载体中的多克隆位点是多个限制性内切酶切割位点的集合。（）四、简答题（总共3题，每题10分）1.简述PCR技术原理及主要步骤。2.请说明基因表达载体构建的基本流程及各元件的作用。3.蛋白质印迹技术的原理是什么？简述其主要操作步骤。五．论述题（总共1题，每题20分）请论述分子生物学技术在现代生命科学研究中的应用及发展前景。答案：一、选择题1.C2.D3.D4.D5.B6.A7.D8.A9.A10.C二、多项选择题1.AB2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABCD三、判断题1.√2.√3.×4.×5.×6.√7.×8.×9.√10.√四、简答题1.PCR技术原理：以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5’末端和3’末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。主要步骤：变性，高温使模板DNA双链解开；退火，引物与模板DNA单链结合；延伸,Taq酶催化dNTP合成新的DNA链。2.基本流程：获取目的基因，选择合适的载体，用限制性内切酶切割目的基因和载体，用DNA连接酶连接目的基因和载体形成重组载体。启动子作用是启动基因转录；终止子使转录终止；多克隆位点便于多种限制性内切酶切割插入目的基因；增强子增强基因转录效率。3.原理：蛋白质印迹技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种优点，通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色，通过分析着色位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。主要操作步骤：蛋白质样品制备，凝胶电泳分离蛋白质，蛋白质转移到膜上，封闭膜上非特异性位点，加入一抗孵育，加入二抗孵育，显色检测蛋白条带。五、论述题分子生物学技术在现代生命科学研究中应用广泛。基因克隆技术可获取特定基因用于研究其功能；基因表达载体构建能调控基因表达，用于基因治疗等；蛋白质印迹技术可检测蛋白质