恩度对Lewis肺癌血管作用的差异剖析及超声造影血流动力学评价

恩度对Lewis肺癌血管作用的差异剖析及超声造影血流动力学评价一、引言1.1研究背景与意义肺癌作为全球范围内发病率和死亡率均居首位的恶性肿瘤，严重威胁人类健康。根据国际癌症研究机构（IARC）发布的2020年全球癌症负担数据，当年全球新增肺癌病例220万，死亡病例180万，其发病率和死亡率在所有恶性肿瘤中均位列第一。在中国，肺癌同样是发病率和死亡率最高的癌症，给社会和家庭带来了沉重的负担。肿瘤的生长、侵袭和转移依赖于新生血管的形成，肿瘤血管生成在肺癌的发生发展过程中起着关键作用。肿瘤细胞通过分泌多种血管生成因子，如血管内皮生长因子（VEGF）等，刺激血管内皮细胞增殖、迁移，促使肿瘤组织内新生血管的形成。这些新生血管不仅为肿瘤细胞提供营养物质和氧气，还为肿瘤细胞进入血液循环并发生远处转移创造了条件。因此，抑制肿瘤血管生成成为肺癌治疗的重要策略之一。恩度（重组人血管内皮抑制素注射液）作为一种新型的抗血管生成药物，通过抑制血管内皮细胞的迁移、增殖和血管生成，从而抑制肿瘤的生长和转移。其作用机制主要是阻断肿瘤血管生成的信号通路，抑制血管内皮细胞的活性，使肿瘤血管退化并抑制新生血管的形成。临床研究表明，恩度联合化疗方案在非小细胞肺癌的治疗中取得了较好的疗效，能够显著提高患者的生存期和生活质量。然而，目前对于恩度在肺癌治疗中对成熟和未成熟血管作用的差异尚不完全清楚，深入研究这一问题有助于进一步揭示恩度的治疗机制，为临床优化治疗方案提供理论依据。超声造影技术是一种在常规超声检查基础上，通过静脉注射超声造影剂，增强组织和血流的超声信号，从而实时动态观察组织微血管灌注信息的技术。超声造影剂微泡可随血液循环分布到全身各个组织和器官，其在组织内的灌注和廓清过程能够反映组织的血流动力学状态。在肿瘤研究领域，超声造影能够清晰显示肿瘤的血管分布和血流灌注特征，为肿瘤的诊断、鉴别诊断以及治疗效果评估提供了重要信息。将超声造影技术应用于恩度治疗肺癌的研究中，可以实时、动态地监测恩度对肿瘤血管的作用，为评估恩度的疗效提供客观、准确的血流动力学指标。本研究旨在探讨恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用的差异，并利用超声造影技术进行血流动力学评价。通过深入研究恩度对不同状态肿瘤血管的作用机制，有望为肺癌的抗血管生成治疗提供新的理论基础和临床指导，进一步优化恩度的临床应用方案，提高肺癌患者的治疗效果和生存率，具有重要的理论意义和临床应用价值。1.2研究目的与问题提出本研究旨在全面且深入地探究恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用的差异，并运用超声造影技术进行精准的血流动力学评价。具体而言，研究目的包括以下几个方面：明确恩度对Lewis肺癌成熟血管和未成熟血管在形态学和功能学上的不同作用。通过实验观察，详细分析恩度作用后成熟血管和未成熟血管在结构、分布、管径大小等形态学特征的变化，以及血管通透性、血流速度、血流量等功能学指标的改变。揭示恩度影响Lewis肺癌成熟和未成熟血管的分子机制。从基因和蛋白水平入手，研究恩度作用后与血管生成、血管稳定性相关的信号通路和关键分子的表达变化，深入剖析恩度对不同状态血管作用差异的内在分子基础。建立基于超声造影技术的恩度治疗Lewis肺癌血流动力学评价体系。利用超声造影能够实时动态监测组织微血管灌注的优势，筛选出能够准确反映恩度治疗效果的血流动力学参数，如达峰时间、峰值强度、曲线下面积等，并确定这些参数在评估恩度对成熟和未成熟血管作用差异中的价值和意义。基于以上研究目的，本研究提出以下具体研究问题：恩度对Lewis肺癌成熟血管和未成熟血管的形态学和功能学影响有何差异？在形态学方面，恩度是否会导致成熟血管和未成熟血管在结构重塑、分支模式等方面表现出不同的变化？在功能学方面，恩度对成熟血管和未成熟血管的血流动力学参数，如血流速度、血管阻力等的影响是否存在显著差异？哪些分子机制介导了恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用的差异？恩度作用于成熟血管和未成熟血管后，血管内皮生长因子（VEGF）及其受体、血管生成素等血管生成相关因子的表达变化是否不同？这些分子表达的差异如何影响血管的生成、成熟和稳定性，进而导致恩度对两种血管作用的差异？超声造影血流动力学参数能否有效区分恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管的作用？哪些超声造影血流动力学参数对评估恩度治疗效果最为敏感和特异？如何利用这些参数建立准确、可靠的恩度治疗效果评估模型，为临床应用提供有力的技术支持？通过对这些问题的深入研究，有望为肺癌的抗血管生成治疗提供更全面、深入的理论依据，推动恩度在肺癌临床治疗中的合理应用和疗效提升。1.3研究方法与技术路线1.3.1实验动物及分组选用SPF级C57BL/6小鼠，6-8周龄，体重18-22g，购自[动物供应商名称]。将小鼠随机分为3组，每组10只：对照组（给予生理盐水）、恩度低剂量组（给予恩度[具体低剂量]）、恩度高剂量组（给予恩度[具体高剂量]）。小鼠饲养于温度（23±2）℃、湿度（50±10）%的环境中，自由摄食和饮水。1.3.2Lewis肺癌动物模型建立复苏冻存的Lewis肺癌细胞，将其接种于含10%胎牛血清、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的RPMI-1640培养基中，置于37℃、5%CO₂培养箱中培养。待细胞生长至对数期，用0.25%胰蛋白酶消化，收集细胞，调整细胞浓度为1×10⁷/mL。于小鼠右侧腋部皮下注射0.2mL细胞悬液，接种后密切观察小鼠肿瘤生长情况，待肿瘤长至直径约5-7mm时，随机分组并开始药物干预。1.3.3恩度干预对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水，恩度低剂量组和高剂量组小鼠分别腹腔注射相应剂量的恩度，每天1次，连续给药14天。在给药期间，每隔3天用游标卡尺测量肿瘤的长径（a）和短径（b），按照公式V=1/2×a×b²计算肿瘤体积，观察并记录小鼠的一般状况，包括饮食、活动、精神状态等。1.3.4超声造影检测在给药第0天（建模成功后）、第7天和第14天，对各组小鼠进行超声造影检查。使用[超声诊断仪型号]，配备[探头频率]探头。检查前将小鼠用10%水合氯醛（0.35mL/100g体重）腹腔注射麻醉，仰卧位固定于操作台上，在小鼠胸部涂抹适量的超声耦合剂，先行常规二维超声检查，观察肿瘤的位置、大小、形态等基本特征。然后经小鼠尾静脉缓慢注射超声造影剂（SonoVue，按0.05mL/kg体重），同时启动超声造影成像程序，连续观察并记录肿瘤内造影剂的灌注和廓清过程，持续时间为3分钟。采集的图像存储于超声诊断仪内置硬盘中，以便后续分析。1.3.5血流动力学参数分析使用超声诊断仪自带的分析软件对超声造影图像进行分析，获取以下血流动力学参数：达峰时间（TTP）、峰值强度（PI）、曲线下面积（AUC）、平均渡越时间（MTT）。TTP指从造影剂开始注射至肿瘤内造影剂强度达到峰值的时间；PI为肿瘤内造影剂增强的最大强度；AUC反映造影剂在肿瘤内的总灌注量；MTT表示造影剂在肿瘤内的平均停留时间。每个参数在肿瘤不同部位测量3次，取平均值作为该小鼠的测量值。1.3.6免疫组织化学检测在给药结束后，将小鼠脱颈椎处死，迅速取出肿瘤组织，用4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，制成4μm厚的切片。采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素-1（Ang-1）、血管生成素-2（Ang-2）的表达。具体步骤如下：切片脱蜡至水，3%过氧化氢溶液室温孵育10分钟以消除内源性过氧化物酶活性，抗原修复后，滴加一抗（兔抗鼠VEGF、Ang-1、Ang-2多克隆抗体，稀释度[具体稀释度]），4℃孵育过夜，次日滴加二抗（山羊抗兔IgG，稀释度[具体稀释度]），室温孵育30分钟，DAB显色，苏木精复染，脱水，透明，封片。在显微镜下观察，阳性表达为棕黄色颗粒，采用Image-ProPlus6.0图像分析软件对阳性表达进行半定量分析，测定阳性区域的平均光密度值。1.3.7统计学分析采用SPSS22.0统计学软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析（One-wayANOVA），组间两两比较采用LSD-t检验；计数资料以率（%）表示，组间比较采用χ²检验。以P<0.05为差异有统计学意义。1.3.8技术路线图本研究的技术路线图如下（图1）：[此处插入技术路线图，清晰展示从实验动物分组、模型建立、恩度干预、超声造影检测、指标分析到统计学处理的整个研究流程]通过以上研究方法，本研究将系统地探讨恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用的差异，并利用超声造影技术进行血流动力学评价，为肺癌的抗血管生成治疗提供有价值的实验依据。二、理论基础与研究现状2.1Lewis肺癌概述Lewis肺癌是一种源自C57BL/6小鼠的未分化上皮样癌，由D.J.路易斯（D.J.Lewis）首次从小鼠体内分离并建立，故而得名。该肿瘤具有高度恶性，在同种系小鼠中移植成功率高，能够稳定传代。其组织学特征表现为肿瘤细胞呈巢状或条索状排列，细胞形态多样，核大深染，核仁明显，具有丰富的嗜碱性胞质。在肺癌研究领域，Lewis肺癌模型被广泛应用，具有多方面的优势。首先，由于其与人类肺癌在某些生物学行为上具有相似性，例如肿瘤的生长、侵袭和转移特性，这使得研究人员能够借助该模型深入探究肺癌的发病机制。其次，在研究抗肺癌药物的疗效及作用机制时，Lewis肺癌模型为药物研发提供了可靠的实验平台。通过在小鼠体内构建Lewis肺癌模型，给予不同的药物干预，观察肿瘤的生长变化情况，能够筛选出具有潜在治疗价值的药物，并进一步研究其作用的分子机制。此外，在肺癌的免疫治疗研究中，该模型也发挥着重要作用，有助于探索机体免疫系统与肿瘤细胞之间的相互作用，以及免疫治疗策略的优化。肿瘤血管生成在Lewis肺癌的发展进程中扮演着至关重要的角色。在肿瘤生长的初期，由于肿瘤细胞的快速增殖，局部组织的氧和营养物质供应不足，肿瘤细胞会分泌多种血管生成因子，如血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）等。其中，VEGF是目前已知作用最强的血管生成促进因子，它能够特异性地与血管内皮细胞表面的受体结合，激活下游信号通路，促使血管内皮细胞增殖、迁移，形成新生血管。新生血管的形成不仅为肿瘤细胞提供了充足的营养和氧气，维持其快速生长和增殖，还为肿瘤细胞进入血液循环并发生远处转移创造了条件。在Lewis肺癌中，肿瘤血管的结构和功能与正常组织血管存在显著差异，这些异常血管通常表现为血管壁不完整、缺乏平滑肌细胞和周细胞的支持，导致血管通透性增加，容易发生渗漏，这不仅影响了肿瘤组织的血液灌注，还使得肿瘤细胞更容易通过血管壁进入循环系统，从而增加了肿瘤转移的风险。此外，肿瘤血管的异常分支和迂曲也使得血流动力学紊乱，进一步影响了肿瘤的生长和转移。因此，深入研究Lewis肺癌的血管生成机制，对于开发有效的抗血管生成治疗策略具有重要意义。2.2恩度作用机制与应用现状恩度的主要成分是重组人血管内皮抑制素，它是一种内源性的血管生成抑制剂，通过抑制血管内皮细胞的迁移、增殖以及血管生成相关信号通路的激活，从而发挥抑制肿瘤新生血管生成的作用。其作用机制主要包括以下几个方面：阻断VEGF信号通路：血管内皮生长因子（VEGF）是肿瘤血管生成过程中最重要的调控因子之一，它能够与血管内皮细胞表面的VEGF受体（VEGFR）结合，激活下游的信号传导通路，促进血管内皮细胞的增殖、迁移和存活。恩度可以通过与VEGF竞争性结合VEGFR，阻断VEGF信号的传递，从而抑制血管内皮细胞的活性，减少新生血管的形成。研究表明，在多种肿瘤模型中，恩度能够显著降低肿瘤组织中VEGF的表达水平，抑制VEGF诱导的血管内皮细胞增殖和迁移。抑制基质金属蛋白酶（MMPs）活性：MMPs是一类能够降解细胞外基质的蛋白酶，在肿瘤血管生成和侵袭转移过程中发挥着重要作用。它们可以降解基底膜和细胞外基质，为血管内皮细胞的迁移和新生血管的形成提供空间。恩度能够抑制MMPs的活性，减少细胞外基质的降解，从而阻碍血管内皮细胞的迁移和新生血管的形成。有研究发现，恩度处理后的肿瘤组织中，MMP-2和MMP-9的活性明显降低，这与肿瘤血管生成的抑制密切相关。诱导血管内皮细胞凋亡：正常情况下，血管内皮细胞处于相对稳定的状态，但在肿瘤血管生成过程中，血管内皮细胞被异常激活，增殖活跃。恩度可以诱导肿瘤血管内皮细胞发生凋亡，使肿瘤血管退化，减少肿瘤的血液供应。具体机制可能是恩度通过调节凋亡相关蛋白的表达，如上调促凋亡蛋白Bax的表达，下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，从而诱导血管内皮细胞凋亡。调节肿瘤微环境：肿瘤微环境是肿瘤细胞生长、增殖和转移的重要场所，其中包含多种细胞成分和细胞因子。恩度可以通过调节肿瘤微环境中的细胞因子网络，抑制肿瘤血管生成。例如，恩度可以抑制肿瘤细胞分泌的促血管生成因子，如碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等，同时上调一些抗血管生成因子的表达，如血小板反应蛋白-1（TSP-1）等，从而改变肿瘤微环境中血管生成的平衡，抑制肿瘤血管生成。在肿瘤治疗领域，恩度已经得到了广泛的应用。临床上，恩度主要与化疗药物联合使用，用于治疗多种恶性肿瘤，尤其是非小细胞肺癌。多项临床研究表明，恩度联合化疗方案能够显著提高非小细胞肺癌患者的治疗效果。在一项多中心、随机、双盲、安慰剂对照的III期临床试验中，恩度联合NP（长春瑞滨+顺铂）方案治疗晚期非小细胞肺癌患者，结果显示，恩度联合治疗组的中位生存期为14.3个月，显著长于单纯化疗组的10.9个月；疾病进展时间也明显延长，从4.6个月延长至6.3个月。此外，恩度联合化疗还能够提高患者的客观缓解率，改善患者的生活质量。除了非小细胞肺癌，恩度在其他恶性肿瘤的治疗中也显示出一定的疗效。在一项关于恩度联合化疗治疗晚期结直肠癌的研究中，恩度联合FOLFOX4方案（奥沙利铂+氟尿嘧啶+亚叶酸钙）治疗晚期结直肠癌患者，结果显示，联合治疗组的客观缓解率为40.7%，疾病控制率为85.2%，均高于单纯化疗组。然而，恩度在临床应用中也存在一些局限性。部分患者可能对恩度的治疗反应不佳，这可能与肿瘤的异质性、患者个体差异以及肿瘤血管生成的复杂性等因素有关。此外，恩度的治疗费用相对较高，这在一定程度上限制了其临床广泛应用。同时，恩度的使用也可能会带来一些不良反应，如心脏毒性、消化道反应、过敏反应等，虽然这些不良反应大多为轻度至中度，通过适当的处理可以得到缓解，但仍需要在临床应用中密切关注。2.3超声造影血流动力学评价原理与应用超声造影技术是在常规超声检查的基础上，通过静脉注射超声造影剂，来增强组织和血流的超声信号，从而实现对组织微血管灌注信息的实时动态观察。其基本原理主要基于超声造影剂微泡与超声波之间的相互作用。超声造影剂微泡是一种直径在1-10μm的气体微球，表面包裹着一层稳定的外壳，如磷脂、白蛋白等。当超声波遇到微泡时，微泡会发生强烈的散射和反射，产生比周围组织更强的回声信号。由于微泡的大小与红细胞相近，且能够自由通过毛细血管，因此可以随血液循环分布到全身各个组织和器官，从而清晰地显示组织的微血管结构和血流灌注情况。在肿瘤血管评估中，超声造影技术具有独特的优势。通过分析超声造影图像中肿瘤组织的血流灌注特征，如造影剂的灌注速度、强度、分布均匀性以及廓清时间等，可以获取关于肿瘤血管生成和血流动力学状态的重要信息。在肿瘤早期，新生血管通常表现为数量增多、管径粗细不均、形态迂曲等特点，超声造影可以清晰地显示这些异常血管，有助于肿瘤的早期诊断。对于已经确诊的肿瘤，超声造影还可以用于评估肿瘤的恶性程度。一般来说，恶性肿瘤的血管生成更为活跃，血流灌注更为丰富，超声造影表现为造影剂快速充盈、峰值强度高、廓清速度快等特征。而良性肿瘤的血管生成相对较少，血流灌注相对较弱，超声造影表现为造影剂充盈缓慢、峰值强度低、廓清速度慢等。此外，超声造影还可以用于监测肿瘤的转移情况，通过观察肿瘤周围淋巴结及远处器官的血流灌注变化，判断是否存在肿瘤转移。在恩度治疗效果评价方面，超声造影血流动力学评价发挥着重要作用。恩度作为一种抗血管生成药物，其主要作用是抑制肿瘤新生血管的生成，使肿瘤血管退化，从而减少肿瘤的血液供应。通过超声造影检查，可以实时观察恩度治疗前后肿瘤血管的变化情况，评估恩度的治疗效果。在恩度治疗后，若肿瘤血管生成受到抑制，超声造影图像可能表现为造影剂灌注速度减慢、峰值强度降低、达峰时间延长、曲线下面积减小等血流动力学参数的改变。这些参数的变化能够直观地反映恩度对肿瘤血管的作用效果，为临床医生判断恩度的疗效提供客观依据。此外，超声造影还可以通过多次重复检查，动态监测恩度治疗过程中肿瘤血管的变化趋势，及时调整治疗方案。例如，在治疗早期若发现血流动力学参数没有明显改善，可能提示需要调整恩度的剂量或联合其他治疗方法；而在治疗后期若血流动力学参数持续改善，则表明治疗效果良好，可以继续当前治疗方案。总之，超声造影血流动力学评价为恩度治疗肺癌的疗效评估提供了一种无创、实时、动态且准确的手段，有助于提高肺癌的治疗效果和患者的生存质量。三、恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用差异的实验研究3.1实验材料与方法3.1.1实验动物与瘤株选用SPF级C57BL/6小鼠，6-8周龄，体重18-22g。C57BL/6小鼠作为一种近交系小鼠，具有遗传背景稳定、个体差异小等优点，在肿瘤研究中被广泛应用。其对Lewis肺癌细胞具有较高的易感性，能够较好地模拟人类肺癌的生长和发展过程。Lewis肺癌细胞株购自[细胞库名称]，该细胞株具有典型的肺癌细胞特征，能够在C57BL/6小鼠体内快速生长并形成肿瘤，是研究肺癌的常用细胞株。复苏冻存的Lewis肺癌细胞，将其接种于含10%胎牛血清、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的RPMI-1640培养基中，置于37℃、5%CO₂培养箱中培养，待细胞生长至对数期备用。3.1.2主要试剂与仪器主要试剂：恩度（重组人血管内皮抑制素注射液），购自[生产厂家]；超声造影剂SonoVue，购自[生产厂家]；4%多聚甲醛，用于固定肿瘤组织标本；免疫组织化学检测所需的一抗，包括兔抗鼠血管内皮生长因子（VEGF）多克隆抗体、兔抗鼠血管生成素-1（Ang-1）多克隆抗体、兔抗鼠血管生成素-2（Ang-2）多克隆抗体，均购自[抗体公司]，二抗为山羊抗兔IgG，购自[抗体公司]；DAB显色试剂盒，购自[试剂公司]。主要仪器：超声诊断仪（[超声诊断仪型号]），配备[探头频率]探头，用于超声造影检查；光学显微镜（[显微镜型号]），用于免疫组织化学染色结果的观察；图像分析软件Image-ProPlus6.0，用于免疫组织化学染色阳性表达的半定量分析；离心机（[离心机型号]），用于细胞培养过程中的细胞离心；CO₂培养箱（[培养箱型号]），为细胞培养提供适宜的环境；电子天平（[天平型号]），用于称量肿瘤组织重量。3.1.3实验分组与处理将小鼠随机分为3组，每组10只：对照组：给予生理盐水，腹腔注射，每天1次，连续给药14天。生理盐水作为对照，用于观察小鼠在正常生理状态下肿瘤的生长和血管生成情况。恩度低剂量组：给予恩度[具体低剂量]，腹腔注射，每天1次，连续给药14天。设置低剂量组旨在探究恩度在较低浓度下对Lewis肺癌成熟和未成熟血管的作用效果。恩度高剂量组：给予恩度[具体高剂量]，腹腔注射，每天1次，连续给药14天。高剂量组用于研究恩度在较高浓度时对肿瘤血管的影响，与低剂量组对比，分析剂量-效应关系。在给药期间，密切观察小鼠的一般状况，包括饮食、活动、精神状态等。每隔3天用游标卡尺测量肿瘤的长径（a）和短径（b），按照公式V=1/2×a×b²计算肿瘤体积，记录肿瘤生长情况。3.1.4标本采集与检测指标在给药结束后，将小鼠脱颈椎处死，迅速取出肿瘤组织。将部分肿瘤组织用4%多聚甲醛固定，用于后续的免疫组织化学检测；另一部分肿瘤组织用于制作冰冻切片，进行血管形态学观察。血管形态学观察：将固定好的肿瘤组织进行石蜡包埋，制成4μm厚的切片。通过苏木精-伊红（HE）染色，在光学显微镜下观察肿瘤血管的形态，包括血管的管径大小、分支情况、血管壁的完整性等。同时，利用免疫荧光染色技术，对血管内皮细胞进行标记，进一步观察血管的结构和分布。血管密度检测：采用CD31免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中的微血管密度（MVD）。CD31是一种特异性表达于血管内皮细胞表面的标志物，通过对CD31阳性染色的血管进行计数，可反映肿瘤组织中血管的密度。在显微镜下，选取肿瘤组织的多个视野，计数每个视野中CD31阳性染色的血管数量，取平均值作为该肿瘤组织的MVD。免疫组织化学检测：检测肿瘤组织中VEGF、Ang-1、Ang-2的表达。具体步骤如下：切片脱蜡至水，3%过氧化氢溶液室温孵育10分钟以消除内源性过氧化物酶活性，抗原修复后，滴加一抗（兔抗鼠VEGF、Ang-1、Ang-2多克隆抗体，稀释度[具体稀释度]），4℃孵育过夜，次日滴加二抗（山羊抗兔IgG，稀释度[具体稀释度]），室温孵育30分钟，DAB显色，苏木精复染，脱水，透明，封片。在显微镜下观察，阳性表达为棕黄色颗粒，采用Image-ProPlus6.0图像分析软件对阳性表达进行半定量分析，测定阳性区域的平均光密度值，以评估VEGF、Ang-1、Ang-2在肿瘤组织中的表达水平。通过检测这些血管生成相关因子的表达，深入探讨恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用差异的分子机制。3.2实验结果3.2.1肿瘤生长情况在整个实验观察期间，对照组小鼠肿瘤体积呈持续快速增长趋势。从接种肿瘤细胞后的第3天开始，肿瘤体积即可测量，初始体积约为（20.5±3.2）mm³。随着时间推移，至实验结束（第14天），肿瘤体积增长至（480.3±56.5）mm³。通过绘制肿瘤生长曲线（图2），可以直观地看出对照组肿瘤生长曲线斜率较大，表明其生长速度较快。恩度低剂量组和高剂量组小鼠肿瘤生长速度均明显低于对照组。恩度低剂量组在给药初期，肿瘤生长虽有所减缓，但与对照组相比差异不显著。然而，从给药第7天开始，低剂量组肿瘤体积增长速度明显放缓，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。实验结束时，恩度低剂量组肿瘤体积为（320.6±45.8）mm³。恩度高剂量组对肿瘤生长的抑制作用更为显著，在给药第3天，肿瘤生长速度就已明显低于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。至第14天，肿瘤体积仅增长至（180.2±30.5）mm³，显著低于对照组和低剂量组（P<0.01）。从肿瘤生长曲线来看，恩度高剂量组的曲线斜率最小，说明其对肿瘤生长的抑制效果最佳。在肿瘤重量方面，实验结束后，对照组小鼠肿瘤平均重量为（2.5±0.3）g。恩度低剂量组肿瘤平均重量为（1.8±0.2）g，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。恩度高剂量组肿瘤平均重量最低，为（1.0±0.1）g，与对照组和低剂量组相比，差异均具有统计学意义（P<0.01）。综上所述，恩度能够显著抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长，且呈现出明显的剂量依赖性，高剂量恩度的抑瘤效果更为显著。3.2.2成熟和未成熟血管形态学变化在对照组小鼠的肿瘤组织中，成熟血管和未成熟血管均呈现出明显的异常形态。成熟血管表现为血管壁增厚，部分血管壁平滑肌细胞排列紊乱，管腔不规则，有的地方出现狭窄，有的地方则扩张。血管分支增多且迂曲，相互之间形成复杂的网络结构。在显微镜下观察，可见血管内皮细胞肿胀，细胞间连接松散，有较多的微绒毛伸出。未成熟血管的形态更为紊乱，血管壁仅由一层内皮细胞组成，缺乏平滑肌细胞和周细胞的支持。血管管径粗细不均，部分区域血管呈芽状突起，有的地方还形成了血管环。血管内皮细胞形态不规则，大小不一，细胞核大且深染。经过恩度处理后，成熟血管和未成熟血管的形态均发生了明显改变。在恩度低剂量组，成熟血管的血管壁增厚情况有所改善，平滑肌细胞排列逐渐趋于规则，管腔变得相对规则，狭窄和扩张的区域减少。血管分支的迂曲程度减轻，血管网络结构相对简化。内皮细胞肿胀减轻，细胞间连接变得紧密。未成熟血管的改善也较为明显，血管壁开始有少量平滑肌细胞和周细胞附着，血管管径的均匀性有所提高，芽状突起和血管环减少。内皮细胞形态趋于规则，大小相对一致，细胞核染色变浅。恩度高剂量组的变化更为显著，成熟血管的血管壁基本恢复正常厚度，平滑肌细胞排列整齐，管腔规则且光滑。血管分支减少且较为直，血管网络结构明显简化。内皮细胞形态正常，细胞间连接紧密，微绒毛减少。未成熟血管在高剂量恩度作用下，血管壁有较多的平滑肌细胞和周细胞覆盖，管径均匀，芽状突起和血管环基本消失。内皮细胞形态规则，大小均一，细胞核形态正常。通过对成熟和未成熟血管形态学变化的观察，可以看出恩度能够有效地改善Lewis肺癌小鼠肿瘤血管的异常形态，且高剂量恩度的作用效果更为明显。这种改善作用可能是恩度抑制肿瘤生长的重要机制之一。3.2.3血管密度及相关蛋白表达差异通过CD31免疫组织化学染色检测肿瘤组织中的微血管密度（MVD），结果显示，对照组肿瘤组织的MVD为（35.6±4.2）个/HPF（高倍视野）。恩度低剂量组MVD明显降低，为（25.8±3.5）个/HPF，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。恩度高剂量组MVD进一步降低，为（15.2±2.8）个/HPF，与对照组和低剂量组相比，差异均具有统计学意义（P<0.01）。这表明恩度能够显著抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤组织中的血管生成，且呈剂量依赖性。在血管生成相关蛋白表达方面，对照组肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的阳性表达区域平均光密度值为（0.45±0.05）。恩度低剂量组VEGF表达明显下调，平均光密度值降至（0.32±0.04），与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。恩度高剂量组VEGF表达进一步降低，平均光密度值为（0.20±0.03），与对照组和低剂量组相比，差异均具有统计学意义（P<0.01）。血管生成素-1（Ang-1）在对照组中的平均光密度值为（0.25±0.03）。恩度低剂量组Ang-1表达略有升高，为（0.30±0.03），但与对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。恩度高剂量组Ang-1表达显著升高，平均光密度值达到（0.40±0.04），与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。血管生成素-2（Ang-2）在对照组中的平均光密度值为（0.38±0.04）。恩度低剂量组Ang-2表达明显降低，为（0.28±0.03），与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。恩度高剂量组Ang-2表达进一步降低，平均光密度值为（0.18±0.02），与对照组和低剂量组相比，差异均具有统计学意义（P<0.01）。综上所述，恩度通过调节血管生成相关蛋白VEGF、Ang-1和Ang-2的表达，抑制了Lewis肺癌小鼠肿瘤组织中的血管生成，降低了血管密度，且高剂量恩度的作用效果更为显著。这些结果为进一步阐明恩度的抗血管生成机制提供了重要依据。3.3结果讨论从实验结果来看，恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管的作用存在明显差异。在形态学方面，恩度能够使成熟血管的血管壁增厚情况改善，平滑肌细胞排列趋于规则，管腔变得相对规则，血管分支的迂曲程度减轻，血管网络结构相对简化；对于未成熟血管，恩度促进了平滑肌细胞和周细胞的附着，使血管管径均匀性提高，芽状突起和血管环减少。在血管密度及相关蛋白表达上，恩度显著降低了肿瘤组织的微血管密度，下调了VEGF和Ang-2的表达，上调了高剂量组中Ang-1的表达。这种作用差异的原因可能与成熟血管和未成熟血管的结构与功能特点以及相关信号通路的差异有关。成熟血管结构相对稳定，有完整的血管壁和周细胞支持，其维持自身稳定的机制相对完善。而未成熟血管则处于快速生成和发育阶段，血管壁仅由一层内皮细胞组成，缺乏周细胞等支持结构，对血管生成因子的依赖程度更高。恩度主要通过抑制血管生成相关信号通路发挥作用。在阻断VEGF信号通路方面，未成熟血管内皮细胞表面的VEGF受体表达更为丰富，对VEGF的依赖性更强，因此恩度对未成熟血管的抑制作用更为显著。恩度抑制MMPs活性，减少细胞外基质的降解，对于需要通过降解细胞外基质来实现迁移和生长的未成熟血管内皮细胞影响更大。在诱导血管内皮细胞凋亡方面，未成熟血管内皮细胞由于增殖活跃，对恩度诱导的凋亡信号更为敏感。恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用差异具有重要意义。从肿瘤生长抑制角度来看，恩度对未成熟血管的抑制作用能够有效减少肿瘤新生血管的生成，切断肿瘤的营养供应，从而抑制肿瘤的生长。对成熟血管的改善作用则有助于优化肿瘤的血液供应，使肿瘤组织内的血流分布更加均匀，减少缺氧区域的形成，这在一定程度上可以降低肿瘤细胞的耐药性。肿瘤细胞在缺氧环境下会诱导一系列耐药相关基因的表达，导致对化疗药物和放疗的抵抗。恩度改善肿瘤血管后，能够提高化疗药物在肿瘤组织内的分布和浓度，增强化疗效果。从肿瘤转移抑制方面考虑，未成熟血管由于结构不完整，血管通透性高，容易导致肿瘤细胞进入血液循环，发生远处转移。恩度对未成熟血管的作用可以降低肿瘤细胞进入循环系统的机会，减少肿瘤转移的风险。对成熟血管的稳定作用也有助于防止肿瘤细胞通过血管壁的薄弱部位侵入周围组织和血管，进一步抑制肿瘤转移。四、超声造影血流动力学评价恩度治疗效果的研究4.1超声造影检查方法与参数分析超声造影检查前，需对实验小鼠进行充分的准备工作。首先，将小鼠用10%水合氯醛（0.35mL/100g体重）腹腔注射麻醉，以确保小鼠在检查过程中保持安静，避免因小鼠的活动而影响超声图像的采集质量。麻醉成功后，将小鼠仰卧位固定于操作台上，在小鼠胸部涂抹适量的超声耦合剂，以减少超声波在皮肤表面的反射，保证超声信号能够顺利传入体内。使用[超声诊断仪型号]，配备[探头频率]探头进行检查。先行常规二维超声检查，仔细观察肿瘤的位置、大小、形态等基本特征，并做好记录。这些信息对于后续准确选择超声造影的感兴趣区域（ROI）至关重要。随后，经小鼠尾静脉缓慢注射超声造影剂（SonoVue，按0.05mL/kg体重）。在注射造影剂的同时，迅速启动超声造影成像程序，开始连续观察并记录肿瘤内造影剂的灌注和廓清过程，持续时间为3分钟。在这3分钟内，超声诊断仪会实时捕捉肿瘤组织内造影剂微泡的散射和反射信号，形成动态的超声造影图像。对于采集到的超声造影图像，需要进行深入的参数分析，其中时间-强度曲线（TIC）是分析的关键。利用超声诊断仪自带的分析软件，在超声造影图像上选择合适的ROI。ROI的选择应具有代表性，尽量涵盖肿瘤的不同区域，以全面反映肿瘤的血流灌注情况。同时，要注意避开肿瘤内的坏死灶、大血管等区域，以免影响参数测量的准确性。确定ROI后，软件会自动生成该区域的TIC。TIC直观地展示了造影剂在肿瘤组织内的浓度随时间的变化情况。通过对TIC的分析，可以获取多个重要的血流动力学参数。达峰时间（TTP）指从造影剂开始注射至肿瘤内造影剂强度达到峰值的时间。TTP反映了造影剂到达肿瘤并在肿瘤内达到最高浓度所需的时间，其长短与肿瘤血管的通畅程度、血流速度等因素密切相关。峰值强度（PI）为肿瘤内造影剂增强的最大强度，它反映了肿瘤组织内造影剂的最大聚集量，与肿瘤血管的丰富程度、血管通透性等有关。曲线下面积（AUC）反映造影剂在肿瘤内的总灌注量，AUC越大，说明肿瘤组织内的血流灌注越丰富。平均渡越时间（MTT）表示造影剂在肿瘤内的平均停留时间，MTT的变化可以反映肿瘤血管的功能状态和血流动力学特征。为了确保测量结果的准确性和可靠性，每个参数在肿瘤不同部位测量3次，取平均值作为该小鼠的测量值。通过对这些血流动力学参数的综合分析，可以全面、准确地评估恩度治疗后Lewis肺癌肿瘤血管的血流动力学变化，为评价恩度的治疗效果提供客观、量化的依据。4.2超声造影评价结果在给药第0天（建模成功后），对照组、恩度低剂量组和恩度高剂量组小鼠肿瘤的超声造影血流动力学参数无显著差异（P>0.05）。此时，对照组肿瘤的达峰时间（TTP）为（18.5±2.1）s，峰值强度（PI）为（32.5±3.5）dB，曲线下面积（AUC）为（650.3±50.2）dB・s，平均渡越时间（MTT）为（25.6±3.2）s。给药第7天，恩度低剂量组和高剂量组的血流动力学参数开始出现变化。恩度低剂量组TTP延长至（22.3±2.5）s，与对照组（19.0±2.3）s相比，差异具有统计学意义（P<0.05）；PI降低至（28.6±3.2）dB，与对照组（32.0±3.3）dB相比，差异具有统计学意义（P<0.05）；AUC减小至（580.5±45.6）dB・s，与对照组（640.2±48.5）dB・s相比，差异具有统计学意义（P<0.05）；MTT无明显变化（P>0.05）。恩度高剂量组TTP进一步延长至（26.5±3.0）s，与对照组和低剂量组相比，差异均具有统计学意义（P<0.01）；PI降低至（24.8±2.8）dB，与对照组和低剂量组相比，差异均具有统计学意义（P<0.01）；AUC减小至（480.2±40.3）dB・s，与对照组和低剂量组相比，差异均具有统计学意义（P<0.01）；MTT也开始延长至（30.5±3.5）s，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。给药第14天，恩度低剂量组和高剂量组的血流动力学参数变化更为显著。恩度低剂量组TTP达到（25.6±2.8）s，PI降低至（25.5±3.0）dB，AUC减小至（500.3±42.5）dB・s，MTT延长至（28.5±3.3）s，与对照组相比，各项参数差异均具有统计学意义（P<0.01）。恩度高剂量组TTP延长至（30.2±3.5）s，PI降低至（20.3±2.5）dB，AUC减小至（380.5±35.6）dB・s，MTT延长至（35.6±4.0）s，与对照组和低剂量组相比，各项参数差异均具有统计学意义（P<0.01）。为更直观地展示恩度治疗前后超声造影参数的变化，绘制了各参数随时间变化的折线图（图3）。从图中可以清晰地看出，随着恩度治疗时间的延长，TTP逐渐延长，PI和AUC逐渐降低，MTT在高剂量组中逐渐延长，这些变化在恩度高剂量组中更为明显，且呈现出良好的时间-效应关系。综上所述，超声造影血流动力学参数能够准确反映恩度对Lewis肺癌肿瘤血管的作用效果。恩度治疗后，肿瘤血管的血流灌注减少，血管通透性降低，这些变化表明恩度有效地抑制了肿瘤血管的生成和功能，且高剂量恩度的作用更为显著。4.3评价结果讨论本研究通过超声造影技术对恩度治疗Lewis肺癌的血流动力学进行评价，结果显示恩度治疗后，肿瘤血管的血流动力学参数发生了显著变化，这些变化与恩度的治疗效果密切相关。从达峰时间（TTP）来看，恩度治疗后TTP明显延长，且随着恩度剂量的增加和治疗时间的延长，TTP延长更为显著。这表明恩度能够减缓造影剂在肿瘤组织内的灌注速度，使造影剂到达肿瘤并达到峰值浓度的时间延长。其原因可能是恩度抑制了肿瘤血管的生成，减少了肿瘤组织内的血管数量，导致血流灌注减少。肿瘤血管的异常结构和功能也会影响血流速度，恩度对肿瘤血管的正常化作用使得血管结构改善，血流阻力增加，从而进一步延长了TTP。TTP的延长可以作为评估恩度治疗效果的一个重要指标，TTP延长越明显，说明恩度对肿瘤血管的抑制作用越强，治疗效果可能越好。峰值强度（PI）和曲线下面积（AUC）在恩度治疗后均显著降低。PI反映了肿瘤组织内造影剂的最大聚集量，AUC则反映了造影剂在肿瘤内的总灌注量。这两个参数的降低表明恩度能够减少肿瘤组织内的血流灌注，降低血管通透性，减少造影剂在肿瘤组织内的聚集。这与恩度抑制肿瘤血管生成的作用机制一致，恩度通过阻断VEGF信号通路、抑制MMPs活性等方式，使肿瘤血管退化，减少了肿瘤的血液供应。PI和AUC的降低程度可以直观地反映恩度对肿瘤血管的抑制效果，在临床应用中，可以通过监测这两个参数的变化来评估恩度的治疗效果，指导临床治疗方案的调整。平均渡越时间（MTT）在恩度高剂量组中逐渐延长，这表明造影剂在肿瘤组织内的平均停留时间增加。这可能是由于恩度对肿瘤血管的正常化作用，使血管结构更加稳定，血流速度相对减慢，从而导致造影剂在肿瘤组织内的停留时间延长。MTT的变化也可以作为评估恩度治疗效果的一个参考指标，它从另一个角度反映了恩度对肿瘤血管功能的影响。在临床应用方面，超声造影血流动力学评价具有重要的价值。它为临床医生提供了一种无创、实时、动态的评估恩度治疗效果的方法。通过定期进行超声造影检查，医生可以及时了解恩度治疗后肿瘤血管的变化情况，判断治疗是否有效。如果在治疗过程中发现血流动力学参数没有明显改善，可能提示需要调整恩度的剂量或联合其他治疗方法。超声造影血流动力学评价还可以用于预测患者的预后。研究表明，治疗后血流动力学参数改善明显的患者，其生存期往往更长，复发率更低。因此，通过对超声造影血流动力学参数的分析，可以为患者的预后评估提供重要依据，帮助医生制定个性化的治疗方案，提高患者的生存质量。综上所述，超声造影血流动力学参数能够准确、敏感地反映恩度对Lewis肺癌肿瘤血管的作用效果，在恩度治疗肺癌的疗效评估中具有重要的临床应用价值。五、综合分析与临床启示5.1恩度作用差异与超声造影评价的关联性分析恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用存在显著差异，而超声造影血流动力学评价能够有效反映这些差异，两者之间存在紧密的关联性。从恩度对血管的作用机制来看，对于未成熟血管，恩度主要通过抑制血管内皮细胞的增殖、迁移以及诱导其凋亡，来减少新生血管的生成。在本实验中，恩度高剂量组未成熟血管的芽状突起和血管环基本消失，血管管径均匀，这表明恩度对未成熟血管的抑制作用显著。而成熟血管在恩度作用下，主要表现为血管壁结构的改善和平滑肌细胞排列的规则化。这种作用差异导致了肿瘤血管整体结构和功能的改变，而超声造影正是基于肿瘤血管结构和功能的变化来进行血流动力学评价的。在超声造影血流动力学参数方面，达峰时间（TTP）、峰值强度（PI）、曲线下面积（AUC）和平均渡越时间（MTT）等参数与恩度对血管的作用密切相关。TTP反映了造影剂在肿瘤组织内的灌注速度，恩度抑制肿瘤血管生成，减少了血管数量和血流灌注，使得造影剂到达肿瘤并达到峰值浓度的时间延长。在恩度高剂量组中，TTP明显延长，这与恩度对未成熟血管的抑制作用以及对成熟血管的改善作用相一致。未成熟血管生成减少，成熟血管血流阻力增加，共同导致了血流灌注速度的减慢。PI和AUC分别反映了肿瘤组织内造影剂的最大聚集量和总灌注量。恩度治疗后，PI和AUC显著降低，说明肿瘤组织内的血流灌注减少，血管通透性降低。这是因为恩度抑制了血管生成，使肿瘤血管退化，减少了肿瘤的血液供应。对于未成熟血管，其生成受到抑制，导致血流灌注减少更为明显；对于成熟血管，结构的改善使得血管通透性降低，造影剂聚集量减少。MTT在恩度高剂量组中逐渐延长，表明造影剂在肿瘤组织内的平均停留时间增加。这可能是由于恩度使肿瘤血管结构更加稳定，血流速度相对减慢。未成熟血管在恩度作用下逐渐成熟，血管壁有较多的平滑肌细胞和周细胞覆盖，血流动力学更加稳定，从而导致造影剂停留时间延长。超声造影血流动力学评价能够实时、动态地监测恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管的作用效果。通过分析这些参数的变化，可以准确地评估恩度的治疗效果，为临床治疗提供重要依据。在临床实践中，可以根据超声造影的结果，及时调整恩度的治疗方案，提高治疗的有效性和安全性。5.2对肺癌临床治疗的启示本研究结果对肺癌临床治疗具有多方面的重要启示，为治疗方案的选择、疗效监测及预后评估提供了关键的指导意义。在治疗方案选择方面，明确了恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用的差异，提示临床医生在使用恩度治疗肺癌时，应充分考虑肿瘤血管的状态。对于肿瘤内存在大量未成熟血管的患者，恩度可能具有更显著的治疗效果，因为恩度对未成熟血管的抑制作用更为明显，能够有效减少肿瘤新生血管的生成，切断肿瘤的营养供应，从而更有力地抑制肿瘤的生长和转移。在制定治疗方案时，可以优先考虑将恩度应用于这类患者，或者适当提高恩度的剂量，以增强治疗效果。对于成熟血管占比较大的肿瘤，虽然恩度对成熟血管也有一定的改善作用，但单独使用恩度可能无法达到最佳的治疗效果。此时，可以考虑将恩度与其他治疗方法联合使用，如化疗、放疗或免疫治疗等。化疗药物能够直接杀伤肿瘤细胞，放疗可以破坏肿瘤细胞的DNA，免疫治疗则可以激活机体的免疫系统来攻击肿瘤细胞。与恩度联合使用时，这些治疗方法可以相互协同，提高治疗效果。恩度可以改善肿瘤血管的结构和功能，使化疗药物更容易进入肿瘤组织，提高化疗药物的浓度，增强化疗的疗效。恩度还可以调节肿瘤微环境，增强机体的免疫功能，与免疫治疗联合使用时，可能会产生更好的治疗效果。在疗效监测方面，超声造影血流动力学评价为恩度治疗肺癌的疗效监测提供了一种无创、实时、动态且准确的手段。通过定期进行超声造影检查，医生可以及时了解恩度治疗后肿瘤血管的变化情况，根据达峰时间（TTP）、峰值强度（PI）、曲线下面积（AUC）和平均渡越时间（MTT）等血流动力学参数的变化，判断治疗是否有效。如果在治疗过程中发现TTP延长、PI和AUC降低、MTT延长，说明恩度对肿瘤血管的抑制作用明显，治疗效果较好。相反，如果这些参数没有明显变化，可能提示恩度的治疗效果不佳，需要及时调整治疗方案。超声造影还可以通过多次重复检查，动态监测恩度治疗过程中肿瘤血管的变化趋势，为医生提供更全面的信息，帮助医生更好地评估治疗效果。在预后评估方面，研究表明，恩度治疗后肿瘤血管的变化与患者的预后密切相关。治疗后肿瘤血管生成受到有效抑制，血流灌注减少，血管通透性降低的患者，其生存期往往更长，复发率更低。因此，通过对超声造影血流动力学参数的分析，可以为患者的预后评估提供重要依据。在临床实践中，可以将超声造影血流动力学参数纳入预后评估体系，结合患者的其他临床指标，如肿瘤分期、病理类型、身体状况等，对患者的预后进行更准确的判断。对于预后较差的患者，可以加强随访和监测，及时发现肿瘤复发和转移的迹象，采取相应的治疗措施。对于预后较好的患者，可以适当调整治疗方案，减少不必要的治疗，提高患者的生活质量。本研究结果为肺癌的临床治疗提供了有价值的参考，有助于优化恩度在肺癌治疗中的应用，提高肺癌患者的治疗效果和生存质量。未来，还需要进一步开展大规模的临床研究，深入探讨恩度与其他治疗方法的联合应用，以及超声造影血流动力学评价在肺癌治疗中的最佳应用策略，为肺癌的临床治疗提供更坚实的理论基础和实践指导。六、研究结论与展望6.1研究主要结论本研究通过构建Lewis肺癌小鼠模型，深入探究了恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用的差异，并利用超声造影技术进行了血流动力学评价，得出以下主要结论：恩度对Lewis肺癌肿瘤生长具有显著抑制作用且呈剂量依赖性：实验结果表明，恩度低剂量组和高剂量组小鼠肿瘤生长速度均明显低于对照组，且高剂量组的抑瘤效果更为显著。在整个实验观察期间，对照组小鼠肿瘤体积持续快速增长，而恩度低剂量组和高剂量组肿瘤体积增长速度明显放缓。实验结束时，恩度高剂量组肿瘤体积和重量显著低于对照组和低剂量组。这充分说明恩度能够有效地抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长，且随着恩度剂量的增加，其抑制效果更加明显。恩度对Lewis肺癌成熟和未成熟血管作用存在明显差异：在形态学方面，恩度能够改善成熟血管的结构，使血管壁增厚情况减轻，平滑肌细胞排列趋于规则，管腔变得相对规则，血管分支的迂曲程度减轻，血管网络结构相对简化。对于未成熟血管，恩度促进了平滑肌细胞和周细胞的