生物制药发酵过程优化工程师岗位招聘考试试卷及答案

生物制药发酵过程优化工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分）1.发酵过程中溶解氧（DO）的常用检测方法有电化学法和______法。2.生物制药发酵常用的碳源中，葡萄糖属于______碳源。3.发酵培养基灭菌通常采用______灭菌法。4.菌种扩大培养的目的是获得足够数量的______。5.发酵过程中pH下降，通常需要添加______调节。6.发酵罐搅拌的主要作用是传递氧气和______。7.生物反应器的核心部件包括搅拌系统、通气系统和______系统。8.发酵过程优化的核心是平衡______与产物合成的关系。9.重组蛋白发酵常用的表达系统有大肠杆菌、酵母和______。10.发酵液预处理的常用方法有絮凝、离心和______。二、单项选择题（共10题，每题2分）1.下列哪种碳源属于缓释碳源？A.葡萄糖B.淀粉C.蔗糖D.麦芽糖2.发酵过程中，若DO持续低于临界值，最可能的原因是？A.通气量不足B.搅拌转速过高C.培养基碳源不足D.温度过低3.下列哪种灭菌方法不适合培养基灭菌？A.高压蒸汽灭菌B.干热灭菌C.过滤除菌D.紫外线灭菌4.重组大肠杆菌发酵中，诱导表达的常用诱导剂是？A.IPTGB.乙醇C.葡萄糖D.氯化钠5.发酵罐的装液系数一般控制在？A.30%-40%B.50%-70%C.70%-90%D.90%-100%6.下列哪种参数属于发酵过程的间接参数？A.DOB.pHC.菌体浓度D.尾气CO₂浓度7.发酵过程中，泡沫过多的主要原因不包括？A.培养基中含蛋白B.搅拌剧烈C.通气量大D.温度过高8.哺乳动物细胞发酵常用的培养基类型是？A.合成培养基B.天然培养基C.半合成培养基D.无血清培养基9.下列哪种方法可提高发酵过程的传氧效率？A.降低搅拌转速B.减少通气量C.增加罐压D.降低温度10.发酵工艺优化中，响应面法属于？A.单因素优化B.多因素优化C.经验优化D.理论优化三、多项选择题（共10题，每题2分）1.发酵培养基的组成成分包括？A.碳源B.氮源C.无机盐D.生长因子2.发酵过程优化的常用策略有？A.培养基优化B.工艺参数优化C.菌种改良D.下游工艺优化3.下列属于发酵过程关键控制参数的是？A.DOB.pHC.温度D.搅拌转速4.重组蛋白发酵中，影响表达量的因素有？A.诱导时机B.诱导剂浓度C.温度D.溶氧5.发酵液中去除菌体的常用方法有？A.离心B.过滤C.絮凝D.层析6.生物制药发酵需遵循的规范是？A.GMPB.GLPC.GCPD.GDP7.下列属于菌种保藏方法的是？A.斜面保藏B.甘油管保藏C.冷冻干燥保藏D.液氮保藏8.发酵过程中，泡沫控制的方法有？A.机械消泡B.化学消泡C.减少通气量D.降低搅拌转速9.哺乳动物细胞发酵的优点包括？A.表达产物正确折叠B.可进行糖基化修饰C.生长速度快D.培养基成本低10.发酵工艺验证的内容包括？A.培养基灭菌验证B.工艺参数稳定性验证C.产物收率验证D.清洁验证四、判断题（共10题，每题2分）1.发酵过程中，DO越高越有利于产物合成。（）2.培养基灭菌温度越高，时间越长，灭菌效果越好，对产物无影响。（）3.菌种扩大培养的种子液接种量越大，发酵效果越好。（）4.发酵过程中，pH主要由菌体代谢和通气量变化引起。（）5.重组蛋白发酵中，诱导过早会导致菌体生长受抑制。（）6.哺乳动物细胞发酵不需要无菌控制。（）7.发酵罐的搅拌器类型不影响传氧效率。（）8.响应面法可用于多因素交互作用的优化。（）9.发酵液预处理的目的是去除杂质，便于下游分离。（）10.GMP要求发酵过程所有操作需有记录可追溯。（）五、简答题（共4题，每题5分）1.简述发酵过程中溶解氧（DO）的控制策略。2.培养基优化的常用方法有哪些？3.简述发酵过程中泡沫产生的原因及控制方法。4.重组蛋白发酵中，诱导表达的关键注意事项有哪些？六、讨论题（共2题，每题5分）1.如何平衡发酵过程中菌体生长与产物合成的关系？2.生物制药发酵过程中，如何确保工艺的稳定性与可重复性？---答案部分一、填空题答案1.荧光2.速效3.湿热（高压蒸汽）4.活性菌体（种子液）5.碱性物质（如氨水、NaOH）6.混合（或传质、传热）7.温度控制8.菌体生长9.哺乳动物细胞（或昆虫细胞）10.过滤二、单项选择题答案1.B2.A3.D4.A5.B6.D7.D8.D9.C10.B三、多项选择题答案1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABC6.A7.ABCD8.ABCD9.AB10.ABCD四、判断题答案1.×2.×3.×4.√5.√6.×7.×8.√9.√10.√五、简答题答案1.DO控制策略：①生长阶段：维持DO≥30%饱和度，通过提高通气量、搅拌转速、罐压实现；②产物阶段：按需调整（如厌氧发酵降DO）；③DO不足时，补加新鲜培养基、降低搅拌（减少菌体耗氧）或添加消泡剂；④关联尾气CO₂监测，动态调整参数，确保DO稳定。2.培养基优化方法：①单因素法：简单筛选单一因素最优值；②正交试验：少次数分析多因素交互；③响应面法：拟合方程优化多因素组合；④Plackett-Burman：筛选关键影响因素；⑤代谢组学：结合代谢物分析匹配成分。3.泡沫原因与控制：原因：培养基表面活性物质、通气搅拌、菌体代谢物；控制：①机械消泡（消泡桨）；②化学消泡（聚醚/硅酮类消泡剂）；③工艺调整（减通气/搅拌、优化培养基）；④在线监测控制消泡剂添加量。4.诱导表达注意事项：①时机：菌体对数中期（OD稳定增长）；②诱导剂浓度：适宜（如IPTG0.1-1mM）；③温度：诱导后降温（如37℃→25℃）减少包涵体；④时间：4-8小时；⑤DO：维持稳定避免氧限制。六、讨论题答案1.平衡生长与合成：①分阶段调控：生长阶段促菌体积累，产物阶段抑生长促合成；②补料策略：流加碳源/氮源，避免底物抑制（如葡萄糖效应）；③代谢调控：基因工程敲除副代谢途径，引导代谢流向产物；④在线监测：实时调整参数，协同生长与合成；⑤验证优化：通过试验确定最优补料及参数范围。2.工艺稳定