高致病性动物病原微生物实验个人防护装备穿脱细则

高致病性动物病原微生物实验个人防护装备穿脱细则一、防护装备的选择与准备要求高致病性动物病原微生物实验需严格遵循生物安全三级（BSL-3）及以上防护标准，个人防护装备的选择需满足全面覆盖、密封无漏、防渗透三大核心要求。基础装备包括一次性防护帽、N95及以上级别医用防护口罩、正压呼吸面罩（或全面型呼吸防护器）、连体式防护服（如杜邦Tyvek材质）、护目镜、双层丁腈手套、防水鞋套等。在使用前必须进行装备完整性检查：防护服需确认无破损、拉链完好、胶条密封无脱落；呼吸面罩需检查滤芯有效期及气密性；护目镜需确保镜片无划痕、松紧带弹性良好；手套需充气检查是否存在微小孔洞。所有装备需统一存放于实验室缓冲间的专用消毒柜内，按穿戴顺序分层摆放，避免交叉污染。针对不同操作场景需强化防护等级：进行病毒分离、动物解剖等产生气溶胶的操作时，必须配备正压式空气呼吸器，其工作压力应维持在280-300kPa；涉及大量液体喷溅的实验（如离心管破裂处理）需加穿防水围裙，并使用全包裹式防护面罩；对小型啮齿类动物进行活体接种时，需额外佩戴金属网面防护手套，防止动物抓咬伤导致的病原暴露。二、穿戴流程分步操作规范（一）前期准备与手部清洁进入半污染区后，首先通过非接触式感应水龙头进行七步洗手法清洁，具体步骤为：掌心相对揉搓→手指交叉揉搓→掌心对手背揉搓→弯曲手指关节揉搓→拇指环绕揉搓→指尖揉搓掌心→手腕旋转揉搓，每步骤持续15秒以上，随后使用含75%酒精的免洗消毒剂进行二次消毒。清洁后需在穿衣镜前确认自身衣物无外露（如长发需盘入一次性帽子，耳钉、手表等饰品需提前摘除），并检查缓冲间内紫外线消毒计时器显示已完成30分钟以上消毒。（二）核心装备穿戴顺序呼吸防护装备佩戴优先佩戴N95口罩，将鼻夹朝上，橡皮筋分别挂于双耳，用食指和中指按压鼻夹塑形至贴合鼻梁，随后进行气密性测试：双手捂住口罩快速呼气，若口罩边缘无漏气则合格。对于正压呼吸面罩，需先连接供气软管与面罩接口，打开气瓶阀门，观察压力表指针稳定后，将头带分上中下三部分固定，拉紧时确保面罩边缘与面部完全贴合，开启送气阀感受气流均匀分布后关闭，待进入污染区前再次开启。头部与眼面防护一次性防护帽需完全覆盖发际线及耳朵，帽檐边缘应与口罩上缘重叠1-2cm，避免头发暴露。护目镜需从额头向下佩戴，松紧带调至贴合头部但无压迫感，镜片下方应与口罩边缘无缝衔接，转动头部时镜片不发生位移。若使用全面型面罩，需先将面罩固定带套过头顶，调节颈部束带至面罩下缘覆盖下颌，确保呼气时面罩内无雾气凝结。防护服与鞋套穿戴连体防护服需两人辅助穿戴（单人操作时需借助穿衣架）：先将双脚伸入裤腿，双手抓住衣领顺势上拉，注意防护服下摆不可接触地面。拉合拉链至顶端后，需将拉链胶条从下向上完整按压密封，并用手撕胶带在拉链末端额外加固。鞋套需完全包裹防护服裤脚，松紧带收口处用防水胶带缠绕2圈，确保与防护服形成闭环防护。手部防护与最终检查内层手套需选择无粉乳胶材质，穿戴时避免手指接触手套外部，穿戴后将袖口反折1cm形成密封边。外层手套为加厚丁腈材质，需覆盖防护服袖口5cm以上，用胶带将手套与袖口固定，确保操作时不会滑脱。最终检查需依次确认：呼吸面罩气流正常、防护服无褶皱或破损、所有开口处（如袖口、领口）均已密封、护目镜视野清晰无遮挡，可通过向不同方向弯腰、伸展手臂等动作测试装备是否妨碍操作。三、脱卸流程风险控制要点（一）污染区至半污染区过渡处理实验结束后，首先在生物安全柜内完成实验器材的初步消毒（如移液器、试管架用1000mg/L含氯消毒剂擦拭），随后关闭安全柜风机，在缓冲间门口使用过氧化氢喷雾消毒器进行全身喷洒，喷洒顺序为：头顶→背部→双肩→双臂→腹部→腿部→鞋底，每个区域喷洒时间不少于3秒，确保防护服表面完全湿润。（二）装备脱卸分步操作外层防护装备移除脱外层手套时需左手捏住右手手套腕部外侧，向内翻转脱下，形成“口袋”状包裹污染物，再用裸露的左手手指插入右手手套内侧，以同样方式脱下左手手套，将两只手套一起放入黄色医疗废物专用袋。随后解开防护服腰部的束带，拉开拉链至胸口位置，注意双手不可接触防护服外表面，需用手指勾住拉链拉片向下拉动。防护服与呼吸装备脱卸脱下防护服时保持上身前倾，双手从内侧抓住肩部将防护服向下翻卷，使污染面向内包裹，翻卷至腰部时连同鞋套一起脱下，动作需缓慢避免产生扬尘。正压呼吸面罩的脱卸需先关闭气瓶阀门，待压力表指针归零后，解开颈部束带和头带，双手托住面罩底部将其向前取下，放入专用消毒箱。N95口罩需在摘除帽子前最后脱卸：用手指勾住下方橡皮筋从耳后取下，避免触碰口罩正面，立即投入医疗废物袋。清洁区终末消毒进入清洁区后，再次进行七步洗手法清洁，随后使用生理盐水冲洗眼睛（若佩戴隐形眼镜需立即取出），鼻腔用沾有碘伏的棉签轻轻擦拭。最后在更衣室进行全身淋浴，水温调至38-40℃，使用抗菌沐浴露重点清洁头发、耳后及指甲缝，淋浴时间不少于10分钟。四、常见问题处理与质量监控（一）装备故障应急处置防护服破损：发现破损（如撕裂、拉链失效）时，需立即停止操作，在生物安全柜内用防水胶带沿破损边缘5cm范围进行“十字交叉”粘贴，随后快速撤离至缓冲间，按紧急脱卸流程处理，破损防护服需单独标注“高风险污染”后进行高压灭菌。呼吸面罩漏气：正压系统报警时，应立即退至实验台边缘，检查供气软管连接处是否松动，若无法修复需开启备用气瓶，在同事协助下更换备用面罩，原面罩按感染性废物处理。（二）流程质量控制措施实验室需建立穿戴质量双查制度：每日首位进入污染区人员需由值班监督员进行全程视频记录，检查项目包括装备完整性（10项）、穿戴顺序（7步）、密封测试（3项），不合格者需重新培训直至连续3次通过考核。脱卸过程需在带摄像头的缓冲间内进行，系统自动识别是否存在“手部触碰污染面”“装备掉落地面”等违规动作，每月生成《个人防护合规性报告》，对违规率超过5%的人员暂停实验资格。装备维护方面，正压呼吸器需每工作200小时更换滤芯，防护服按“一人一用一灭菌”原则处理，使用后的护目镜需浸泡于2000mg/L过氧乙酸溶液中30分钟，再用去离子水冲洗后烘干。建立装备失效预警系统：通过RFID芯片记录每件防护服的使用次数（上限5次），接近阈值时自动在缓冲间显示屏提示更换。五、特殊场景强化防护方案（一）动物实验专项防护对羊、猴等大型实验动物进行鼻内接种时，需采用三级生物安全防护：在基础装备外加穿带帽连体正压防护服，其内置送风系统需维持15-20Pa的正压，袖口和脚踝处配备弹性密封环。动物固定过程中需使用长柄保定器，操作人员与动物保持1.5米以上距离，实验台面铺设防水塑料布，边缘用重物固定防止液体外溢。（二）气溶胶暴露应急处理若发生离心机爆炸等气溶胶泄漏事件，需保持冷静切勿奔跑，立即关闭实验室通风系统，原地佩戴备用呼吸面罩，在30分钟内完成以下操作：用蘸有2%戊二醛的纱布覆盖泄漏区域，启动房间内的气溶胶吸附装置，随后按逆向顺序脱卸装备（先脱外层手套→护目镜→防护服→呼吸面罩），脱卸过程中每步增加75%酒精手部消毒。事后需对整个实验室