2025年医学技术题库及答案

2025年医学技术题库及答案1.简述新一代测序（NGS）技术中，影响测序数据质量的关键质控指标及意义。答：关键质控指标包括：①Q30值（测序碱基质量分数≥30的比例），反映测序准确性，Q30≥85%为合格；②覆盖深度（目标区域平均测序次数），深度不足会导致变异漏检，肿瘤检测通常要求≥500×；③比对率（有效序列比对到参考基因组的比例），反映测序数据的有效性，一般需≥90%；④均一性（目标区域覆盖深度的变异系数），均一性差会导致部分区域数据不可用，理想值≤30%；⑤GC含量偏差（测序数据中GC含量与理论值的差异），偏差过大可能影响覆盖均匀性。这些指标共同确保测序数据的可靠性，为后续变异分析提供基础。2.流式细胞术中，荧光补偿设置的原理及操作步骤是什么？答：原理：不同荧光染料发射光谱存在重叠，需通过补偿消除交叉干扰。当某一荧光通道检测到其他染料的发射光时，需从该通道信号中扣除重叠部分。操作步骤：①选择单阳性对照（仅标记一种荧光染料的细胞）；②将单阳性样本上机，调整电压使阴性群与阳性群分离；③在双参数散点图中，观察非标记通道是否存在信号溢出；④通过补偿参数调整，将非标记通道的信号拉回阴性区域；⑤验证补偿效果，使用双标样本确认各通道间无明显交叉污染。3.简述基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）在临床微生物鉴定中的应用优势及局限性。答：优势：①快速（单个样本鉴定时间<10分钟）；②高通量（单次可处理96-384个样本）；③准确性高（对常见细菌、酵母鉴定准确率>90%）；④成本低（单次检测成本约5-10元）；⑤可鉴定传统培养难生长的微生物（如分枝杆菌）。局限性：①无法区分近缘菌种（如伤寒沙门菌与副伤寒沙门菌）；②需建立完善的菌种数据库（部分罕见菌或新菌种可能无法匹配）；③对苛养菌（如奈瑟菌属）需特殊前处理；④无法直接鉴定未培养的临床样本（需纯培养）。4.阐述CT能谱成像的基本原理及其在鉴别肺结节性质中的应用价值。答：原理：基于双源或双能量探测器，同时获取高低两种能量下的衰减数据，通过物质分离技术得到不同物质（如碘、钙、脂肪）的密度图及基物质图像。应用价值：①定量分析结节内碘含量（反映血供），恶性结节血供丰富，碘浓度显著高于良性结节；②区分钙化类型（如错构瘤的爆米花样钙化与恶性结节的细沙样钙化）；③计算有效原子序数，鉴别含脂结节（如肺脂肪瘤）与非脂结节；④通过虚拟平扫技术减少辐射剂量，同时保留诊断信息。研究显示，能谱CT对肺结节良恶性鉴别的准确率可达85%以上。5.简述PCR扩增中“非特异性扩增”的常见原因及解决方法。答：常见原因：①引物设计不当（如引物二聚体、与非靶序列同源性高）；②模板浓度过高或质量差（含PCR抑制物如血红蛋白、肝素）；③退火温度过低（允许引物与非靶序列结合）；④Taq酶活性过高（延长非特异性产物合成）；⑤循环次数过多（累积非特异性产物）。解决方法：①优化引物设计（使用NCBIBLAST验证特异性，避免3’端互补）；②稀释模板或纯化（如用磁珠法去除抑制物）；③提高退火温度（通过梯度PCR确定最佳温度）；④使用热启动Taq酶（避免低温下酶活性）；⑤减少循环次数（一般≤35次）。6.列举超声弹性成像的主要类型及其临床适用场景。答：主要类型：①应变弹性成像（SE）：通过外部加压或内部振动获取组织应变率，计算弹性比值。适用于甲状腺结节（TI-RADS4类结节鉴别）、乳腺肿块（BI-RADS4类以上评估）；②剪切波弹性成像（SWE）：通过声辐射力激发剪切波，测量剪切波速度（m/s）或弹性模量（kPa）。适用于肝脏纤维化分级（F0-F4）、前列腺癌可疑病灶定位；③实时组织弹性成像（RTE）：动态显示组织硬度分布，用于淋巴结良恶性鉴别（转移性淋巴结硬度高于反应性增生）。SWE因定量准确，已被纳入《肝脏弹性成像临床应用指南》作为肝纤维化诊断的首选方法。7.简述全自动生化分析仪的日常维护要点及校准流程。答：日常维护：①每日：清洁比色杯（避免交叉污染）、检查试剂针/样本针堵塞（用通针处理）、更换去离子水；②每周：校准光度计（确保吸光度准确性）、检测探针液面感应功能（防止吸样错误）；③每月：更换反应杯或彻底消毒比色系统（避免微生物污染）、校准温控系统（37℃±0.1℃）。校准流程：①选择配套校准品（溯源至国际标准物质）；②在分析仪上设置校准项目（如ALT、GLU）；③运行校准程序（至少2个浓度水平，覆盖线性范围）；④自动计算校准系数（斜率、截距）；⑤验证校准效果（检测质控品，偏差应≤1/2允许总误差）；⑥记录校准数据（包括校准时间、校准品批号、结果）。8.阐述CRISPR-Cas12技术与传统Cas9技术的主要区别及在分子诊断中的应用潜力。答：区别：①靶向机制：Cas9依赖PAM（NGG）且切割双链DNA，Cas12依赖PAM（TTTV）且切割单链DNA后激活“旁切”活性（非特异性切割周围单链DNA）；②产物形式：Cas9产生双链断裂（DSB），Cas12产生单链断裂并伴随非特异性切割；③检测灵敏度：Cas12的旁切活性可放大信号（如荧光标记的ssDNA探针被切割后发光），灵敏度可达单拷贝水平。应用潜力：①病原体快速检测（如新冠病毒、结核分枝杆菌），无需扩增即可实现超灵敏检测；②癌症早筛（检测血浆游离DNA中的突变位点）；③基因编辑（Cas12的单链切割特性可能降低脱靶效应）；④现场快速检测（POCT），结合试纸条技术可在30分钟内出结果。9.简述数字PCR（dPCR）与实时荧光定量PCR（qPCR）的核心差异及临床应用场景。答：核心差异：①定量原理：qPCR基于Ct值与初始模板量的线性关系（相对定量），dPCR基于泊松分布计算阳性微滴比例（绝对定量）；②抗干扰能力：dPCR对抑制剂（如血液中的血红蛋白）耐受性更强；③灵敏度：dPCR可检测低至0.001%的突变频率（qPCR通常≥1%）；④线性范围：dPCR线性范围较窄（1-105拷贝/反应），qPCR更宽（1-1010拷贝/反应）。临床应用：①微小残留病灶（MRD）检测（如白血病治疗后监测）；②拷贝数变异（CNV）分析（如21三体综合征产前诊断）；③基因编辑效率评估（精确计算编辑与未编辑细胞比例）；④病原体载量极低时的检测（如HIV急性期或治疗后监测）。10.列举MRI中常用的功能成像技术及其临床意义。答：①扩散加权成像（DWI）：通过检测水分子扩散运动，反映组织微观结构。急性期脑梗死（细胞毒性水肿）表现为高信号，ADC值降低；②灌注加权成像（PWI）：通过对比剂首过效应评估组织血流灌注。脑肿瘤PWI显示高灌注（提示恶性），缺血半暗带（PWI>DWI）指导溶栓治疗；③磁敏感加权成像（SWI）：利用组织磁敏感性差异显示小静脉、微出血。脑外伤微出血（SWI阳性）提示预后不良，帕金森病铁沉积（黑质低信号）辅助诊断；④磁共振波谱（MRS）：检测代谢物（NAA、Cho、Cr）。胶质瘤Cho升高（恶性增殖），NAA降低（神经元损伤）；⑤扩散张量成像（DTI）：追踪白质纤维束走行。脑肿瘤手术前评估纤维束受压情况，指导保功能手术。11.简述流式细胞术检测白血病免疫分型的常用抗体组合及判读要点。答：常用抗体组合（根据WHO分型）：①髓系：CD13、CD33、MPO、CD117；②B淋系：CD19、CD22、CD79a、cCD22、CD10；③T淋系：CD3（胞内/膜）、CD2、CD5、CD7；④干/祖细胞：CD34、HLA-DR；⑤异常抗原：如髓系细胞表达CD7（跨系表达，提示预后差）。判读要点：①确定细胞系列（髓系/淋系）；②判断分化阶段（如B淋系前体细胞CD34+、CD10+提示早期B-ALL）；③识别异常表型（如正常成熟粒细胞不表达CD34，若阳性提示原始细胞残留）；④结合遗传学（如t(9;22)阳性B-ALL常伴CD19+、CD34+、HLA-DR+）。12.阐述质谱流式细胞术（CyTOF）与传统流式细胞术的主要优势及应用领域。答：优势：①通道数量多（可同时检测40-50个标记，传统流式≤20个）；②无荧光串扰（利用金属同位素标记，发射光谱无重叠）；③分辨率高（金属标签信号稳定，动态范围达5个数量级）；④单细胞数据维度丰富（可进行高维数据分析）。应用领域：①肿瘤微环境研究（同时分析免疫细胞亚群、检查点分子、细胞因子）；②干细胞分化轨迹追踪（多标记联合分析不同分化阶段）；③自身免疫病机制研究（鉴别异常免疫细胞亚群）；④药物疗效评估（监测治疗前后免疫细胞表型变化）。13.简述全自动化学发光免疫分析仪的检测原理及常见故障处理。答：原理：基于化学发光反应（如吖啶酯、鲁米诺体系），将抗原-抗体反应与发光信号偶联。步骤：①样本中的待测物（如HBsAg）与包被抗体、酶标抗体结合形成三明治复合物；②加入发光底物（如H2O2+鲁米诺），酶（如HRP）催化底物发光；③光电倍增管（PMT）检测光强度，通过标准曲线计算待测物浓度。常见故障：①无信号：检查试剂是否过期、加样针堵塞（用通针疏通）、PMT故障（更换）；②信号值异常高：样本溶血（血红蛋白干扰）、交叉污染（清洗比色杯）、试剂过量（调整加样量）；③校准失败：校准品未复溶完全（充分混匀）、校准参数设置错误（核对项目代码）、仪器温度异常（检查温控模块）。14.列举分子诊断实验室生物安全的关键控制措施。答：①分区管理：严格划分试剂准备区、样本处理区、扩增区、产物分析区，单向流动；②空气压力控制：各区保持负压（样本处理区<-15Pa，扩增区<-10Pa），避免气溶胶扩散；③个人防护：穿戴防护服、N95口罩、双层手套，样本处理时在生物安全柜（BSC-Ⅱ级）内操作；④气溶胶控制：使用带滤芯的吸头、避免剧烈震荡、定期用紫外线+过氧乙酸消毒；⑤废弃物处理：感染性废物高压蒸汽灭菌（121℃，30分钟）后按医疗废物处理，实验废液用含氯消毒液（有效氯≥2000mg/L）浸泡2小时；⑥人员培训：定期进行生物安全培训（包括锐器伤处理、暴露后应急措施）。15.简述AI辅助诊断在医学影像中的应用场景及局限性。答：应用场景：①肺结节检测（自动标记结节位置，计算体积、密度，提示恶性概率）；②乳腺癌筛查（钼靶/超声自动识别钙化灶、肿块，辅助BI-RADS分级）；③糖尿病视网膜病变（自动检测微血管瘤、渗出，评估病变分期）；④脑卒中评估（CT自动识别出血/梗死区域，计算体积，指导溶栓时间窗）；⑤骨龄评估（自动分析手腕骨发育程度，预测身高）。局限性：①依赖高质量标注数据（不同中心数据差异可能导致模型泛化能力下降）；②无法替代临床综合判断（需结合病史、实验室检查）；③伦理与法律问题（诊断责任归属、患者隐私保护）；④对罕见病或不典型病例识别率低（训练数据中罕见表型缺失）。16.阐述基因编辑技术（如CRISPR）在遗传病治疗中的应用进展及挑战。答：应用进展：①单基因病治疗：地中海贫血（编辑HBB或BCL11A基因）已进入Ⅲ期临床试验，2023年FDA批准全球首个CRISPR疗法（exa-cel，用于镰刀型细胞贫血）；②基因敲入：通过同源重组修复（HDR）插入正常基因（如治疗脊髓性肌萎缩症的SMN1基因）；③体内编辑：腺相关病毒（AAV）递送系统实现肝脏（如治疗苯丙酮尿症）、眼部（Leber先天性黑朦）的体内编辑。挑战：①脱靶效应（非预期基因位点编辑可能导致致癌）；②递送系统效率（AAV免疫原性限制重复给药，脂质纳米颗粒（LNP）对肝脏以外组织靶向性差）；③长期安全性（编辑后细胞的增殖、分化是否稳定）；④伦理争议（生殖细胞编辑的“设计婴儿”问题）。17.简述流式细胞术检测循环肿瘤细胞（CTC）的技术要点及临床意义。答：技术要点：①样本处理：EDTA抗凝全血（4小时内处理），通过密度梯度离心（如Ficoll）或微流控芯片富集CTC；②抗体标记：选择上皮细胞标记（EpCAM、CK8/18/19）联合肿瘤特异性标记（如Her2、PSA），排除白细胞（CD45-）；③检测策略：采用多参数设门（SSC低、CD45-、EpCAM+/CK+），结合活细胞染料（如7-AAD）区分存活CTC；④定量分析：计数CTC数量（>5个/7.5ml提示转移风险）。临床意义：①预后评估（转移性乳腺癌CTC≥5个提示无进展生存期缩短）；②疗效监测（治疗后CTC数量下降提示有效）；③耐药机制研究（CTC表型变化如EMT标记（Vimentin+）提示耐药）；④液体活检（替代组织活检获取肿瘤异质性信息）。18.列举临床微生物实验室常用的快速检测技术及其适用病原体。答：①免疫荧光法（IFA）：检测呼吸道合胞病毒（RSV）、军团菌（尿抗原），1-2小时出结果；②核酸扩增（NAAT）：PCR检测结核分枝杆菌（TB-PCR）、淋病奈瑟菌（NG-PCR），灵敏度≥95%；③质谱（MALDI-TOF）：鉴定需氧菌、酵母菌（如白色念珠菌），30分钟内完成；④抗原检测（胶体金）：流感病毒（A/B型）、链球菌（快速链球菌试验），15分钟出结果；⑤荧光原位杂交（FISH）：检测血流感染中的革兰阳性/阴性菌（如葡萄球菌、大肠杆菌），2小时内报告。19.简述MRI对比剂的分类及钆对比剂的使用注意事项。答：分类：①细胞外液对比剂（Gd-DTPA）：分布于细胞外间隙，用于脑肿瘤、肝脏病变增强；②肝细胞特异性对比剂（Gd-EOB-DTPA）：被肝细胞摄取，用于肝脏局灶性病变鉴别（如肝癌与肝血管瘤）；③血池对比剂（Gd-BOPTA）：长时间滞留血管内，用于血管成像；④超顺磁性对比剂（SPIO）：被Kupffer细胞摄取，用于脾脏、淋巴结病变检测。注意事项：①肾功能评估（eGFR<30ml/min/1.73m²禁用，避免肾源性系统性纤维化（NSF））；②过敏史：有对比剂过敏史者需预用激素（如地塞米松）；③妊娠/哺乳期：除非必要，妊娠期避免使用（Gd可通过胎盘），哺乳期需暂停哺乳24小时；④剂量控制（0.1mmol/kg），过量可能增加NSF风险；⑤对比剂外渗：立即停止注射，局部冷敷（避免热敷加重组织损伤）。20.阐述单细胞测序技术在肿瘤研究中的应用价值。答：应用价值：①肿瘤异质性分析：识别同一肿瘤中的不同克隆亚群（如原发灶与转移灶的克隆演化关系）；②微环境解析：同时测序肿瘤细胞、免疫细胞、基质细胞，揭示免疫抑制性微环境（如Treg细胞浸润）；③耐药机制研究：追踪治疗前后单细胞转录组变化（如耐药克隆的EMT基因激活）；④循环肿瘤细胞（CTC）分析：单细胞测序CTC可获取转移相关基因（如CXCR4高表达提示骨髓转移）；⑤新靶点发现：鉴定肿瘤干细胞标记（如ALDH1+细胞）或特异性表面抗原（用于CAR-T设计）。研究显示，单细胞测序可发现传统bulk测序遗漏的低频突变（频率<5%），为精准治疗提供更全面的分子信息。21.简述全自动血培养仪的工作原理及阳性瓶的处理流程。答：原理：通过检测培养瓶内CO2浓度变化（需氧瓶：细菌代谢产CO2；厌氧瓶：排除O2后产CO2），或荧光传感器（CO2与指示剂反应改变荧光强度）。当CO2达到阈值时，仪器报警提示阳性。处理流程：①无菌抽取阳性瓶培养液，涂片革兰染色（判断菌型）；②转种血平板、巧克力平板（需氧/微需氧）及厌氧平板（厌氧）；③快速鉴定（MALDI-TOF或NAAT）；④药敏试验（采用自动化系统如VITEK2，或纸片扩散法）；⑤记录结果（包括阳性时间、菌种、药敏谱）；⑥污染排查（如阳性瓶为皮肤正常菌群（凝固酶阴性葡萄球菌），需结合临床判断是否为污染）。22.列举分子诊断中常见的突变检测技术及其适用突变类型。答：①Sanger测序：检测单碱基变异（SNV）、小插入/缺失（indel），分辨率≥20%突变频率；②ARMS-PCR（扩增阻滞突变系统）：检测已知SNV（如EGFR19del、L858R），灵敏度≥1%；③数字PCR（dPCR）：绝对定量SNV/indel，灵敏度≤0.01%；④二代测序（NGS）：同时检测SNV、indel、CNV、融合基因（如ALK-EML4），覆盖多基因panel；⑤荧光原位杂交（FISH）：检测基因扩增（如HER2）、易位（如BCR-ABL）；⑥高分辨率熔解曲线（HRM）：筛查未知SNV/indel，需结合测序验证。23.简述超声造影（CEUS）的成像原理及在肝脏局灶性病变中的应用标准。答：原理：使用微泡造影剂（直径1-8μm，与红细胞大小相似），经静脉注射后随血流分布。低机械指数（MI<0.1）超声激发微泡产生非线性信号（谐波成像），增强血管显影。应用标准（根据《肝脏超声造影指南》）：①动脉期：肝细胞癌（HCC）呈快速高增强，肝血管瘤（HA）呈周边结节状增强；②门脉期/延迟期：HCC呈低增强（廓清），HA呈向心性填充；③良性病变（局灶性结节增生（FNH））动脉期均匀高增强，延迟期等增强（中心瘢痕低增强）。CEUS对HCC的诊断准确率可达90%，可替代部分增强CT/MRI检查。24.阐述实验室信息管理系统（LIS）的核心功能及数据质量控制措施。答：核心功能：①样本管理（条码扫描、样本状态追踪）；②检验流程管理（医嘱接收、项目计费、结果审核）；③质量控制（自动绘制质控图、失控报警）；④报告管理（电子报告提供、LIS-HIS对接）；⑤数据统计（工作量统计、阳性率分析）。数据质量控制措施：①双向通讯（分析仪与LIS自动传输结果，避免人工输入错误）；②逻辑校验（如血红蛋白>200g/L提示异常，需复核）；③权限管理（审核报告需双人确认，修改结果需记录日志）；④备份与恢复（每日自动备份数据，异地存储防止丢失）；⑤接口标准化（遵循HL7协议，确保与HIS、PACS系统兼容）。25.简述基因芯片技术在遗传病诊断中的应用及局限性。答：应用：①染色体微阵列分析（CMA）：检测染色体拷贝数变异（CNV），分辨率50-200kb，用于不明原因智力障碍、多发畸形（诊断率约15-20%）；②单基因病突变检测（如遗传性耳聋基因芯片）：同时检测多个已知致病位点（如GJB2、SLC26A4）；③HLA分型（组织配型芯片）：高分辨率检测HLA-A/B/DRB1等位基因，用于器官移植；④肿瘤相关基因表达谱（如乳腺癌21基因检测）：预测复发风险，指导化疗决策。局限性：①无法检测平衡易位、低水平嵌合（<20%）；②对新发现的突变位点（未设计探针）漏检；③需要已知致病基因信息（未知基因病无法诊断）；④结果解读复杂（需结合临床表型、数据库（如ClinVar）验证）。26.列举介入放射学中常用的血管内介入技术及其临床应用。答：①经导管动脉化疗栓塞（TACE）：肝癌治疗（将化疗药物+碘油注入肿瘤供血动脉，阻断血供并局部给药）；②经皮腔内血管成形术（PTA）+支架置入：下肢动脉硬化闭塞症（恢复血流，缓解间歇性跛行）；③经颈静脉肝内门体分流术（TIPS）：肝硬化门脉高压（降低门脉压力，治疗食管胃底静脉曲张出血）；④肾动脉栓塞术：肾肿瘤术前减瘤、肾创伤出血止血；⑤下腔静脉滤器置入：预防肺栓塞（用于下肢深静脉血栓高危患者）；⑥冠状动脉介入（PCI）：冠心病（球囊扩张+支架置入，开通狭窄冠脉）。27.简述临床检验中室内质控（IQC）的实施步骤及失控处理原则。答：实施步骤：①选择质控品（与检测项目匹配，稳定期≥28天）；②确定靶值（20天连续检测均值）与标准差（SD）；③绘制Levey-Jennings质控图（均值±2SD为警告限，±3SD为失控限）；④每日随患者样本检测1-2水平质控；⑤分析质控结果（是否在控）。失控处理原则：①立即复查质控（排除操作错误）；②检查仪器状态（校准、温度、试剂）；③更换新批号质控品（排除质控品失效）；④若仍失