2026年生物技术专业测试基因工程与细胞培养技术题库

2026年生物技术专业测试：基因工程与细胞培养技术题库一、单项选择题（每题2分，共20题）1.基因工程中，限制性内切酶的主要作用是（）A.连接DNA片段B.切割DNA片段C.合成DNA片段D.转录RNA片段2.PCR技术中，引物的作用是（）A.催化DNA合成B.切割DNA片段C.模板链D.特异性结合目标序列3.基因克隆中，载体的主要功能是（）A.提供酶切位点B.携带外源基因C.促进DNA复制D.调控基因表达4.细胞培养中，完全培养基通常包含（）A.蛋白质和激素B.碳源和氮源C.无机盐和维生素D.以上都是5.动物细胞培养中，常用的贴壁抑制因子是（）A.胰蛋白酶B.丝裂霉素CC.乳酸脱氢酶D.乙二醇6.细胞冷冻保存中，常用的保护剂是（）A.葡萄糖B.甘油C.氨基酸D.脂肪酸7.基因编辑技术中，CRISPR-Cas9系统的核心元件是（）A.gRNAB.Cas9蛋白C.限制性内切酶D.载体8.发酵过程中，无菌操作的主要目的是（）A.提高酶活性B.防止杂菌污染C.降低能耗D.增加产量9.细胞培养基中，L-谷氨酰胺的作用是（）A.提供能量B.促进增殖C.维持pH稳定D.以上都是10.基因工程中，报告基因的作用是（）A.提示载体成功导入B.监测基因表达C.提供酶切位点D.调控基因转录二、多项选择题（每题3分，共10题）1.限制性内切酶的特点包括（）A.识别特异性序列B.切割DNA双链C.需要辅因子参与D.在所有条件下均活性稳定2.PCR反应体系中，必需的组分有（）A.模板DNAB.引物C.DNA聚合酶D.dNTPs3.细胞培养的基本要求包括（）A.无菌环境B.温度控制C.pH调节D.气体混合4.基因载体通常具备的功能有（）A.复制能力B.插入外源基因C.转染宿主细胞D.表达调控元件5.细胞冷冻保存的步骤包括（）A.逐步降温B.加入保护剂C.快速冷冻D.缓慢解冻6.基因编辑技术CRISPR-Cas9的优势包括（）A.高效性B.可编辑性C.经济性D.无脱靶效应7.发酵过程中，影响产量的因素有（）A.培养基成分B.温度C.搅拌速度D.pH值8.细胞培养基中，常用的添加剂有（）A.胰蛋白酶B.丝裂霉素CC.L-谷氨酰胺D.胰岛素9.基因工程中，常用的工具酶包括（）A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.DNA聚合酶D.RNA聚合酶10.细胞培养的常见问题包括（）A.细胞污染B.细胞老化C.培养基不适宜D.工作台振动三、填空题（每空1分，共20空）1.基因工程的核心工具是______和______。2.PCR技术中，退火温度通常控制在______℃左右。3.细胞培养中，完全培养基通常包含______、______和______。4.基因编辑技术CRISPR-Cas9中，gRNA的作用是______。5.细胞冷冻保存中，常用的保护剂是______和______。6.发酵过程中，无菌操作的主要目的是______。7.细胞培养基中，L-谷氨酰胺的作用是______。8.基因工程中，报告基因的作用是______。9.限制性内切酶的特点是______和______。10.PCR反应体系中，必需的组分包括______、______和______。四、简答题（每题5分，共10题）1.简述限制性内切酶的作用原理。2.解释PCR技术的关键步骤。3.描述细胞培养的基本要求。4.说明基因载体的主要功能。5.阐述细胞冷冻保存的步骤。6.分析基因编辑技术CRISPR-Cas9的优势。7.讨论发酵过程中影响产量的因素。8.解释细胞培养基中L-谷氨酰胺的作用。9.说明基因工程中报告基因的应用。10.分析细胞培养的常见问题及解决方法。五、论述题（每题10分，共2题）1.结合实际应用，论述基因工程在生物医药领域的意义。2.结合行业发展趋势，论述细胞培养技术在食品工业中的应用前景。答案与解析一、单项选择题1.B限制性内切酶通过识别特异性DNA序列并切割双链，实现基因片段的分离。2.D引物是短链DNA或RNA，特异性结合目标序列，为DNA聚合酶提供起始位点。3.B载体是基因工程中携带外源基因的工具，可进入宿主细胞并复制。4.D完全培养基包含蛋白质、激素、碳源、氮源、无机盐和维生素等，满足细胞生长需求。5.B丝裂霉素C可抑制细胞增殖，常用于制备单克隆细胞系。6.B甘油是常用的冷冻保护剂，可降低细胞内冰晶形成损伤。7.AgRNA是向导RNA，负责识别目标DNA序列，引导Cas9蛋白进行切割。8.B无菌操作可防止杂菌污染，确保发酵过程纯净。9.DL-谷氨酰胺是必需氨基酸，参与蛋白质合成和维持pH稳定。10.B报告基因可监测基因表达水平，用于评估载体功能。二、多项选择题1.A、B限制性内切酶识别特异性序列并切割DNA双链，但需特定条件下活性稳定。2.A、B、C、DPCR体系需模板DNA、引物、DNA聚合酶和dNTPs共同作用。3.A、B、C、D细胞培养需无菌环境、温度控制、pH调节和气体混合等条件。4.A、B、C、D载体需具备复制能力、插入外源基因、转染宿主细胞和表达调控元件。5.A、B、C、D细胞冷冻保存需逐步降温、加入保护剂、快速冷冻和缓慢解冻。6.A、B、CCRISPR-Cas9高效、可编辑，但存在脱靶效应，经济性受技术成熟度影响。7.A、B、C、D发酵过程受培养基、温度、搅拌速度和pH值等因素影响。8.C、DL-谷氨酰胺和胰岛素是培养基添加剂，胰蛋白酶和丝裂霉素C不常用。9.A、B、C基因工程工具酶包括限制性内切酶、DNA连接酶和DNA聚合酶。10.A、B、C细胞培养常见问题包括污染、老化，培养基不适宜也会影响生长。三、填空题1.限制性内切酶，DNA连接酶2.55～653.蛋白质，激素，无机盐和维生素4.识别目标DNA序列5.甘油，二甲亚砜6.防止杂菌污染7.提供能量，促进增殖，维持pH稳定8.监测基因表达9.识别特异性序列，切割DNA双链10.模板DNA，引物，DNA聚合酶四、简答题1.限制性内切酶的作用原理：通过识别DNA分子中特定的回文序列，并在特定位点切割双链，实现基因片段的分离或连接。2.PCR技术的关键步骤：变性（高温解开双链）、退火（低温引物结合）、延伸（DNA聚合酶合成新链）。3.细胞培养的基本要求：无菌环境、温度（37℃）、pH（7.2-7.4）、气体混合（95%空气+5%CO2）和完全培养基。4.基因载体的主要功能：携带外源基因进入宿主细胞，实现基因复制、表达或整合。5.细胞冷冻保存的步骤：逐步降温、加入保护剂、快速冷冻（-80℃或液氮）、缓慢解冻（37℃水浴）。6.基因编辑技术CRISPR-Cas9的优势：高效、可编辑、操作简便，但存在脱靶效应，需进一步优化。7.发酵过程中影响产量的因素：培养基成分、温度、搅拌速度、pH值、无菌控制等。8.细胞培养基中L-谷氨酰胺的作用：参与蛋白质合成，维持细胞外液渗透压和pH稳定。9.基因工程中报告基因的应用：通过检测报告基因的表达（如荧光或酶活性），评估外源基因是否成功导入和表达。10.细胞培养的常见问题及解决方法：-细胞污染：严格无菌操作，定期检测；-细胞老化：定期传代，优化培养条件；-培养基不适宜：调整成分或更换培养基。五、论述题1.基因工程在生物医药领域的意义：-基因治疗：修复或替换缺陷基因，治疗遗传病（如地中海贫血）；-药物开发：生产重组蛋白