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文档简介

尼帕病毒实验室检测技术方案总结2026尼帕病毒实验室检测的核心要求是“生物安全优先、方法规范统一、结果精准可追溯”,核心检测方法包括核酸检测、血清学检测及病毒一、核心基础信息(一)病毒与检测方法来西亚)、B亚型(孟加拉),基因组为单股负链RNA。(二)生物安全要求·样本检测：采集的感染性样本需在BSL-3实验室灭(一)检测对象2.媒介与食品相关：涉疫地区的果蝠、猪等媒介生物；涉疫地区及(二)技术人员要求1.采样人员：经生物安全培训合格，熟悉标本采集方法与流程，规2.检测人员：经生物安全培训合格，掌握标本处理与检测技术，保(一)病例标本采集1.脑脊液标本：无菌腰椎穿刺抽取，分3管(每管1-2ml),低温保存，1管本地检测，2管供上级复核。2.血液标本：采集3管非抗凝血(每管5ml),尽可能双份(间隔14天),4-8℃暂存，血清析出后-20～-80℃冻存，按比例分配检测与复核样本。3.鼻/咽拭子：采集3份，分别放入含病毒保存液的采集管，按4.尿液标本：采集15ml,分3管(每管5ml),装入无菌离心管，按比例分配检测与复核样本。(二)媒介与食品标本采集·采集对象：果蝠的唾液、尿液；生猪的鼻-咽拭子、血清；冷冻(三)保存与运输·保存：24小时内检测的标本2-8℃存放，无法及时检测的-20~-80℃冻存。·运输：低温冷藏运输，避免冻融，遵守一类病原体生物安全运输规定。(一)资质要求及以上实验室条件，满足临床基因扩增检验实验室要求。·独立医学检验实验室需符合相关基本标准与管理规范。(二)分区要求·核心分区(物理独立、无空气相通):试剂储存和准备区(试剂制备、耗材贮存)、标本制备区(标本灭活、核酸提取)、扩增和产物分析区(核酸扩增、结果分析)。·合并原则：使用一体化自动化分析仪时，可合并标本制备区与扩(三)主要仪器设备·需配备核酸提取仪、医用PCR扩增仪、生物安全柜、病毒灭活设备、低温冰箱、离心机等。五、核心检测方法(一)核酸检测(首选实时荧光定量RT-PCR)·优先选用国际通用方法，配套试剂需符合试剂盒要求；含胍盐灭活型保存液标本直接提取核酸，非灭活型需56℃孵育30分钟·核酸提取在生物安全柜内进行，提取后立即封盖，加入检测反应体系；靶基因为尼帕病毒N基因。酶、引物、探针、样本核酸等，按特定温度和循环数进行反转录阳性，>38为阴性，35≤Ct值≤38需重新复核。(二)血清学检测·现状：无商业化试剂盒，且尼帕病毒与亨尼帕毒属其他病毒存在血清学交叉反应，易出现假阳性。(三)病毒分离(确证性指标)1.适用标本：人体血清、脑脊液、鼻/咽拭子、尿液、脑组织；病3.流程：标本经0.22μm滤器过滤，接种Vero细胞培养，细胞4.生物安全：需在BSL-4实验室开展。(一)危害分级与操作级别实验室，未经培养的感染材料操作需BSL-3实验室，灭活材料操作需BSL-

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