2026年植物生长调节剂化验员实操考核试题及答案

2026年植物生长调节剂化验员实操考核试题及答案一、单选题（每题2分，共20分）1.在赤霉素（GA₃）含量测定中，采用高效液相色谱法（HPLC）时，常用的检测波长为：A.210nmB.254nmC.280nmD.320nm答案：A解析：赤霉素在紫外区210nm处有最大吸收峰，254nm处吸收较弱，280nm几乎无吸收，320nm无吸收，故选A。2.使用酶联免疫吸附法（ELISA）测定脱落酸（ABA）时，包被抗体最适pH为：A.6.0B.7.4C.8.5D.9.6答案：D解析：碳酸盐缓冲液pH9.6可最大限度使抗体通过疏水作用吸附于聚苯乙烯微孔板，提高包被效率。3.吲哚乙酸（IAA）在酸性条件下与FeCl₃显色，其最大吸收波长为：A.435nmB.530nmC.595nmD.620nm答案：B解析：IAA-Fe³⁺络合物在530nm处有特征吸收峰，435nm为吲哚环自身吸收，595nm与620nm为干扰峰。4.采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）测定乙烯利残留时，衍生化试剂通常选用：A.BSTFAB.PFBBEC.MTBSTFAD.DNPH答案：B解析：乙烯利极性强，需用五氟苄基溴（PFBBE）衍生生成易挥发、高灵敏的PFB-乙烯利酯，BSTFA与MTBSTFA适用于羟基硅烷化，DNPH用于醛酮。5.在细胞分裂素（6-BA）标准曲线绘制中，若相关系数R²低于0.995，应优先排查：A.流动相比例B.进样量C.标准品纯度D.柱温答案：C解析：R²低首要原因为标准品降解或纯度不足，流动相比例、进样量、柱温影响峰形与保留时间，但对线性相关性影响次于标准品。6.采用分光光度法测定多效唑时，显色剂为：A.硫酸-甲醇B.磷酸-香草醛C.高氯酸-对二甲氨基苯甲醛D.醋酸铜-联吡啶答案：B解析：多效唑在磷酸-香草醛作用下生成紫红色化合物，最大吸收550nm，其余体系无显色或灵敏度低。7.在液质联用（LC-MS/MS）定量分析中，内标法优于外标法的主要原因是：A.节省标准品B.消除基质效应C.缩短分析时间D.降低检出限答案：B解析：同位素内标与目标物行为一致，可抵消离子抑制或增强，显著提高准确度，其余选项为次要优势。8.测定矮壮素（CCC）时，若样品含大量Cl⁻，应采用的净化方式为：A.C18固相萃取B.强阳离子交换（SCX）C.石墨化碳黑（GCB）D.分子印迹聚合物（MIP）答案：B解析：CCC为阳离子季铵盐，SCX可保留CCC而除去Cl⁻，C18对CCC保留弱，GCB主要去色素，MIP成本高且非必需。9.在赤霉素生物测定（水稻幼苗第二叶鞘法）中，最适光照周期为：A.全黑暗B.8h光/16h暗C.12h光/12h暗D.全光照答案：A解析：赤霉素诱导叶鞘伸长，光照会促进内源生长素合成，干扰结果，故需全黑暗培养。10.采用QuEChERS法处理番茄中乙烯利残留时，提取盐包中MgSO₄与NaCl质量比为：A.1:1B.2:1C.4:1D.6:1答案：C解析：4:1（4gMgSO₄+1gNaCl）可兼顾盐析除水与相分离，比例过高易结块，过低除水不足。二、多选题（每题3分，共15分）11.下列哪些措施可有效降低LC-MS/MS分析中基质效应：A.稀释样品B.使用同位素内标C.增加色谱梯度斜率D.改用APCI源E.采用标准加入法答案：ABDE解析：稀释降低基质浓度；同位素内标补偿响应差异；APCI比ESI更抗基质；标准加入法可校正；梯度斜率影响分离度而非基质效应。12.关于IAA稳定性，下列说法正确的是：A.中性水溶液中易光解B.pH>8时易氧化C.低温避光可长期保存D.与抗坏血酸共存可增效E.金属离子Cu²⁺加速降解答案：ABCE解析：IAA在碱性与光照下分解，Cu²⁺催化氧化，抗坏血酸为还原剂可延缓降解但非增效，D表述不准确。13.在GC-MS测定多效唑时，以下哪些离子对可作为定性离子：A.m/z236→125B.m/z236→167C.m/z238→125D.m/z238→167E.m/z236→236答案：ABCD解析：多效唑分子离子236、238（³⁷Cl同位素），子离子125、167均为合理裂解，236→236为无裂解，不用于定性。14.采用高效液相色谱-荧光法测定激动素（KT）时，需优化的参数包括：A.激发波长B.发射波长C.流动相pHD.柱温E.衍生时间答案：ABCDE解析：KT本身荧光弱，需邻苯二甲醛衍生，五参数均影响荧光强度与分离度。15.下列哪些属于植物生长调节剂残留风险点：A.番茄花期喷6-BAB.水稻拔节前喷多效唑C.葡萄转色期喷乙烯利D.马铃薯块茎形成期喷CCCE.柑橘采收后浸IAA答案：ACE解析：花期与转色期距采收近，易超标；CCC在禾本科安全，IAA采后浸果易残留，B、D风险低。三、判断题（每题1分，共10分）16.赤霉素在酸性条件下稳定，可用0.1%甲酸水溶液作为提取溶剂。答案：√解析：GA₃在pH2-4稳定，甲酸可抑制内源酶活。17.采用C18柱分离ABA时，流动相中加入5mmol/L乙酸铵会降低保留时间。答案：√解析：乙酸铵增加离子强度，减弱ABA与固定相疏水作用，保留缩短。18.6-BA在紫外区无吸收，故无法用HPLC-UV直接检测。答案：×解析：6-BA嘌呤环在267nm有中等强度吸收，可直接检测，但灵敏度低于荧光或质谱。19.乙烯利在碱性条件下可自发释放乙烯，故样品前处理应维持pH<3。答案：√解析：pH>4即开始分解，控制酸性可抑制降解，确保测定准确。20.使用酶联免疫法时，显色终止液为2mol/LH₂SO₄，其作用是降低pH终止酶活。答案：√解析：HRP-TMB体系在酸性条件下由蓝变黄，固定显色强度。21.矮壮素属于季铵盐，可用离子色谱-电导检测器直接测定。答案：√解析：季铵阳离子在阳离子交换柱分离，电导检测无需衍生。22.多效唑在土壤中半衰期短于7天，无需监测土壤残留。答案：×解析：多效唑半衰期可达数月，需长期监测。23.采用QuEChERS净化时，PSA吸附剂可去除脂肪酸与糖类，但对6-BA无保留。答案：√解析：PSA为伯仲胺，可去酸与糖，6-BA为中性嘌呤，不被保留。24.在IAA生物测定（燕麦弯曲试验）中，需保持琼脂块pH5.5-6.0。答案：√解析：该pH接近燕麦最适生长范围，过高或过低抑制弯曲。25.使用GC-MS测定时，若进样口温度设为300℃，乙烯利衍生产物不会热分解。答案：×解析：PFB-乙烯利酯在高温下易脱氯，进样口温度应≤250℃。四、填空题（每空1分，共15分）26.赤霉素GA₃分子式为________，分子量________。答案：C₁₉H₂₂O₆，346.37解析：准确记忆结构式与分子量，便于配制标准溶液。27.采用HPLC-UV测定ABA时，常用内标为________，其同位素标记形式为________。答案：脱落酸-d₄，(±)-2,4,6,8-D₄-ABA解析：氘代内标四取代，质量差4，避免重叠。28.6-BA在0.1mol/LHCl中最大吸收波长为________nm，摩尔吸光系数约________L·mol⁻¹·cm⁻¹。答案：267，1.4×10⁴解析：实验测定值，用于计算检测限。29.乙烯利在pH7、25℃条件下半衰期约________min，其降解产物为________与________。答案：30，乙烯，磷酸解析：一级动力学模型测定结果。30.多效唑在土壤中的吸附系数K_d平均值为________mL/g，表明其属于________移动性农药。答案：120，低解析：K_d>100为不易移动，需关注累积风险。31.采用LC-MS/MS时，电喷雾离子化（ESI）模式下，CCC形成的前体离子为________，子离子为________。答案：m/z122，m/z58解析：季铵裂解丢失氯代丁烯，形成三甲基铵碎片。32.在IAA-FeCl₃显色体系中，显色后溶液需在________min内测定吸光度，否则结果会________。答案：15，偏低解析：显色产物不稳定，继续氧化导致褪色。33.测定番茄中6-BA残留时，样品匀浆后需立即加入________%甲酸，目的为________。答案：1，抑制酶促降解解析：降低pH抑制吲哚乙酸氧化酶与细胞分裂素氧化酶。34.采用气相色谱测定多效唑时，色谱柱应选用________极性柱，膜厚________μm。答案：中等，0.25解析：DB-35ms或等效柱，膜厚兼顾容量与分辨率。35.在QuEChERS提取步骤中，MgSO₄的作用是________，NaCl的作用是________。答案：除水，盐析分层解析：MgSO₄放热除水，NaCl降低有机相溶解度促进分层。五、简答题（每题10分，共30分）36.详述采用HPLC-UV测定苹果中6-BA残留的完整前处理流程，并说明关键控制点。答案：（1）样品制备：取苹果可食部分500g，四分法缩分至50g，液氮研磨成粉。（2）提取：准确称取10.00g于50mL离心管，加入20mL含1%甲酸的乙腈，高速匀浆1min，再加入4gMgSO₄与1gNaCl，涡旋2min，8000r/min离心5min，取上清10mL。（3）净化：将上清转移至含150mgPSA与300mgMgSO₅的15mL离心管，涡旋1min，离心5min，取6mL净化液，40℃氮吹至近干，用1mL20%乙腈水（含0.1%甲酸）复溶，过0.22μm有机滤膜。（4）仪器条件：C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相A为0.1%甲酸水，B为乙腈，梯度0-5min20%B，5-15min20-80%B，15-20min80%B，流速1mL/min，柱温30℃，进样20μL，检测波长267nm。（5）关键控制点：①提取液酸度需≤pH3，防止6-BA降解；②PSA用量不宜超过200mg，否则回收率下降；③氮吹温度≤40℃，避免热降解；④标准曲线需随行，相关系数R²≥0.999；⑤每批次做空白与加标，回收率80-110%，RSD<5%。37.试比较GC-MS与LC-MS/MS测定多效唑的优缺点，并给出方法选择建议。答案：GC-MS优点：①色谱分辨率高，峰形窄；②质谱库丰富，定性可靠；③检出限低（0.001mg/kg）。缺点：①需衍生，步骤繁琐；②高温进样易降解；③对含水样品敏感，需严格除水。LC-MS/MS优点：①无需衍生，直接测定；②前处理简单，QuEChERS即可；③可分析热不稳定样品；④同位素内标校正，准确度高。缺点：①基质效应显著，需优化净化；②离子源易污染，维护频繁；③仪器成本高。选择建议：大批量果蔬日常监测首选LC-MS/MS，快速高效；若实验室无LC-MS/MS或需仲裁复检，可采用GC-MS，但需验证衍生效率。对于土壤等干基质，两种方法均可，LC-MS/MS更省时。38.描述采用水稻幼苗第二叶鞘法测定赤霉素活性的详细步骤，并说明如何减少误差。答案：（1）材料准备：选敏感水稻品种“爱知旭”，28℃浸种24h，黑暗催芽48h，选取芽长5mm幼苗，用黑纸卷培于塑料杯，加1/2Hoagland，黑暗28℃培养48h，选第二叶鞘长2-3mm的整齐幼苗。（2）标准溶液：GA₃配成0.01、0.1、1、10、100mg/L系列，含0.05%Tween-20。（3）处理：于叶鞘基部滴加2μL药液，对照滴蒸馏水，每处理20株，3次重复，继续黑暗培养48h。（4）测量：用游标卡尺量第二叶鞘长度，计算净伸长=处理-对照。（5）绘图：以净伸长为y，浓度对数为x，绘制S形曲线，用Logistic方程求EC₅₀。（6）误差控制：①严格黑暗，任何光照均导致内源激素变化；②温度波动≤±0.5℃；③选苗一致，剔除过大过小；④药液现配现用，避免GA₃降解；⑤操作人员盲法编号，减少主观偏差；⑥每批次加阳性对照（10mg/LGA₃）验证敏感性。六、综合实验设计题（30分）39.某实验室首次承担“葡萄中乙烯利残留普查”任务，要求方法定量限≤0.01mg/kg，回收率70-120%，RSD<10%，样品量>200份/周。请设计一套完整实验方案，包括：（1）前处理流程；（2）仪器条件；（3）质量控制；（4）数据报告格式；（5）突发问题应急预案。答案：（1）前处理流程：①样品制备：取整串葡萄去蒂，匀浆，-20℃保存；②提取：称10g于50mL管，加20mL1%甲酸乙腈，匀浆1min，加4gMgSO₄+1gNaCl，涡旋2min，离心；③净化：取8mL上清至含150mgPSA+300mgMgSO₄的15mL管，涡旋，离心；④衍生：取5