体外诊断试剂相关试题及答案解析

体外诊断试剂相关试题及答案解析一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.根据《体外诊断试剂注册管理办法》，第三类体外诊断试剂注册检验用样品数量不得少于（）A.1批次B.2批次C.3批次D.5批次答案：C解析：法规明确要求第三类试剂注册检验用样品≥3批次，以保证检验结果的代表性。2.酶联免疫吸附试验（ELISA）中，TMB显色底物在HRP催化下最终产物颜色的最大吸收波长为（）A.405nmB.450nmC.492nmD.630nm答案：B解析：TMB经HRP氧化后呈蓝色，终止后变为黄色，最大吸收450nm。3.实时荧光PCR中，用于消除引物二聚体干扰的荧光探针类型是（）A.SYBRGreenⅠB.TaqManC.FRETD.MolecularBeacon答案：D解析：MolecularBeacon具有发夹结构，仅与特异靶序列结合才产生荧光，可区分引物二聚体。4.关于胶体金免疫层析法，下列说法错误的是（）A.检测线包被的是标记抗体B.质控线包被的是抗种属IgGC.结果判读可用目测法D.属于膜固相免疫分析答案：A解析：检测线包被的是捕获抗体，标记抗体已结合在胶体金颗粒上。5.校准品赋值的不确定度主要来源不包括（）A.参考物质定值B.测量重复性C.试剂批间差D.实验室温湿度答案：D解析：温湿度影响测量系统，但不是校准品赋值不确定度的直接分量。6.依据ISO17511，对参考测量程序的描述正确的是（）A.必须有国家计量院参与B.测量结果可溯源至SI单位C.仅用于一级参考物质定值D.不需要不确定度评估答案：B解析：参考测量程序的核心特征是可提供SI单位溯源。7.化学发光免疫分析中，采用“闪光型”发光体系的是（）A.吖啶酯B.ALPAMPPDC.HRP鲁米诺D.三联吡啶钌答案：A解析：吖啶酯在碱性H₂O₂条件下瞬间发光，属闪光型。8.关于体外诊断试剂的稳定性试验，下列说法正确的是（）A.加速试验温度通常选择37℃B.实时稳定性可替代加速稳定性C.开瓶稳定性只需考察1周D.运输稳定性无需单独设计答案：A解析：37℃加速试验可在较短时间内预测长期稳定性。9.血细胞分析仪用溶血剂的主要作用是（）A.溶解红细胞，释放血红蛋白B.固定白细胞膜C.抑制血小板聚集D.提高血浆渗透压答案：A解析：溶血剂破坏红细胞膜，便于白细胞分类及血红蛋白测定。10.流式细胞术交叉配血中，检测受者血清中预存HLA抗体采用的方法是（）A.CDC试验B.ELISAC.LuminexD.补体结合试验答案：C解析：Luminex平台用荧光微珠包被HLA抗原，灵敏度高于传统CDC。11.下列哪项不是质控图的Westgard多规则之一（）A.12sB.13sC.22sD.10x答案：A解析：12s仅作为警告规则，不列为失控规则。12.时间分辨荧光免疫分析中，镧系元素螯合物的荧光寿命通常为（）A.10⁻⁹sB.10⁻⁶sC.10⁻³sD.10³s答案：C解析：镧系螯合物荧光寿命约10⁻³s，远高于背景，可实现时间分辨。13.用于糖化血红蛋白（HbA1c）测定的一级参考方法为（）A.HPLCB.免疫比浊C.IFCCHPLCMSD.亲和层析答案：C解析：IFCC推荐的HPLCMS/MS为一级参考方法，可溯源至SI。14.关于CEIVDR法规，技术文档中“性能评估报告”不包括（）A.科学合理性B.分析性能C.临床性能D.上市后监管答案：D解析：上市后监管为独立模块，不属于性能评估报告。15.血培养瓶加入树脂颗粒的主要目的是（）A.吸附抗生素B.提供营养C.指示溶血D.增加CO₂答案：A解析：树脂可吸附血液中抗生素，提高阳性率。16.微滴式数字PCR中，阳性微滴比例与靶分子拷贝数的关系遵循（）A.朗伯比尔定律B.泊松分布C.米氏方程D.中心极限定理答案：B解析：拷贝数通过泊松分布公式计算：c=–ln(1–p)。17.免疫比浊法测定D二聚体时，导致假阴性最常见的原因是（）A.嗜异性抗体B.抗原过量C.试剂过期D.溶血答案：B解析：抗原过量导致“前带现象”，信号反而下降。18.凝血酶原时间（PT）测定用组织因子来源常选用（）A.兔脑粉B.人胎盘C.牛血清D.大肠杆菌重组答案：A解析：兔脑粉富含组织因子，为WHO推荐来源。19.关于NGS测序体外诊断试剂盒，下列说法错误的是（）A.需提交生信分析流程验证报告B.可仅验证DNA水平变异C.需考察最低起始模板量D.需评估交叉污染风险答案：B解析：需同时验证DNA及RNA水平变异（如融合基因）。20.血细胞分析仪用质控物“三水平”不包括（）A.正常B.高值C.低值D.病理值答案：D解析：三水平指正常、高、低，病理值非质控术语。21.化学发光试剂盒中，磁微粒包被抗体浓度常用测定方法为（）A.BradfordB.BCAC.紫外吸收D.放射免疫答案：B解析：BCA法灵敏、抗干扰强，适合磁珠包被后微量蛋白测定。22.用于HPV分型检测的CEIVD试剂盒，其临床验证样本数不得少于（）A.100例B.300例C.500例D.1000例答案：D解析：HPV属高风险筛查，需大样本验证，指南建议≥1000例。23.血培养报阳时间（TTP）延长，最不可能的原因是（）A.采样前已用抗生素B.采血量不足C.使用树脂瓶D.低温运输答案：C解析：树脂瓶可吸附抗生素，缩短TTP。24.关于胶体金标记，下列说法正确的是（）A.金颗粒越大，灵敏度越高B.最适pH为蛋白等电点C.标记后需封闭剩余位点D.可用透析法纯化答案：C解析：标记后需用BSA封闭，防止非特异吸附。25.免疫层析读数仪的CV值计算需采集（）A.峰面积B.峰高C.灰度积分D.反射光强度答案：D解析：读数仪采集的是检测线反射光强度，计算CV。26.血细胞分析仪用稀释液中，氰化高铁血红蛋白法含（）A.KCNB.NaCNC.K₃[Fe(CN)₆]D.以上均有答案：D解析：含KCN与K₃[Fe(CN)₆]，形成氰化高铁血红蛋白。27.关于校准品互换性，下列说法错误的是（）A.可用患者样本评价B.参考物质必然互换C.互换性影响溯源有效性D.需统计评价斜率差异答案：B解析：参考物质若不具互换性，无法保证溯源有效性。28.微流控芯片PCR中，下列哪项为关键质控参数（）A.芯片表面粗糙度B.热循环速率C.荧光采集角度D.电极电压答案：B解析：微流控热循环速率影响扩增效率，需标准化。29.血凝仪测定APTT时，加入白陶土的作用是（）A.提供磷脂表面B.激活Ⅻ因子C.螯合钙离子D.抑制肝素答案：B解析：白陶土可激活Ⅻ因子，启动内源凝血途径。30.用于新冠病毒抗原检测的胶体金试剂，其灵敏度评价标本宜选用（）A.鼻咽拭子Ct≤25B.鼻咽拭子Ct≤30C.鼻咽拭子Ct≤35D.唾液Ct≤25答案：A解析：Ct≤25代表高病毒载量，用于验证灵敏度下限。二、多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，多选、少选、错选均不得分）31.下列哪些属于体外诊断试剂“分析性能”指标（）A.准确度B.检出限C.线性范围D.临床敏感性答案：A、B、C解析：临床敏感性属临床性能，非分析性能。32.关于CEIVDR分类规则，下列哪些情况属于ClassC（）A.血型检测B.肿瘤伴随诊断C.性传播病原筛查D.血糖自测答案：A、B、C解析：血糖自测属ClassB。33.实时荧光PCR扩增效率降低的常见原因有（）A.引物二聚体B.模板降解C.酶活性下降D.退火温度过高答案：B、C、D解析：引物二聚体不影响效率，但影响特异性。34.血细胞分析仪计数血小板假性降低可见于（）A.巨大血小板B.血小板聚集C.红细胞碎片D.白细胞碎片答案：B、C、D解析：巨大血小板易被计入红细胞，不导致假性降低。35.下列哪些方法可用于去除嗜异性抗体干扰（）A.热灭活B.加入HBRC.稀释法D.更换检测平台答案：A、B、C、D解析：均为常用阻断策略。36.关于校准品赋值，下列哪些描述正确（）A.需用参考测量程序B.需不确定度评估C.可仅使用厂家内部方法D.需互换性验证答案：A、B、D解析：仅用内部方法无法保证溯源。37.化学发光试剂盒中，导致Hook效应的因素有（）A.抗原过高B.抗体过高C.孵育时间过短D.标记物过量答案：A、C解析：抗原过高及孵育短易出现Hook。38.血培养系统报阳后，需立即进行的操作有（）A.革兰染色B.转种血平板C.做药敏D.涂片湿片答案：A、B、D解析：药敏需纯培养后执行。39.下列哪些属于NGS建库试剂盒的性能指标（）A.文库浓度B.片段分布C.错误率D.交叉污染率答案：A、B、C、D解析：均为建库关键指标。40.关于体外诊断试剂稳定性试验，需考察的阶段有（）A.实时B.加速C.运输D.开瓶答案：A、B、C、D解析：完整稳定性需覆盖全生命周期。三、填空题（每空1分，共20分）41.依据ISO15189，实验室应使用__________作为内部质控的最低要求。答案：第三方质控品解析：避免厂家“自我质控”偏差。42.实时荧光PCR的扩增曲线呈“S”型，其基线期代表__________。答案：背景荧光信号解析：基线期荧光无显著增长，反映背景。43.血细胞分析仪用血红蛋白测定波长为__________nm。答案：540解析：氰化高铁血红蛋白法标准波长。44.凝血酶原时间（PT）的国际敏感指数（ISI）越接近__________，试剂灵敏度越高。答案：1.0解析：ISI=1.0代表与WHO参考品一致。45.胶体金颗粒与蛋白结合依靠的主要作用力为__________。答案：静电吸附解析：高pH下蛋白带负电，与金颗粒静电结合。46.依据CEIVDR，ClassD试剂的技术文档审查机构为__________。答案：欧盟参考实验室解析：ClassD需由EURL进行性能验证。47.微滴式数字PCR中，若阳性微滴数为p，总微滴数为N，则靶分子拷贝数λ=__________。答案：–ln(1–p/N)解析：泊松分布公式。48.化学发光免疫分析中，ALP底物AMPPD全称为__________。答案：3(2'螺旋金刚烷)4甲氧基4(3"磷酰氧基)苯基1,2二氧环乙烷解析：需完整写出。49.血培养瓶加入SPS的作用是__________。答案：抑制补体及吞噬细胞，提高病原菌存活解析：SPS为聚茴香脑磺酸钠。50.流式细胞术交叉配血中，FITC通道检测的是__________。答案：受者血清中HLA抗体与微珠结合后的荧光信号解析：间接免疫荧光法。四、简答题（共30分）51.（封闭型，6分）简述体外诊断试剂“检出限（LoD）”与“定量限（LoQ）”的区别，并写出LoD的常用估算公式。答案：LoD指在95%置信度下可检出的最低浓度，但不一定精确定量；LoQ指满足预设准确度（偏倚±总误差）的最低定量浓度。LoD估算：LoD=LoB+1.645×SD低值样本，其中LoB为空白限，SD低值样本为低浓度样本标准差。52.（封闭型，6分）列举导致ELISA假阳性的三种内源性干扰因素，并给出各自消除策略。答案：1.嗜异性抗体：加入HBR（异嗜性抗体阻断剂）或使用非人源抗体片段。2.类风湿因子：使用Fc片段封闭或更换检测平台为IgM捕获法。3.补体：56℃热灭活30min或加入EDTA螯合钙离子。53.（开放型，8分）结合ISO17511，阐述体外诊断试剂量值溯源到SI单位的路径，并指出哪一类物质无法实现SI溯源及替代方案。答案：路径：SI单位（mol/kg）→一级参考物质→参考测量程序→二级参考物质→厂家校准品→终端用户样本。无法SI溯源：如肿瘤标志物CA125，无明确分子结构，不能定义摩尔质量。替代方案：使用国际约定校准品（WHO国际标准），建立“任意单位”溯源链，确保实验室间一致性。54.（封闭型，5分）写出实时荧光PCR中“ΔΔCt法”计算相对表达量的公式，并说明其前提条件。答案：公式：相对表达量=2^(–ΔΔCt)，ΔΔCt=(Ct靶基因–Ct内参)实验组–(Ct靶基因–Ct内参)对照组。前提：扩增效率接近100%且两组效率一致（偏差<5%）。55.（开放型，5分）简述NGS体外诊断试剂盒在临床性能验证中需考察的三大指标及其实验设计要点。答案：1.准确性：与金标准（Sanger或qPCR）对比，纳入突变频率1%–50%的样本≥200例，计算阳性符合率（PPA）≥95%。2.精密度：连续5天、每天3批、每批3次，检测高、中、低三个突变频率样本，计算总CV≤5%。3.检测限：使用突变型细胞系gDNA与野生型混合，配制AF0.1%、0.5%、1%样本，每浓度20次重复，95%检出率最低浓度即为LoD。五、应用题（共50分）56.（计算题，10分）某化学发光试剂盒校准曲线数据如下（双对数模型ln(y)=a+bln(x)）：校准点（IU/mL）0.5151050100RLU均值120250120024001200024000现测得质控品RLU=3600，求其浓度，并计算反推值的相对偏倚（已知靶值8.0IU/mL）。答案：取两点（5,1200）、（10,2400）计算斜率b=ln(2400/1200)/ln(10/5)=1.0，截距a=ln(1200)–1×ln(5)=4.787。由ln(y)=4.787+1×ln(x)，得x=exp[ln(3600)–4.787]=7.5IU/mL。相对偏倚=(7.5–8.0)/8.0×100%=–6.25%，在±10%内，合格。57.（分析题，15分）某医院新引进一台全自动血凝仪，需验证APTT试剂性能。实验室收集20例健康人样本，结果（s）如下：受试者1–10：28.529.030.128.929.530.029.228.829.429.6受试者11–20：30.531.029.830.230.629.930.330.731.130.4厂家声明参考范围25–35s，要求：（1）计算均值±SD及95%置信区间；（2）判断该批试剂是否满足参考范围要求；（3）若某患者APTT重复测定结果为40.1s、40.3s，如何报告？答案：（1）均值=29.9s，SD=0.77s，95%CI=29.9±1.96×0.77/√20=29.9±0.34s。（2）20例结果均在25–35s内，且95