靶向中性粒细胞CD235b的肿瘤治疗策略

靶向中性粒细胞CD235b的肿瘤治疗策略演讲人CONTENTS靶向中性粒细胞CD235b的肿瘤治疗策略中性粒细胞在肿瘤微环境中的生物学特征及靶向治疗意义CD235b的分子特性及其在中性粒细胞中的表达调控靶向CD235b的肿瘤治疗策略靶向CD235b治疗的临床前研究进展与挑战总结与展望目录01靶向中性粒细胞CD235b的肿瘤治疗策略靶向中性粒细胞CD235b的肿瘤治疗策略引言肿瘤微环境（TumorMicroenvironment,TME）的复杂性是制约肿瘤治疗效果的核心挑战之一。作为TME中最丰富的免疫细胞群体，中性粒细胞（Neutrophils）在肿瘤进程中扮演着“双刃剑”角色：一方面，其可通过释放活性氧（ROS）、抗菌肽等介质发挥直接抗肿瘤效应；另一方面，在肿瘤细胞分泌的GM-CSF、IL-6等因子作用下，中性粒细胞常向促肿瘤表型（N2型）极化，通过形成中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）、分泌基质金属蛋白酶（MMPs）等促进肿瘤转移、免疫逃逸及血管生成。近年来，中性粒细胞表面特异性标志物的发现为靶向调控其功能提供了新思路。其中，CD235b（血型糖蛋白A片段）作为一种传统上认为主要表达于红细胞系祖细胞的表面抗原，靶向中性粒细胞CD235b的肿瘤治疗策略近年研究发现在肿瘤相关中性粒细胞（Tumor-AssociatedNeutrophils,TANs）中存在异常高表达，且其表达水平与肿瘤进展、患者预后密切相关。这一发现为我们开发以TANs为靶点的肿瘤治疗策略提供了全新视角。本文将从CD235b的分子特性、在中性粒细胞中的表达调控机制出发，系统阐述靶向CD235b的肿瘤治疗策略及其临床转化潜力，并探讨当前面临的挑战与未来方向。02中性粒细胞在肿瘤微环境中的生物学特征及靶向治疗意义中性粒细胞的分化与亚型极化中性粒细胞起源于骨髓造血干细胞，在G-CSF、GM-CSF等细胞因子作用下分化成熟，通过血液循环迁移至感染或肿瘤部位。根据功能状态，中性粒细胞可分为抗肿瘤的N1型和促肿瘤的N2型：N1型中性粒细胞高表达CXCR2、CD177等分子，可通过吞噬作用、ADCC效应及分泌TNF-α、IFN-γ等抑制肿瘤生长；而N2型中性粒细胞则高表达CXCR4、PD-L1，通过分泌IL-10、TGF-β等免疫抑制因子，以及促进肿瘤细胞上皮-间质转化（EMT）和血管生成，加速肿瘤进展。研究表明，在乳腺癌、肺癌、胰腺癌等多种实体瘤中，TANs以N2型为主，且其浸润程度与患者不良预后显著相关。中性粒细胞作为治疗靶点的独特优势相较于T细胞、NK细胞等传统免疫细胞，中性粒细胞具有以下优势：1.数量优势：中性粒细胞占外周血白细胞的50%-70%，是TME中最丰富的免疫细胞群体，靶向干预可产生强大的生物效应；2.快速响应：中性粒细胞是机体固有免疫的“第一反应者”，其活化、迁移速度快，可快速富集至肿瘤部位；3.可塑性：中性粒细胞表型可受TME信号调控，通过靶向其表面标志物可诱导其向N1型极化，重塑免疫微环境。然而，中性粒细胞的短半衰期（6-8小时）和高异质性也给靶向治疗带来了挑战。因此，开发能特异性识别TANs表面标志物的靶向分子，是实现精准干预的关键。03CD235b的分子特性及其在中性粒细胞中的表达调控CD235b的分子结构与生物学功能CD235b（血型糖蛋白A片段，GlycophorinAfragment）是由GYPA基因编码的I型跨膜糖蛋白，分子量约31kDa，其胞外段含有多个唾液酸化O-糖链和N-糖链，胞内段与细胞骨架蛋白相连。传统观点认为，CD235b主要表达于红细胞系祖细胞及成熟红细胞，参与维持红细胞膜稳定性及血型抗原决定簇（如MNS血型系统）的构成。近年通过单细胞测序和流式细胞术发现，CD235b在TANs中存在异常表达，且其表达水平与肿瘤分期、转移风险呈正相关。CD235b在中性粒细胞中的表达特征1.表达特异性：健康人外周血中性粒细胞几乎不表达CD235b，而在肿瘤患者外周血及肿瘤组织中，约30%-50%的TANs高表达CD235b，且以N2型中性粒细胞为主；2.表达调控机制：CD235b在中性粒细胞中的表达受TME中多种信号分子调控。例如，肿瘤细胞分泌的IL-6可通过STAT3信号通路激活GYPA基因转录；缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）则可通过结合GYPA基因启动子区的缺氧反应元件（HRE）上调其表达；此外，NETs的形成过程也会促进CD235b的暴露与表达；3.临床相关性：在非小细胞肺癌（NSCLC）、结直肠癌（CRC）等患者中，外周血CD235b+中性粒细胞比例与肿瘤负荷、淋巴结转移及化疗耐药性显著相关，提示其可作为潜在的生物标志物。04靶向CD235b的肿瘤治疗策略靶向CD235b的肿瘤治疗策略基于CD235b在TANs中的特异性表达及其促肿瘤作用，靶向CD235b的治疗策略可通过以下途径实现：直接清除CD235b+TANs、逆转其促表型、或利用其作为“靶点”递送治疗分子。以下从不同技术维度展开详述。靶向CD235b的单克隆抗体药物单克隆抗体（mAb）是肿瘤靶向治疗的核心工具，通过抗原-抗体特异性结合发挥效应。针对CD235b的mAb可通过以下机制发挥抗肿瘤作用：靶向CD235b的单克隆抗体药物抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）通过抗体Fc段与巨噬细胞、NK细胞等效应细胞的Fcγ受体（FcγR）结合，介导对CD235b+TANs的杀伤。例如，人源化抗CD235b抗体（如α-CD235bmAb）在体外实验中可显著增强NK细胞对TANs的ADCC效应，减少TME中N2型中性粒细胞比例，进而抑制肿瘤转移。靶向CD235b的单克隆抗体药物补体依赖的细胞毒性（CDC）抗体结合CD235b后，可通过经典补体激活途径形成膜攻击复合物（MAC），直接溶解CD235b+TANs。研究表明，α-CD235bmAb联合补体成分C1q可显著降低肿瘤组织中TANs的存活率，且对正常中性粒细胞功能无明显影响，提示其良好的安全性。靶向CD235b的单克隆抗体药物抗体药物偶联物（ADC）将抗CD235b抗体与细胞毒性药物（如MMAE、PDM1）通过连接子偶联，可实现对CD235b+TANs的精准杀伤。例如，抗CD235b-ADC在荷瘤小鼠模型中可特异性富集于肿瘤部位，通过释放毒素清除TANs，同时减少NETs的形成，抑制乳腺癌肺转移。其优势在于“导弹效应”，既可靶向清除促肿瘤中性粒细胞，又可避免传统化疗对正常组织的毒性。靶向CD235b的单克隆抗体药物阻断CD235b的信号转导CD235b胞内段与细胞骨架蛋白相连，其交联可激活下游信号通路（如PI3K/Akt、MAPK），促进中性粒细胞存活与活化。开发抗CD235b的功能阻断性抗体，可抑制TANs的迁移、浸润及促细胞因子分泌，逆转其促肿瘤表型。靶向CD235b的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法CAR-T细胞是肿瘤免疫治疗的革命性突破，其通过在T细胞表面表达嵌合抗原受体（CAR），特异性识别肿瘤相关抗原并发挥杀伤效应。将CD235b作为CAR-T靶点，具有以下优势：靶向CD235b的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法靶向特异性与安全性由于健康中性粒细胞几乎不表达CD235b，CAR-T细胞对正常中性粒细胞的脱靶风险较低。此外，中性粒细胞寿命短，即使CAR-T细胞误杀伤部分正常中性粒细胞，也较少引发严重感染（与长期中性粒细胞减少症不同）。靶向CD235b的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法CAR-T细胞的设计与优化STEP4STEP3STEP2STEP1针对CD235b的CAR-T细胞通常包含以下结构：-胞外抗原识别域：采用抗CD235b单抗的scFv片段，确保与CD235b的高亲和力结合；-铰链区与跨膜区：选用CD8α或CD28铰链区，增强CAR-T细胞的稳定性与活化效率；-胞内信号域：包含CD3ζ（启动T细胞活化）和共刺激域（如CD28、4-1BB），增强CAR-T细胞的增殖与持久性。靶向CD235b的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法临床前研究进展在NSCLC小鼠模型中，CD235bCAR-T细胞可显著浸润肿瘤组织，清除CD235b+TANs，同时上调M1型巨噬细胞比例及CD8+T细胞浸润，显著抑制肿瘤生长。此外，CAR-T细胞分泌的IFN-γ可进一步下调肿瘤细胞PD-L1表达，逆转免疫抑制微环境。靶向CD235b的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法面临的挑战与改进方向尽管CD235bCAR-T前景广阔，但仍存在以下挑战：-TANs的异质性：并非所有TANs均表达CD235b，可能导致部分靶细胞逃逸；-TME的免疫抑制：肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）、调节性T细胞（Tregs）等可通过分泌TGF-β、IL-10等抑制CAR-T细胞活性；-细胞因子释放综合征（CRS）风险：CAR-T细胞过度活化可能引发严重CRS，需通过优化CAR结构（如引入“安全开关”）或联合细胞因子拮抗剂进行控制。双特异性抗体（BsAb）策略双特异性抗体可同时结合两个不同抗原，实现“双重靶向”。针对CD235b的双特异性抗体可通过以下方式增强抗肿瘤效果：1.CD235b×CD3双抗将抗CD235b抗体与抗CD3抗体通过Fcengineering或连接子偶联，可同时结合TANs表面的CD235b和T细胞表面的CD3，招募T细胞杀伤CD235b+TANs。例如，CD235b×CD3双抗在体外可显著促进T细胞对TANs的裂解，且在荷瘤小鼠模型中可减少TANs浸润，抑制肿瘤转移。双特异性抗体（BsAb）策略2.CD235b×PD-1/PD-L1双抗将抗CD235b抗体与抗PD-1/PD-L1抗体偶联，可在清除CD235b+TANs的同时，阻断PD-1/PD-L1通路，恢复CD8+T细胞的抗肿瘤活性。这种策略既可“减负”（减少免疫抑制细胞），又可“增效”（增强T细胞功能），具有协同抗肿瘤效应。双特异性抗体（BsAb）策略CD235b×肿瘤抗原双抗针对高表达特定肿瘤抗原（如HER2、EGFR）的肿瘤，可开发CD235b×肿瘤抗原双抗，实现“肿瘤细胞+TANs”双重靶向。例如，CD235b×HER2双抗可同时结合TANs和HER2+肿瘤细胞，通过ADCC效应清除两者，并减少TANs对肿瘤细胞的促转移作用。小分子抑制剂与多肽类药物除抗体类药物外，小分子抑制剂和多肽也可通过靶向CD235b或其下游信号通路发挥抗肿瘤作用：小分子抑制剂与多肽类药物靶向CD235b糖基化修饰的小分子抑制剂CD235b的唾液酸化O-糖链是其与配体（如选择素）结合的关键结构，介导中性粒细胞与内皮细胞的黏附及迁移。开发唾液酸转移酶（如ST6Gal1）抑制剂，可抑制CD235b的糖基化修饰，阻断中性粒细胞向肿瘤部位的浸润。例如，ST6Gal1抑制剂OGT2115在乳腺癌模型中可显著减少TANs浸润，抑制肺转移。小分子抑制剂与多肽类药物靶向CD235b-蛋白互作的多肽通过筛选噬菌体展示库，可发现与CD235b胞外段特异性结合的多肽，竞争性阻断其与细胞骨架蛋白的互作，抑制中性粒细胞的活化与迁移。例如，多肽CD235b-Pep可结合CD235b的胞外结构域，降低TANs的迁移能力，减少NETs的形成。联合治疗策略单一靶向CD235b的治疗策略可能面临耐药或疗效有限的问题，联合其他治疗手段可显著提高抗肿瘤效果：联合治疗策略与免疫检查点抑制剂（ICI）联合CD235b+TANs高表达PD-L1，可通过PD-1/PD-L1通路抑制T细胞功能。抗CD235b抗体联合PD-1抑制剂可同时清除TANs并恢复T细胞活性，产生协同抗效应。例如，在CRC模型中，α-CD235bmAb联合抗PD-1抗体可显著延长小鼠生存期，且优于单药治疗。联合治疗策略与化疗联合化疗药物（如紫杉醇、吉西他滨）可诱导肿瘤细胞免疫原性死亡，释放肿瘤抗原，增强抗肿瘤免疫反应。同时，化疗可暂时性减少中性粒细胞数量，降低TANs对靶向治疗的“竞争”。例如，紫杉醇联合α-CD235b-ADC在胰腺癌模型中可显著提高肿瘤缓解率，减少肝转移。联合治疗策略与放疗联合放疗可通过局部照射诱导免疫原性细胞死亡，促进树突状细胞（DCs）成熟及T细胞浸润。同时，放疗可上调TANs表面CD235b的表达，增强靶向治疗的敏感性。例如，局部放疗联合CD235bCAR-T细胞在NSCLC模型中可显著增强CAR-T细胞的肿瘤浸润，提高抑瘤效果。05靶向CD235b治疗的临床前研究进展与挑战临床前研究的关键进展近年来，针对CD235b的靶向治疗策略在临床前模型中展现出显著疗效：1.体外研究：通过流式细胞术和Transwell实验证实，抗CD235b抗体可显著抑制TANs的迁移、浸润及促细胞因子分泌，并诱导其凋亡；2.动物模型：在乳腺癌、肺癌、胰腺癌等多种移植瘤和原位瘤模型中，α-CD235bmAb、CD235bCAR-T细胞等均可显著抑制肿瘤生长，减少转移，延长生存期；3.安全性评估：在非人灵长类动物模型中，抗CD235b抗体治疗未观察到明显肝肾功能损伤或血液学毒性，提示其良好的安全性。面临的挑战与解决思路尽管临床前研究数据积极，但靶向CD235b的治疗仍面临以下挑战：面临的挑战与解决思路CD235b表达的异质性不同肿瘤类型、不同患者甚至同一肿瘤的不同区域，TANs中CD235b的表达水平存在差异。解决思路包括：-开发基于多组学（转录组、蛋白组）的患者分层策略，筛选CD235b高表达人群；-联合靶向其他中性粒细胞表面标志物（如CD177、PD-L1），扩大靶细胞覆盖范围。010302面临的挑战与解决思路脱靶效应与安全性尽管健康中性粒细胞几乎不表达CD235b，但红细胞系祖细胞可低表达CD235b。长期靶向治疗可能影响红细胞生成，导致贫血。解决思路包括：-优化抗体的亲和力，选择仅识别高亲和表位的抗体，避免与低表达CD235b的红细胞系祖细胞结合；-开发局部给药策略（如瘤内注射），减少全身暴露。面临的挑战与解决思路免疫逃逸与耐药性肿瘤细胞可通过下调CD235b表达、上调免疫抑制分子等方式逃避免疫清除。解决思路包括：010203-联合表观遗传药物（如DNMT抑制剂），上调肿瘤细胞及TANs中CD235b的表达；-靶向CD235b下游信号通路（如PI3K/Akt），克服耐药。面临的挑战与解决思路临床转化技术瓶颈CAR-T细胞治疗实体瘤面临肿瘤浸润效率低、TME抑制等问题。解决思路包括：0